新型抗微生物肽及其用途制造技术

本发明专利技术涉及具有抗微生物效果和免疫细胞活性调节功能二者的新型肽，及其用途。本发明专利技术的肽调节免疫细胞活性，还显示对各种细菌例如革兰氏阴性细菌和革兰氏阳性细菌的抗微生物活性，因此可用于治疗各种免疫性疾病例如特应性皮炎和用于治疗致病细菌感染引起的疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新型抗微生物肽及其用途
本专利技术涉及一种新型抗微生物肽及其用途，更具体地，涉及具有抗微生物效果和调节免疫细胞活性的功能二者的新型肽及其用途。
技术介绍
抗微生物肽可存在于自然界中，也可存在于合成的肽中。与正常蛋白质相比这些抗微生物肽由相对短的氨基酸序列(10-100个氨基酸残基)组成。当这些抗微生物肽主要结合至细胞膜时，1)其在细胞膜上形成离子通道，从而抑制微生物的能量产生，或2)在细胞膜中产生大孔，导致细胞死亡。由于这些抗微生物肽物理上破坏微生物，微生物很难具有对这些抗微生物肽的抗性，不像抑制微生物细胞壁或胞内聚合物合成的传统抗生素，因此迄今尚未报道对这些抗微生物肽的抗性。尽管目前已知的许多抗微生物肽之间几乎不存在序列相似性，但关于其结构和活性显示出存在一些一般趋势。代表性地，抗微生物肽具有带正电的部分，例如赖氨酸、精氨酸和组氨酸，以及疏水部分。当前，在Shai-Matsuzaki-Huang(SMH)模型(在提示与抗微生物肽的作用机制相关的假说中，其显示出最有说服力)中，序列的特征和抗微生物肽的机制描述如下：带正电的亲水部分结合细菌的带负电的细胞膜之后，结合至细胞膜的肽的疏水部分与细胞膜的磷脂的疏水部分相互作用，并在细胞膜上形成孔隙以改变细胞膜的通透性，从而破坏细胞。吞噬细胞例如中性粒细胞和单核细胞中表达的甲酰基肽受体组(甲酰基肽受体1(FPR1)和甲酰基肽受体2(FPR2))在宿主对病原体感染的防御中发挥重要作用(Mangmool,S.等人,Toxins,3:884-899,2011)。已知这些受体结合百日咳毒素敏感的Gi蛋白(Nakashima,K.等人,J.Biol.Chem.,290(22):13678-91,2015)。受体之中，已知FPR2在炎症性疾病中发挥重要作用。FPR2的活化诱导Gβγ亚基与Gαi亚基分离，βγ-亚基诱导磷脂酶Cβ或磷酸肌醇3-激酶的活化(Duru,E.A.等人,J.Surg.Res.,195(2):396-405,2015)。这些分子的活化诱导复杂的下游信号传导，从而通过使细胞应答例如趋化性迁移、脱粒和超氧化物产生多样化而调节体内的免疫应答。专利技术的公开内容技术问题已完成本专利技术以解决包括上述问题在内的多个问题，因此本专利技术的一个目标为提供同时具有更有效的抗细菌活性和免疫活性二者的新型肽。另外，本专利技术的另一个目标为提供所述肽的各种用途，包括包含肽的抗细菌剂、用于治疗特应性皮炎的药物组合物、用于改善特应性皮肤的化妆品组合物等。然而，这些目标为了说明目的而提供，其不应限制本专利技术的范围。技术方案根据本专利技术的另一个方面，提供由SEQIDNO:1的氨基酸序列组成的新型抗细菌和免疫调节肽。根据本专利技术的又一个方面，提供包含所述肽作为活性成分的抗细菌剂。根据本专利技术的又一个方面，提供用于治疗特应性皮炎的药物组合物，其包含所述肽作为活性成分。根据本专利技术的又一个方面，提供用于治疗特应性皮炎的化妆品组合物，其包含所述肽作为活性成分。有益效果根据本专利技术的实施方案的抗细菌肽不仅对各种细菌例如革兰氏阴性细菌和革兰氏阳性菌具有极其高的抗微生物活性，也具有治疗特应性皮炎的效果，因此，可用于多种目的，例如用于改善特应性皮炎的皮肤外用剂或化妆品组合物以及抗生素。附图简述图1显示说明肽针对革兰氏阳性细菌(表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus))和革兰氏阴性细菌(铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)和大肠杆菌(Escherichiacoli))的抗细菌活性结果的图，根据本专利技术的实施方案所述肽具有SEQIDNO:1的氨基酸序列，并且其中辛酰基加至N端。图2显示说明根据本专利技术的实施方案具有SEQIDNO:1的氨基酸序列的肽的FPR2依赖的增加免疫细胞中胞内钙离子的活性的图，其中图2A显示表示RBL细胞以及FPR2和FPR1分别过表达的RBL细胞中肽的FL比率的图；图2B显示表示在FPR2过表达的RBL细胞中根据SEQIDNO:1肽的浓度而增加钙离子的活性的图。图3显示说明根据本专利技术的实施方案，辣椒素所诱导的特应性皮炎模型在肽治疗时的实验程序的示意图。图4显示结果，证实根据本专利技术的实施方案，在通过辣椒素诱导的特应性皮炎模型中，肽治疗改善真皮以及真皮中的施用位点的皮炎的效果，其中图4A显示说明在通过辣椒素处理诱导特应性皮炎的大鼠(Neo-Cap)中改善皮炎的效果的图，图4B显示说明在通过辣椒素处理诱导特应性皮炎的2周龄大鼠(2WCaps)中改善皮炎的效果的图。图5显示一系列照片图像，其说明根据本专利技术的实施方案，根据肽(NCP112)治疗后的时间(3-5周)，与对照组的那些相比，新模型动物(Neo-Cap，A)和2周龄模型动物(2WCap，B)中皮肤状况的结果。图6显示根据本专利技术的实施方案，肽(NCP112)治疗后5周，分别在新模型动物(Neo-Cop，顶部)和2周龄模型动物(2WCap，底部)中，在显微镜下观察到的皮肤组织状况的组织学染色图像(左图)和说明关于表皮厚度的测量结果的图(右图)。本专利技术实施方式术语定义：如本文所使用的术语定义如下。如本文所使用的，术语“免疫调节肽”指直接或间接牵涉免疫强化作用例如抗细菌和抗病毒活性、炎症应答、刺激天然杀伤细胞、调节抗体-依赖细胞的细胞毒性等的肽，然而其具有非免疫球蛋白的蛋白形式。换言之，关于由基因解码的蛋白，吞噬细胞例如中性粒细胞和单核细胞中表达的甲酰基肽受体组(甲酰基肽受体1(FPR1)和甲酰基肽受体2(FPR2))在宿主对病原体感染的防御中发挥重要作用。已知受体结合百日咳毒素敏感的Gi蛋白。其中，已知FPR2在炎症性疾病中发挥重要作用。FPR1和FPR2的活化诱导Gβγ亚基与Gαi亚基分离，βγ-亚基诱导磷脂酶Cβ或磷酸肌醇3-激酶的活化。这些分子的活化诱导复杂的下游信号传导，从而使细胞应答例如趋化性迁移、脱粒和超氧化物产生多样化。如本文所使用的，术语“抗微生物肽”指阳离子肽化合物，其一般由相对简单的结构组成，对于革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、真菌、病毒等具有广泛的抗微生物谱。尽管抗微生物肽的机制尚未完全理解，其通常已知为通过破坏微生物的细胞膜的作用机制显示抗细菌活性。如本文所使用的，术语“特应性皮炎”指婴儿和儿童中最常见的炎症性皮肤疾病，其特征在于严重的瘙痒、红斑、水肿、渗出、疥癣、鳞屑、苔藓样变等。特应性皮炎频繁反复、慢性进展，并且由于反复搔抓皮肤，显示特征性继发损伤例如葡萄创(scratches)、苔藓样变等。专利技术详述：在下文中，将会对本专利技术详细描述。根据本专利技术的一个方面，提供由SEQIDNO:1的氨基酸序列组成的新型抗细菌和免疫调节肽。所述肽可为其中连接辛酰基(CH3(CH2)6CO-，下文缩写为“Oct-”)的肽，或可为其中1-6个氨基酸连接到肽的C端的肽。根据本专利技术的另一个方面，提供包含肽作为活性成分的抗细菌剂。抗细菌剂可对革兰氏阴性细菌和革兰氏阳性细菌具有抗细菌活性，其中革兰氏阴性细菌可为大肠杆菌、沙门菌属(Salmonella)物种、弧菌属(Vibrio)物种或铜绿假单胞菌，并且革兰氏阳性细菌可为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、痤本文档来自技高网...

【技术保护点】
1. 由SEQ ID NO: 1的氨基酸序列组成的新型抗细菌和免疫调节肽。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.18 KR 10-2015-01618371.由SEQIDNO:1的氨基酸序列组成的新型抗细菌和免疫调节肽。2.权利要求1的肽，其中辛酰基(CH3(CH2)6CO-)加至N端。3.权利要求1或2的肽，其中1-6个氨基酸加至C端。4.一种抗细菌剂，包含权利要求1或2的肽作为活性成分。5.一种抗细菌剂，...

【专利技术属性】
技术研发人员：李泰勋，金戴允，金戴旺，奇善镐，
申请(专利权)人：诺娃细胞科技公司，
类型：发明
国别省市：韩国,KR