一种测定烟草中茄尼醇的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定烟草中茄尼醇的方法，使用以下装置：样品萃取瓶，包括：外套管(1)；内套管(2)；导液管(4；筛板(3)，位于所述内套管(2)的下端开口内，为一个或多个；该方法包括以下步骤：①烟草超声萃取；②过滤和转移；③作出色谱图；④与标准色谱图的峰面积，即可得到烟草中茄尼醇的含量。本发明专利技术使用的装置具有处理简单、方便、效果好的优点。本发明专利技术的测定方法具有定量准确、重复性好、检出限低等优点，适用于大批量样品的准确测试。为烟草使用过程中的安全性监管提供有效的技术支持。

A method for determination of Solanesol in tobacco

The invention discloses a method for determining solanesol in tobacco, which uses the following devices: a sample extraction bottle, including an outer casing (1); an inner casing (2); a liquid conducting tube (4; a sieve plate (3), which is located in the lower end opening of the inner casing (2), and is one or more; the method comprises the following steps: (1) ultrasonic extraction of tobacco; and (2) filtration and rotation; The content of Solanesol in tobacco can be obtained from the peak area of standard chromatogram. The device used in the invention has the advantages of simple processing, convenience and good effect. The determination method of the invention has the advantages of accurate quantification, good repeatability and low detection limit, and is suitable for accurate test of large quantities of samples. To provide effective technical support for tobacco safety supervision.

【技术实现步骤摘要】
一种测定烟草中茄尼醇的方法
本专利技术属于分析化学
，具体涉及一种测定烟草中茄尼醇的方法。
技术介绍
茄尼醇是烟草中主要的萜类化合物成分之一，为聚异戊二烯醇类化合物，具有抗菌、消炎、止血等多种生理活性。同时，茄尼醇还是一种重要的医药中间体，是泛醌类药物中间体不可替代的成分，也是合成维生素K的侧链和辅酶Q10以及合成抗溃疡药物、抗癌药物不可替代的天然原料，具有很高的药用价值。在烟草中，茄尼醇是卷烟烟气中苯并[a]芘形成的重要前体化合物，它的含量直接影响了卷烟烟气中苯并[a]芘的释放量，进而对卷烟烟气的安全性产生直接影响。因此，对烟草中茄尼醇的准确测定对烟草质量控制具有非常重要的意义。根据文献报道，测定茄尼醇最常用的方法是高效液相色谱法，包括正相色谱和反相色谱两种分离模式，检测方法主要有示差折光检测、紫外检测和蒸发光散射检测等。目前，国家标准GB/T31758-2015也是采用高效液相色谱法测定烟叶和烟叶提取物中的茄尼醇。但是，传统液相色谱法在分析茄尼醇时会存在许多问题，如：色谱分析时间过长，样品前处理需经氢氧化钠的甲醇溶液皂化处理、正己烷萃取、水除去杂质等步骤，步骤繁多、操作复杂麻烦，且准确性较差。因此，当前急需开发一种简单、快速，准确、可靠的高通量分析方法用于测定烟草中的茄尼醇。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一种测定烟草中茄尼醇的方法，为烟草质量控制提供技术支持。本专利技术的目的还在于提供一种与上述方法配合使用的，能够对烟草样品进行快速皂化、萃取、干燥过滤并直接收集滤液的装置，以简化样品前处理步骤，整个检测的前处理过程不需要转移样品，提高了分析效率，可为烟草中茄尼醇的准确测定提供有效的保障。本专利技术的目的是通过以下技术方案予以实现的。一种测定烟草中茄尼醇的方法，其特征在于，使用以下装置：样品萃取瓶，包括：外套管1，其底部密封且为平底，其口部有一密封圈11；内套管2，其外径与所述外套管1的内径相适配，其的长度大于所述外套管1的长度；导液管4，位于所述内套管2内，其下端有一扩张口与所述内套管2的下端内壁密封固定连接，其与所述内套管2上端口固定连接形成受压面21，其上部伸出所述内套管2外部，并回弯向下；筛板3，位于所述内套管2的下端开口内，为一个或多个；该方法包括以下步骤：①粉碎冻干的烟草样品，过40目筛，称取0.1～0.5g，倒入外套管中，加入10mL的皂化试剂，在50～70℃恒温超声波水浴锅中超声皂化30～50min；②待皂化反应完全后，再向步骤①的外套管中分别加入20mL正己烷和5mL超纯水，振荡萃取5～15min，静置5～15min待溶液分层后，插入内套管并用力下压，使上层的正己烷萃取液通过过滤筛板进导液管进入到样品收集瓶中，冷却至室温得到待分析的样品滤液；③采用液相色谱对步骤②得到的样品滤液进行分析，用蒸发光散射检测器定量测定茄尼醇，作出烟草中茄尼醇的色谱图；④对比步骤③得到的色谱图中的样品中茄尼醇的峰面积与标准溶液色谱图的峰面积，即可得到烟草中的茄尼醇含量。优选地，步骤①所述的皂化试剂为0.6mol/L的氢氧化钾溶液，其溶剂为乙醇。优选地，步骤②萃取液过滤过程中，弃去最初流出的2～3mL滤液，收集1～1.5mL滤液作为样品滤液。优选地，步骤③所述的液相色谱条件为：色谱柱：WatersAcquityUPLCTMBEHC18(2.1×50mm,1.7μm)分析柱；流动相：体积比为50:50的甲醇:乙腈；洗脱方式：等度洗脱；流速：0.8mL/min；进样量：5μL；柱温：30℃；检测器：蒸发光散射检测器；漂移管温度：80℃；载气：氮气；流速：2.0mL/min。优选地，所述筛板3为两个，其孔径为0.45μm，两筛板之间装填有无水硫酸钠。所述的内套管的内径优选分别为1～3cm，长度为4～8cm。本专利技术的方法使用样品萃取瓶集萃取、过滤、转移为一体，样品在外套管1中萃取结束后；在受压面21处用力下压内套管2，萃取液通过筛板3过滤后进入到导液管4中，并从导液管4的回弯向下口流出进入样品瓶中，得到样品滤液并进行色谱分析。此过程样品的萃取、过滤、转移为一体，避免了操作所带来的实验误差。外套管1口部装有一个密封圈11，用于萃取时固定内套管2，以防止萃取液溅出以及样品过滤时缓冲。在本专利技术中，导液管4直径优选为1-2mm。本专利技术的有益效果为：(1)本专利技术使用的装置，样品的前处理过程中不需要转移样品就可以直接萃取、过滤并收集得到待分析样品，有效避免了操作所带来的实验误差。本专利技术烟草中的茄尼醇在4.0min内就可以完全得到分离，与目前GB/T31758-2015采用的分析方法相比，分析时间缩短了50％，相比于报道的方法可提高5倍以上，适用于大批量样品的准确测试；具有处理简单、方便、效果好的优点。(2)本专利技术的测定方法样品萃取效果和精密度均比传统方法有较大提高，分析结果与标准方法测定的结果相符合。具有定量准确、重复性好、检出限低等优点，适用于大批量样品的准确测试。该测定方法样品分析效率比传统方法有较大提高，可为烟草中茄尼醇的检测提供准确可靠的方法，有效保障了对烟草质量的控制。附图说明图1为本专利技术的外套管示意图；图2为本专利技术的内套管示意图；图3为本专利技术的萃取混合时内套管插入外套管口部示意图；图4为本专利技术的萃取液过滤、转移时内套管插入外套管内部示意图；图5为本专利技术的一个样品萃取瓶放置在样品萃取架上和样品收集瓶放置在样品收集架上时样品转移步骤的示意图；图6为茄尼醇标准溶液色谱图；图7为实施例1样品溶液中茄尼醇的色谱图。附图说明：1-外套管；2-内套管；21-受压面；3-筛板；4-导液管；5-样品萃取架；51-样品萃取瓶放置孔；6-样品收集架；61-样品瓶放置孔；62-废液收集瓶放置孔；610-样品收集瓶；620-废液收集瓶；11-密封圈；12-样品。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的详细描述。当以理解，实施例并不是对本专利技术保护范围的限定。实施例1对烟草样品1#进行取样，测定其中茄尼醇含量的方法，包括如下步骤：①样品前处理：对烟草样品1#进行取样，待冻干粉碎后，准确称取0.1g烟草样品(精确至0.1mg)于外套管中，加入10mL0.6mol/L的氢氧化钾乙醇溶液后，随后，利用密封圈将内套管卡在外套管的口部，在50℃恒温超声波水浴锅中超声皂化30min。待皂化反应完全后，再分别加入20mL正己烷和5mL超纯水，振荡萃取5min，静置5min待溶液分层后。用力下压内套管，此时上层正己烷萃取液就通过过滤筛板进入到导液管中，两层筛板间装填的无水硫酸钠可以对正己烷萃取液中的水份进行吸收，并从导液管中的细弯管流出，达到过滤和干燥正己烷萃取液的效果。从导液管的回弯向下口收集萃取液，最初流出的2mL弃去(收集到废液收集瓶620中)，不能用于分析，然后用色谱进样瓶(样品收集瓶610)直接收集1.0mL的样品滤液，冷却到室温后，供液相色谱分析。②液相色谱分析：色谱柱：WatersAcquityUPLCTMBEHC18(2.1×50mm,1.7μm)分析柱；流动相：甲醇-乙腈(50:50，体积比)；洗脱方式：等度洗脱；流速：0.8mL/min；进样量：5μL；柱温：30℃；检测器：蒸发光散射检测器；漂移管温度：8本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定烟草中茄尼醇的方法，其特征在于，使用以下装置：样品萃取瓶，包括：外套管(1)，其底部密封且为平底，其口部有一密封圈(11)；内套管(2)，其外径与所述外套管(1)的内径相适配，其的长度大于所述外套管(1)的长度；导液管(4)，位于所述内套管(2)内，其下端有一扩张口与所述内套管(2)的下端内壁密封固定连接，其与所述内套管(2)上端口固定连接形成受压面(21)，其上部伸出所述内套管(2)外部，并回弯向下；筛板(3)，位于所述内套管(2)的下端开口内，为一个或多个；该方法包括以下步骤：①称取烟草粉末0.1～0.5g，倒入外套管中，加入10mL的皂化试剂，在50～70℃恒温超声波水浴锅中超声皂化30～50min；②再向步骤①的外套管中分别加入20mL正己烷和5mL水，振荡萃取5～15min，静置5～15min待溶液分层后，插入内套管并用力下压，使上层的正己烷萃取液通过过滤筛板进导液管进入到样品收集瓶中，冷却至室温得到待分析的样品滤液；③采用液相色谱对步骤②得到的样品滤液进行分析，用蒸发光散射检测器定量测定茄尼醇，作出烟草中茄尼醇的色谱图；④对比步骤③得到的色谱图中的样品中茄尼醇的峰面积与标准溶液色谱图的峰面积，即可得到烟草中的茄尼醇含量。...

【技术特征摘要】
1.一种测定烟草中茄尼醇的方法，其特征在于，使用以下装置：样品萃取瓶，包括：外套管(1)，其底部密封且为平底，其口部有一密封圈(11)；内套管(2)，其外径与所述外套管(1)的内径相适配，其的长度大于所述外套管(1)的长度；导液管(4)，位于所述内套管(2)内，其下端有一扩张口与所述内套管(2)的下端内壁密封固定连接，其与所述内套管(2)上端口固定连接形成受压面(21)，其上部伸出所述内套管(2)外部，并回弯向下；筛板(3)，位于所述内套管(2)的下端开口内，为一个或多个；该方法包括以下步骤：①称取烟草粉末0.1～0.5g，倒入外套管中，加入10mL的皂化试剂，在50～70℃恒温超声波水浴锅中超声皂化30～50min；②再向步骤①的外套管中分别加入20mL正己烷和5mL水，振荡萃取5～15min，静置5～15min待溶液分层后，插入内套管并用力下压，使上层的正己烷萃取液通过过滤筛板进导液管进入到样品收集瓶中，冷却至室温得到待分析的样品滤液；③采用液相色谱对步骤②得到的样品滤液进行分析，用蒸发光散射检测器定量测定茄尼醇，...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘欣，黄海涛，李晶，许永，王晋，杨叶昆，孔维松，杨光宇，
申请(专利权)人：云南中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：云南,53