甲状腺球蛋白化学发光检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开一种甲状腺球蛋白化学发光检测试剂盒，所述试剂盒包括试剂1和试剂2，所述试剂1包括缓冲液、磁微粒、生物素标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和多羟基醇；和所述试剂2包括缓冲液、吖啶酯标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和多羟基糖。本发明专利技术的甲状腺球蛋白化学发光检测试剂盒灵敏度高、准确度好并且能降低检测成本。

【技术实现步骤摘要】
甲状腺球蛋白化学发光检测试剂盒
本专利技术涉及体外诊断试剂领域，具体涉及一种甲状腺球蛋白化学发光检测试剂盒。
技术介绍
甲状腺球蛋白(Thyroglobulin,TG)是由甲状腺滤泡上皮分泌的一种碘化糖蛋白，分子量约为660KD。甲状腺球蛋白在促甲状腺激素(TSH)的作用下，由甲状腺细胞合成，并运输到甲状腺滤泡中，作为甲状腺素和碘化甲腺原氨酸的前提储存。甲状腺球蛋白在甲状腺过氧化物酶(TPO)的水解作用下生成甲状腺素(T4)和三碘甲腺原氨酸(T3)释放进入血液中。TG在血清中的含量可由多种甲状腺相关疾病影响，包括桥本氏症(甲状腺炎)，格雷夫斯病(毒性弥漫性甲状腺肿)，亚急性甲状腺炎，甲状腺功能亢进以及甲状腺瘤等。在先天性甲状腺功能缺陷的患者中，甲状腺球蛋白含量的检测可以鉴别甲状腺完全缺失、甲状腺发育不全以及其他病理情况。另外，甲状腺滤泡壁的损伤也可导致大量的TG进入血液，也被认为是甲状腺体形态完整性的特殊标志物。甲状腺被认为是甲状腺球蛋白的唯一来源。因此，对接受甲状腺全切除手术患者血清中TG水平的检测，在预示疾病的复发情况上有着重要的作用。目前，甲状腺球蛋白的检测方法主要有：酶联免疫吸附分析法(ELISA)、时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)、电化学发光法(ECLIA)和化学发光免疫分析(CLIA)等。RIA和ELISA由于污染性、灵敏度低、时间长等缺点，已不再居主导地位。CLIA和ECLIA由于灵敏度高、动力学范围宽、适于自动化操作等优点，被多数厂家采用，成为当前甲状腺球蛋白检测最主要的发展技术。时间分辨荧光技术，也能达到与CLIA相当的灵敏度，但由于其检测模块较复杂，目前的市场应用不如化学发光。CLIA是化学物质在化学反应过程中，由基态跃迁到激发态，再由不稳定的激发态回到基态，化学能转变为光能释放出来。将高灵敏度的化学发光与高特异度的免疫分析结合起来，通过检测光信号，即可以知道待检测的生物活性分子的含量。按化学反应类型分类，可分为酶促化学发光和非酶促化学发光两类。其中酶促化学发光主要包括辣根过氧化物酶(HRP)系统、黄嘌呤氧化酶系统、碱性磷酸酶(ALP)系统等。但其应用于化学发光免疫分析(CLIA),需要使用催化剂及增强剂,这将导致背景发光增强,使测量本底升高,从而限制了这一技术的灵敏度和它的应用及发展。非酶促发化学发光包括吖啶酯系统、草酸酯系统、三价铁-鲁米诺系统等，而其中吖啶酯因发光效率高而被广泛应用，其优点主要表现为：易与蛋白质联结且联结后光子产率不减少；不需要加入催化剂，发光释放快速集中，且信号稳定；对温度和pH不敏感；干扰因素少，本底信号低等特点。将高灵敏度的化学发光物质吖啶酯与高特异性的免疫分析结合起来，通过检测光信号，即可以知道待检测的生物活性分子的含量。在国内，甲状腺球蛋白检测在临床上主要以化学发光免疫分析法为主，但由于具有自主知识产权的国产甲状腺检测试剂盒目前还比较少，而且灵敏度较低，试剂成本高，目前一般只在三甲医院有开展，在三甲以下医院开展较少，因此有待开发对甲状腺检测灵敏度高、准确度好并且能降低检测成本的检测技术。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供一种甲状腺球蛋白化学发光检测试剂盒，所述试剂盒包括试剂1和试剂2，所述试剂1包括缓冲液、磁微粒、生物素标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和多羟基醇；和所述试剂2包括缓冲液、吖啶酯标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和多羟基糖。在一种实施方式中，所述试剂1包括0.2mg/mL～0.6mg/mL磁微粒、4μg/mL～12μg/mL生物素标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和5g/L～50g/L甘露醇或山梨糖醇；和所述试剂2包括2.0μg/mL～6.0μg/mL吖啶酯标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和5g/L～50g/L海藻糖或蔗糖。在一种实施方式中，所述试剂1包括缓冲液、0.2mg/mL～0.6mg/mL磁微粒、4μg/mL～12μg/mL生物素标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和5g/L～50g/L甘露醇或山梨糖醇；和所述试剂2包括缓冲液、2.0μg/mL～6.0μg/mL吖啶酯标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和5g/L～50g/L海藻糖或蔗糖。在一些实施方式中，可以是0.3mg/mL～0.5mg/mL磁微粒；可以是6μg/mL～10μg/mL生物素标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体；和10g/L～40g/L甘露醇或山梨糖醇、20g/L～30g/L甘露醇或山梨糖醇。在一些实施方式中，缓冲液是pH6.0～H8.0、5mM～100mM的PBS缓冲液。在一些实施方式中，缓冲液可以是pH7.0～7.5、20mM～80mM的PBS缓冲液、20mM～60mM、20mM～40mM的PBS缓冲液。在一些实施方式中，所述试剂1还包括1g/L～50g/L牛血清白蛋白、5mL/L～20mL/L丙三醇、0.05mL/L～0.2mL/LTritonX-100、10mg/L～50mg/L4-氨基安替比林和0.5mL/L～5mL/Lproclin-300。在一些实施方式中，可以是5g/L～40g/L牛血清白蛋白、10g/L～30g/L牛血清白蛋白、15g/L～25g/L牛血清白蛋白；10mL/L～15mL/L丙三醇；0.1mL/L～0.2mL/LTritonX-100、0.15mL/L～0.2mL/LTritonX-100；20mg/L～40mg/L4-氨基安替比林、15mg/L～30mg/L4-氨基安替比林；和1mL/L～5mL/Lproclin-300、2mL/L～4mL/Lproclin-300。试剂中各组份是组合起来发挥作用，有效降低了试剂背景信号，提高了试剂的灵敏度、稳定性。在一些实施方式中，试剂1包括0.4mg/mL磁微粒、8μg/mL生物素标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体、20mMpH7.4PBS缓冲溶液、10g/L牛血清白蛋白、20g/L甘露醇或山梨糖醇、10mL/L丙三醇、0.1mL/LTritonX-100、20mg/L4-氨基安替比林和3mL/Lproclin-300。在一些实施方式中，所述试剂2还包括5g/L～20g/L酪蛋白、5mL/L～20mL/L丙三醇、0.05mL/L～0.2mL/LTritonX-100、0.5mL/L～5mL/Lproclin-300和10mg/L～50mg/L4-氨基安替比林。在一些实施方式中，所述试剂2可以包括5g/L～10g/L酪蛋白、10g/L～15g/L酪蛋白、15g/L～20g/L酪蛋白；5mL/L～20mL/L丙三醇、5mL/L～100mL/L丙三醇、10mL/L～20mL/L丙三醇；0.05mL/L～0.2mL/LTritonX-100、0.05mL/L～0.1mL/LTritonX-100、0.1mL/L～0.2mL/LTritonX-100；0.5mL/L～5mL/Lproclin-300、0.5mL/L～1mL/Lproclin-300、1mL/L～2mL/Lproclin-300、2mL/L～4mL/Lproclin-300；和10mg/L～20mg/L4-氨基安替比林、20mg/L～30mg/L4-氨基安替比林、30mg/L～40mg/L4-氨基安替比林、40mg/L～50mg/L4-氨基安替比林。试本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甲状腺球蛋白化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括试剂1和试剂2，所述试剂1包括缓冲液、磁微粒、生物素标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和多羟基醇；和所述试剂2包括缓冲液、吖啶酯标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和多羟基糖。

【技术特征摘要】
1.一种甲状腺球蛋白化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括试剂1和试剂2，所述试剂1包括缓冲液、磁微粒、生物素标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和多羟基醇；和所述试剂2包括缓冲液、吖啶酯标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和多羟基糖。2.根据权利要求1所述的甲状腺球蛋白化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述试剂1包括0.2mg/mL～0.6mg/mL磁微粒、4μg/mL～12μg/mL生物素标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和5g/L～50g/L甘露醇或山梨糖醇；和所述试剂2包括2.0μg/mL～6.0μg/mL吖啶酯标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和5g/L～50g/L海藻糖或蔗糖。3.根据权利要求1所述的甲状腺球蛋白化学发光检测试剂盒，所述缓冲液是pH6.0～8.0、5mM～100mM的PBS缓冲液。4.根据权利要求2所述的甲状腺球蛋白化学发光检测试剂盒，所述试剂1还包括1g/L～50g/L牛血清白蛋白、5mL/L～20mL/L丙三醇、0.05mL/L～0.2mL/LTritonX-100、10mg/L～50mg/L4-氨基安替比林和0.5mL/L～5mL/Lproclin-300；优选地所述试剂1包括0.4mg/mL磁微粒、8μg/mL生物素标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体、20mMpH7.4PBS缓冲溶液、10g/L牛血清白蛋白、20g/L甘露醇或山梨糖醇、10mL/L丙三醇、0.1mL/LTritonX-100、20mg/L4-氨基安替比林和3mL/Lproclin-300。5.根据权利要求2所述的甲状腺球蛋白化学发光检测试剂盒，所述试剂2还包括5g/L～20g/L酪蛋白、5mL/L～20mL/L丙三醇、0.05mL/L～0.2mL/LTritonX-100、0.5mL/L～5mL/Lprocl...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴吉兵，吴婷，徐雨，田君喜，龙腾镶，
申请(专利权)人：迈克生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51