一种罗氟司特有关物质的检测方法技术

本发明专利技术提供一种罗氟司特有关物质的检测方法，发明专利技术人针对现有技术和方法无法同时检测罗氟司特中11种有关物质，给罗氟司特原料药及其制剂产品的质量控制带来困难的问题，建立了同时检测罗氟司特中11种有关物质的方法。该方法可用于罗氟司特原料药及其制剂产品的质量研究和质量控制。

【技术实现步骤摘要】
一种罗氟司特有关物质的检测方法专利
本专利技术属于医药领域，涉及一种药物有关物质的分析检测方法，特别是对罗氟司特有关物质进行检测的方法。
技术介绍
慢性阻塞性肺疾病（COPD）是以肺气肿和支气管受阻为特征，以呈进行性发展的气流受限为主要表现形式的疾病，患病人数多，死亡率高，至2030年COPD将可能成为世界第三大致死性疾病，目前中国COPD的总体患病率为8.2%，在中国患者人数已超4000万。罗氟司特是一种新型的选择性磷酸二酯酶-4（PDE-4）抑制剂，适用于慢性阻塞性肺病(COPD)的治疗。2010年7月欧盟批准奈科明公司（Nycomed）的罗氟司特片（商品名：Daxas）上市，这是十多年来首次获得欧盟批准的新一类COPD治疗药物。2011年3月该药获美国FDA批准上市用于慢性阻塞性肺病(COPD)的治疗。罗氟司特是十余年来全球首个批准用于慢性阻塞性肺疾病治疗的新型选择性磷酸二酯酶-4抑制剂，对肺部系统具有高效的抗炎活性。可抑制磷酸二酯酶-4，减少炎症介质的释放，进而抑制如慢性阻塞性肺病和哮喘等呼吸道疾病对肺组织造成的损伤。罗氟司特化学名为3-环丙基甲氧基-N-（3,5-二氯吡啶-4-基）-4-（二氟甲氧基）苯甲酰胺，结构式如下：。药物的有关物质主要是在生产过程中带入的起始原料、中间体、聚合体、副反应产物，以及贮藏过程中的降解产物等。药物中含有的有关物质不但会降低药物疗效，还与人们的健康和生命安危有极其密切的关系；药物安全性评价的一个重要内容就是药物中有关物质的含量控制，而一种有效的分离、检测有关物质的方法则是对有关物质进行含量控制的基础。罗氟司特合成路线较多，不同生产路线及制剂工艺所带来的有关物质也不完全相同，常见的有关物质有以下11种(杂质A-K)，具体结构如下：。目前国内对罗氟司特有关物质的测定方法报道较少，且国内报导方法中对罗氟司特特定杂质的分析也较少，CN102949370中公开了一种罗氟司特片及其制备方法和检测方法，在有关物质检测方法中，色谱条件为：色谱柱为AlltimaTM，C18，250×4.6mm,5μm，以pH3.5的0.02MKH2PO4：CH3CN=42：58为流动相，柱温为30°C，检测波长为254nm，流速为1.0mL/min，进样体积为20μL，运行时间为30min，数据采集为30min。该有关物质检测方法只能检测上述罗氟司特的4个特定杂质A、D、G、I（对应CN102949370中杂质B、A、D、C），难以检测分离其他杂质。为了严格控制罗氟司特原料药及其制剂的质量，保证临床用药的安全有效，需要建立一种有效的罗氟司特有关物质的检测方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种同时检测罗氟司特11种有关物质的高效液相色谱方法。针对现有技术和方法无法同时检测上述罗氟司特的11种有关物质，给罗氟司特原料药及其制剂产品的质量控制带来困难的问题，专利技术人通过大量的实验研究，建立了同时检测罗氟司特中11种有关物质的方法，可用于罗氟司特原料药及其制剂产品的质量研究和质量控制。本专利技术采用高效液相色谱法进行罗氟司特有关物质的检测，具体色谱条件如下：以十八烷基键合硅胶为填充剂；流动相A为0.01mol/LpH3.4-3.6的磷酸二氢钾溶液；流动相B为乙腈；检测波长为215nm，采用梯度流动相洗脱，以流动相体积比为100％计，流动相的梯度设置如下：。上述有关物质检测方法中，以流动相体积比为100％计，优选的流动相的梯度设置如下：。现有技术中有采用0.005mol/L甲酸铵溶液（pH3.5）-乙腈体系测定罗氟司特的有关物质，经试验发现，该条件下基线漂移较大，以至于在漂移的基线上杂质很难被检测出来,检测限和分离度达不到要求。专利技术人经过对流动相研究筛选，发现0.01mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈体系分析效果更优，经过试验证明该体系可以明显降低基线漂移。CN102949370中采用pH3.5的磷酸二氢钾溶液-乙腈体系测定罗氟司特有关物质，该测定方法采用磷酸二氢钾溶液：乙腈=42：58的等度洗脱程序，仅能检测上述罗氟司特的4个特定杂质A、D、G、I（对应CN102949370中杂质B、A、D、C），难以检测分离其他7种杂质。专利技术人对罗氟司特及其11种杂质进行研究，试图通过一个检测方法可以将罗氟司特与11种杂质检测分离出。经试验发现，当磷酸二氢钾溶液（流动相A）与乙腈（流动相B）体系为梯度洗脱，且洗脱程序为以下表格程序，磷酸二氢钾溶液pH为3.4-3.6时，能将罗氟司特有效成分与11种杂质全部分离开来，且杂质分离度较好。本专利技术对波长的选择试验中，取罗氟司特对照品溶液、以及杂质A-K的溶液，采用PDA检测器进行检测，罗氟司特在215nm和250nm波长附近有最大吸收，各杂质在215nm均有较大吸收，而个别杂质在250nm吸收较弱，因此，选用215nm作为检测波长。上述有关物质检测方法的色谱柱柱温为20-30℃；色谱柱流速为0.4-0.8ml/min。附图说明图1：实施例1、实施例2、实施例3的系统适应性试验色谱图。图2：实施例4、对比例1、对比例2的系统适应性试验色谱图。图3：实施例5、对比例3、对比例4的系统适应性试验色谱图。图1-3中，为了便于观察各个实施例的色谱峰，对图谱中实施例及对比例的色谱峰进行平移，具体实验数据以实施例及对比例的系统适用性试验结果数据为准。分离度R表示相邻两峰的分离程度，R越大，表明相邻两组分分离越好，通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志。《中国药典》第三部色谱法中规定，待测物质色谱峰与相邻色谱峰之间的分离度R应大于1.5,即可视为分离完全。由图1可知，本申请的罗氟司特有关物质检测方法可以同时检测罗氟司特杂质A-K和罗氟司特，且杂质A-K和罗氟司特的分离度均在1.5以上，表明杂质A-K与罗氟司特已完全分离，符合《中国药典》对色谱法分离度的规定。由图2可知，对比例1和2的梯度洗脱程序条件下杂质F峰和杂质D峰重合，该条件下不能将杂质F和杂质D分离。与图1对比可知，梯度洗脱程序影响本申请罗氟司特有关物质检测方法的检出结果，当梯度洗脱程序大于或小于本申请规定的范围时，部分杂质无法检测出，影响检测结果的准确性。由图3可知，对比例3中pH3.3条件下，杂质B峰和杂质E峰重合，无法将这两个杂质进行分离。对比例4中pH3.7时，杂质F的保留时间大于杂质D的保留时间，杂质D和杂质F的峰位置互换，且杂质C与杂质F的分离度为1.29，分离度小于1.5，杂质C与杂质F不能完全分离。与图1对比可知，磷酸二氢钾溶液的pH值影响本申请罗氟司特有关物质检测方法的检出结果，当pH超出3.4-3.6范围时，部分杂质无法检测出，或分离度小于1.5，杂质无法完全分离，影响检测结果的准确性。具体实施方式实施例1制备系统适用性溶液：取杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H、杂质I、杂质J和杂质K约10mg，精密称定，分别置100mL量瓶中，加乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为以上各杂质的定位溶液。取罗氟司特对照品10mg，精密称定，置50mL量瓶中，分别精密加入杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H、杂质I、杂质J和杂质K定位溶液各1mL，加乙腈溶解并稀释至刻度本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种罗氟司特有关物质的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法进行检测，具体色谱条件如下：以十八烷基键合硅胶为填充剂；流动相A为0.01 mol/L pH3.4‑3.6的磷酸二氢钾溶液；流动相B为乙腈；检测波长为215nm，采用梯度流动相洗脱，以流动相体积比为100％计，流动相的梯度设置如下：

【技术特征摘要】
1.一种罗氟司特有关物质的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法进行检测，具体色谱条件如下：以十八烷基键合硅胶为填充剂；流动相A为0.01mol/LpH3.4-3.6的磷酸二氢钾溶液；流动相B为乙腈；检测波长为215nm，采用梯度流动相洗脱，以流动相体积比为100％计，流动相的梯度设置如下：。2...

【专利技术属性】
技术研发人员：郝艳山，刘丽敏，闫佳慧，耿玉先，产运霞，
申请(专利权)人：北京万生药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：北京,11