一种液体复合微生物肥料及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种液体复合微生物肥料，添加有由功能微生物组成的混合菌液，所述功能微生物为枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、毕赤酵母、低温菌B5‑16和低温菌B6‑15，其体积比例为1：(1～5)：(2～6)：(1～5)：(1～4)。本发明专利技术还提出所述液体复合微生物肥料的制备方法和应用。本发明专利技术提出的液体复合微生物肥料,由于以枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、毕赤酵母、低温菌B5‑16、低温菌B6‑15五种菌组成的混合菌液为菌种,采用酵母发酵的副产物作为发酵原液进行液体发酵制备而成，具有制备方法简单，投资成本低等特点。

【技术实现步骤摘要】
一种液体复合微生物肥料及其制备方法
本专利技术属于生物化学领域，具体涉及一种微生物组合物、及其制备和应用。
技术介绍
水溶肥料能够完全溶于水，同时使用方便，可喷施、冲施并可与喷滴灌结合使用，形成水肥一体化，即节约了生产成本，又容易被作物吸收利用。在提高肥料利用率、节约农业用水、减少生态环境污染、改善作物品质以及减少劳动力等方面具有明显优势。我国是全球淡水资源贫乏的国家之一，农业的季节性及产业分布不均、区域性缺水等问题非常突出。同时，随着中国现代农业的集约化、规模化发展，大型农场的不断涌现，滴灌、喷灌等节水设施农业面积迅速扩大，水溶性肥料已是肥料发展的必然趋势。水溶肥的快速发展可以加快转变农业发展方式，同时施用水溶肥可以节水40％，肥料利用率提高20％，施用水溶肥的情况下，土壤病害可以减少30％，减少农药使用量。现在农业的主要问题是农民劳动力减少，年轻人不愿意种地，现在的土地的农业生产播种和收获基本实现了机械化，主要的工作量在于施肥和浇水，目前的农业行式有利于发展液体肥料和水肥一体化[1]。2015年，农业部制定《到2020年化肥使用量零增长行动方案》，方案提出：到2020年，基本遏制盲目施肥和过量施肥现象，传统施肥方式得到改变；机械施肥占主要农作物种植面积的40％以上，化肥利用率提高10个百分点；水肥一体化技术推广面积1.5亿亩、增加8000万亩，这将进一步促进水溶肥的推广应用。但目前市售的水溶性肥料大多是多种化学肥料的复合肥，随着生态农业的兴起，化肥施用量的不断增加与不合理施用导致的土壤酸化、土壤板结、地下水污染、农产品质量下降[2,3]等一系列问题日益引起大家关注。为了有效的解决这些问题，农业人员把目光投向了生物肥料。生物肥料具有无毒、无污染、低成本、解决能源等特点。目前，市场上的复合微生物肥料主要以固体形式存在，由于液体复合微生物肥料中不仅复合微生物菌群易发生拮抗作用，导致存活率低、保存期短；而且可溶性有机质含量很低。因为国内外多选用制作固体形态的复合微生物肥料。参考文献：[1]李玉顺，高继光，刘伟等.浅析液体肥发展现状与存在问题[J].氮肥技术.2016，37：48-50.[2]郭胜利，周印东，张文菊等.长期施用化肥对粮食生产和土壤质量性状的影响[J].水土保持研究.2003，10(1)：16-22.[3]张北赢，陈天林，王兵.长期施用化肥对土壤质量的影响[J].中国农学通报.2010，26(11)：182-187.
技术实现思路
针对现有技术中存在的不足之处，本专利技术的目的是提供一种液体复合微生物肥料。本专利技术的另一目的是提出所述液体复合微生物肥料的制备方法。本专利技术的第三个目的是提出所述液体复合微生物肥料的应用。实现本专利技术上述目的的技术方案为：一种液体复合微生物肥料，添加有由功能微生物组成的混合菌液，所述功能微生物为枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、毕赤酵母、低温菌B5-16和低温菌B6-15，其体积比例为1：(1～5)：(2～6)：(1～5)：(1～4)。优选地，所述液体复合微生物肥料中还添加有大量元素水溶肥。所述的液体复合微生物肥料的制备方法，包括步骤：(1)将枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、毕赤酵母、低温菌B5-16和低温菌B6-15分别接种于固体培养基上培养，得到活化后的菌种；(2)活化后的菌种分别接种于液体培养基中，培养至各液体培养基的OD600值在3.0-4.0时停止培养，获得一级种子；(3)一级种子分别接种于液体培养基中，培养至各液体培养基的OD600值在3.0-4.0时停止培养，制得含二级种子的种子液；(4)枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、毕赤酵母、低温菌B5-16和低温菌B6-15的种子液按体积比例1：(1～5)：(2～6)：(1～5)：(1～4)混合，得混合种子液；(5)混合种子液按体积比5-20％的接种量接种于发酵液，进行高密度混合发酵培养，至混合液中活菌数为10亿/mL-100亿/mL时停止培养，得半成品；(6)大量元素水溶肥加热溶解，与所述半产品混合。进一步地，步骤(1)中，培养枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、低温菌B5-16和低温菌B6-15的固体培养基均为土豆、蔗糖、琼脂、水按质量体积比100～300g：20g：15～20g:1000mL制成；培养温度为15～42℃，时间为1-3天；培养毕赤酵母的固体培养基为牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、水按质量体积比3g：10g：5g：15-20g1000mL制成；培养温度为15～38℃，时间为2-6天。其中，步骤(2)中，毕赤酵母在温度15～38℃，摇床转速100～200r/min的条件下培养2～6天，枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、低温菌B5-16、B6-15在温度15～42℃，摇床转速100～200r/min的条件下培养1～3天。其中，步骤(3)中，按一级种子培养液的体积比为5～20％接种，毕赤酵母在温度15～38℃，搅拌速度100～200r/min，通气量0.5～1.5vvm的条件下培养至其OD600值为3.0～4.0，枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、低温菌B5-16、B6-15在温度15～42℃，搅拌速度为100～200r/min，通气量为0.5～1.5vvm的条件下培养至其OD600值为3.0～4.0。其中，步骤(5)中，所述发酵液为酵母发酵产物8～10质量份和中草药植物提取液0～2质量份组成，所述中草药植物提取液。其中，步骤(5)中，在高密度混合发酵培养过程中用糖蜜进行碳源补料，每2h时间补1～2％，用牛肉膏和蛋白胨进行氮源补料，每2h时间补1～2％。其中，步骤(6)中，所述大量元素水溶肥加热至35～50℃，按质量比1：(1～1.5)溶解在水中，与所述半成品按体积比1：(0.6～1.5)混合。本专利技术所述的液体复合微生物肥料在植物培养中的应用，在应用时稀释200～500倍，用于滴灌、冲施或叶面喷施。本专利技术的有益效果在于：(1)本专利技术提出的液体复合微生物肥料,由于以枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、毕赤酵母、低温菌B5-16、低温菌B6-15五种菌组成的混合菌液为菌种,采用酵母发酵的副产物作为发酵原液进行液体发酵制备而成，具有制备方法简单，投资成本低等特点。(2)本专利技术提出的液体复合微生物肥料，采用酵母发酵的副产物中含有高有机质，丰富的纤维素，胶体物质以及焦糖、氮、磷、钾等作物生长必须的大量元素，进一步地，经过组合微生物的发酵处理，高聚合的大分子营养元素解离成小分子的物质，更有利于作物的吸收。(3)本专利技术提出的液体复合微生物肥料，有效活菌数高，能够有效的解磷、解钾、固氮，能够促进作物的生长，提高抗病性，提高作物品质等特点。(4)本液体复合微生物肥料，经检测其中的活菌数、总养分、杂菌数、pH值等各项指标经检测均符合NY/T798-2015。具体实施方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。本专利技术中所述功能微生物中，枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis),解淀粉芽孢杆菌ZR-1(Bacillusamyloliquefaciens、毕赤酵母VT21、低温菌B5-16，所述的低温菌B6-15，保藏号CGMCCNO.5851。以上均为北京沃土天地生物科技股份有限公司出售的菌株，本领域技术人员可购买得到。本专利技术中，所用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种液体复合微生物肥料，其特征在于，添加有由功能微生物组成的混合菌液，所述功能微生物为枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、毕赤酵母、低温菌B5‑16和低温菌B6‑15，其体积比例为1：(1～5)：(2～6)：(1～5)：(1～4)。

【技术特征摘要】
1.一种液体复合微生物肥料，其特征在于，添加有由功能微生物组成的混合菌液，所述功能微生物为枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、毕赤酵母、低温菌B5-16和低温菌B6-15，其体积比例为1：(1～5)：(2～6)：(1～5)：(1～4)。2.根据权利要求1所述的液体复合微生物肥料，其特征在于，所述液体复合微生物肥料中还添加有大量元素水溶肥。3.权利要求1或2所述的液体复合微生物肥料的制备方法，其特征在于，包括步骤：(1)将枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、毕赤酵母、低温菌B5-16和低温菌B6-15分别接种于固体培养基上培养，得到活化后的菌种；(2)活化后的菌种分别接种于液体培养基中，培养至各液体培养基的OD600值在3.0～4.0时停止培养，获得一级种子；(3)一级种子分别接种于液体培养基中，培养至各液体培养基的OD600值在3.0-4.0时停止培养，制得含二级种子的种子液；(4)枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、毕赤酵母、低温菌B5-16和低温菌B6-15的种子液按体积比例1：(1～5)：(2～6)：(1～5)：(1～4)混合，得混合种子液；(5)混合种子液按体积比5-20％的接种量接种于发酵液中，进行高密度混合发酵培养，至混合液中活菌数为10亿/mL～100亿/mL时停止培养，得半成品；(6)大量元素水溶肥加热溶解，与所述半成品混合。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，培养枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、低温菌B5-16和低温菌B6-15的固体培养基均为土豆、蔗糖、琼脂、水按质量体积比100～300g：20g：15～20g:1000mL制成；培养温度为15～42℃，时间为1～3天；培养毕赤酵母的固体培养基为牛肉膏、蛋白胨、...

【专利技术属性】
技术研发人员：李秋水，任莉，
申请(专利权)人：北京沃土天地生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11