The present invention discloses a reagent kit for the genus Nematode-borne Polyhedrosis Virus in mulberry mosaic leaf roll disease, including two specific primers. The reagent kit also includes M_MLV reverse transcriptase, M_MLV enzyme reaction buffer, dNTPs, Taq DNA polymerase, Mg2+ and PCR reaction buffer. The invention also provides a detection method for mulberry mosaic leaf roll virus, which comprises the following steps: (1) extracting total RNA from the samples to be tested, (2) designing and synthesizing primers, (3) RT_PCR, (4) electrophoresis detection. The invention provides a reagent kit and a detection method of nematode-borne polyhedron virus in mulberry mosaic leaf roll disease, and uses RT_PCR method to detect nematode-borne polyhedron virus in mulberry mosaic leaf roll disease, saves time, greatly improves the operability, sensitivity and repeatability of detection, and is a mulberry mosaic leaf roll disease. Virus detection provides an effective way.
【技术实现步骤摘要】
一种桑花叶卷叶病中线虫传多面体病毒属病毒的试剂盒及其检测方法
本专利技术属于植物病毒检测
,具体涉及一种桑花叶卷叶病中线虫传多面体病毒属病毒的试剂盒及其检测方法。
技术介绍
桑花叶卷叶病又称桑花叶型萎缩病、花叶卷缩病等,是桑萎缩病的另一种。主要发生在春季和晚秋,引起桑叶卷缩、发皱、老硬,影响春叶和夏叶的产量及质量。桑花叶卷叶病,初发病时在叶片侧脉间出现浅绿至黄绿色斑块,叶脉附近仍绿色,出现黄绿相间的花叶或成镶嵌状,叶形不正,叶缘常向叶面卷缩,有的裂叶一半无缺刻,叶背脉侧易生小瘤状突起,细脉褐变,病枝细,节间缩短。有时同一枝上的叶片在春末、夏初或秋季出现,有时显症有时不显症的间歇发病情况。发病重时,病叶小,叶面卷起明显,叶脉变褐更明显,瘤状、棘状突起更多,腋芽早发,侧枝多,病株逐渐衰亡,但根系不腐烂。在桑花叶卷叶病的叶组织中发现一种新的病毒和一种类似类病毒的小分子环状RNA,该病毒可能是线虫传多面体病毒属病毒,目前还没有能确切检测鉴定出桑花叶中线虫传多面体病毒属病毒的有效试剂盒,故亟需一种桑花叶卷叶病中线虫传多面体病毒属病毒的试剂盒及其检测方法。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术的目的在于提供一种桑花叶卷叶病中线虫传多面体病毒属病毒的试剂盒与检测方法。技术方案:本专利技术所述的一种桑花叶卷叶病中线虫传多面体病毒属病毒的试剂盒,包括两条特异性引物:SPLVGV-1:5’-CCAGTCAACGAACAAAGGA-3’;SPLVGV-2:5’-GGCATAGCGTGCTAACAG-3’。进一步的,所述试剂盒还包括M-MLV反转录酶、M-MLV酶反应缓冲液、dN ...
【技术保护点】
1.一种桑花叶卷叶病中线虫传多面体病毒属病毒的试剂盒,其特征在于,包括两条特异性引物:SPLVGV‑1:5’‑CCAGTCAACGAACAAAGGA‑3’;SPLVGV‑2:5’‑GGCATAGCGTGCTAACAG‑3’。
【技术特征摘要】
1.一种桑花叶卷叶病中线虫传多面体病毒属病毒的试剂盒,其特征在于,包括两条特异性引物:SPLVGV-1:5’-CCAGTCAACGAACAAAGGA-3’;SPLVGV-2:5’-GGCATAGCGTGCTAACAG-3’。2.根据权利要求1所述试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括M-MLV反转录酶、M-MLV酶反应缓冲液、dNTPs、TaqDNA聚合酶、Mg2+和PCR反应缓冲液。3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括标准阳性模板。4.一种桑花叶卷叶病中线虫传多面体病毒属病毒的检测方法,其特征在于,其包括以下步骤:(1)提取待测样品总RNA;(2)设计并合成引物;(3)RT-PCRa.反转录合成cDNA,以甘薯总RNA为模板,以...
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