桂花中麦角甾苷的提取方法技术

本发明专利技术公开了桂花中麦角甾苷的提取方法，包括以下步骤：S1.将桂花研磨为粉末；S2.用索式提取器进行提取；S3.将步骤S2得到的桂花粗提取物进行萃取和浓缩；S4.将AB‑8大孔吸附树脂和聚酰胺树脂进行双柱偶联，对步骤S3浓缩后的桂花粗提取物进行纯化；S5.在40℃旋蒸，除去乙腈，再冻干，即得到麦角甾苷。本发明专利技术提取方法简单，成本低，提取的麦角甾苷纯度高，分离效率高和适合工业化。

Extraction method of ergosterol from Osmanthus fragrans

The invention discloses an extraction method of ergosterol glycosides from Osmanthus fragrans, which comprises the following steps: S1. grinding the Osmanthus fragrans into powder; S2. extracting with a cable extractor; S3. extracting and concentrating the crude extract of Osmanthus fragrans obtained from S2; S4. coupling the AB_8 macroporous adsorption resin with the polyamide resin on two columns, and concentrating it. The crude extract of Osmanthus fragrans L. was purified, and the ergosterol glycoside was obtained by rotating steaming at 40 C, removing acetonitrile and freeze-drying. The invention has the advantages of simple extraction method, low cost, high purity of ergosterol extracted, high separation efficiency and suitable for industrialization.

【技术实现步骤摘要】
桂花中麦角甾苷的提取方法
本专利技术涉及麦角甾苷的提取，尤其涉及桂花中麦角甾苷的提取方法。
技术介绍
麦角甾苷是苷类化合物中的氧苷，又称毛蕊花苷、毛蕊花糖苷，分子式：C29H36O15，分子量为624.59。在酸性条件下比较稳定；中性、碱性条件下稳定性差一些，但加入适量的抗坏血酸，可明显抑制其降解。主要存在于一些药用植物中，例如肉苁蓉属植物，连翘属植物，地黄属植物和列当属植物等。麦角甾苷的生物活性强，功效也是多方面的，具有抗衰老、提高免疫功能、增强记忆力、止痛、降血脂和通便等作用。目前，麦角甾苷的提取有成本高、分离效率低和不适合工业化的缺点。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的实施例提供了一种提取成本低、分离效率高和适合工业化的桂花中麦角甾苷的提取方法。本专利技术的实施例提供桂花中麦角甾苷的提取方法，包括以下步骤：S1.将桂花研磨为粉末；S2.用索式提取器进行提取；S3.将步骤S2得到的桂花粗提取物进行萃取和浓缩；S4.将AB-8大孔吸附树脂和聚酰胺树脂进行双柱偶联，对步骤S3浓缩后的桂花粗提取物进行纯化；S5.在40℃旋蒸，再冻干，即得到麦角甾苷。进一步，所述步骤S3中，先后用石油醚，乙酸乙酯，水饱和的正丁醇对桂花粗提取物萃取和浓缩。进一步，所述步骤S4中，AB-8大孔吸附树脂和聚酰胺树脂进行纯化的具体方法为：S4.1.对AB-8大孔吸附树脂和聚酰胺树脂进行预处理；S4.2.向AB-8大孔吸附树脂中上样，先后用80％的乙醇溶液和40％的甲醇溶液进行洗脱，乙醇溶液和甲醇溶液的流速均为1mL/min，洗脱时间为6h；S4.3.向聚酰胺树脂中上样，用80％的乙醇溶液进行洗脱，乙醇溶液的流速为1mL/min，洗脱时间为3h。进一步，所述步骤S4.1中，对AB-8大孔吸附树脂和聚酰胺树脂进行预处理的具体方法为：S4.1.1.取一定量的树脂，用蒸馏水洗涤3-5次，去杂质；S4.1.2.加入95％的乙醇浸泡24h，用蒸馏水洗涤3-4次；S4.1.3.加入5％NaOH溶液浸泡24h，洗涤至中性；S4.1.4.加入5％HCl溶液浸泡24h，洗涤至中性。进一步，所述步骤S4.2中，向AB-8大孔吸附树脂中上样的桂花粗提取物的浓度为2.5mg/mL，pH＝7，体积为10mL，乙醇溶液和甲醇溶液的体积均为100mL。进一步，所述步骤S4.3中，向聚酰胺树脂中上样的桂花粗提取物的浓度为1.5mg/mL，pH＝7，体积为10mL，乙醇溶液的体积为100mL。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：提取方法简单，成本低，提取的麦角甾苷纯度高，分离效率高和适合工业化。附图说明图1是本专利技术桂花中麦角甾苷的提取方法的一流程图。图2是图1中步骤S4的一流程图。图3是图2中步骤S4.1的一流程图。图4是浓缩后的桂花粗提取物的HPLC测定结果图。图5是纯化后提取物的HPLC测定结果图。图6是纯化后提取物的中低压液相制备色谱分析结果图。图7是本专利技术桂花中麦角甾苷的核磁共振波谱仪测定结果图。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本专利技术实施方式作进一步地描述。请参考图1，本专利技术的实施例提供了桂花中麦角甾苷的提取方法，包括以下步骤：S1.将桂花研磨为粉末；S2.用索式提取器进行提取；S3.将步骤S2得到的桂花粗提取物进行萃取和浓缩，优选地，先后用石油醚，乙酸乙酯，水饱和的正丁醇对桂花粗提取物萃取和浓缩；HPLC测定浓缩后的桂花粗提取物：桂花粗提取物溶液的的制备：精密称桂花粗提取物2mg，置于25mL量瓶中，加入适量的甲醇溶解定容，经0.45μm滤膜过滤，桂花粗提取物溶液溶液。HPLC条件：ShimaduODSC18色谱柱(4.6mm×200mm，5μm)，流动相:A:甲醇，B:1％冰醋酸(V/V)，流动相梯度洗脱程序同表1，流速0.7mL/min，柱温30℃，检测波长360nm，进样量20μL，洗脱时间60min。表1流动相梯度洗脱程序结果如图4所示，其中分离度较好的主要有三种物质，按出峰先后顺序，保留时间依次t1＝22.571min,t2＝26.160min,t3＝30.350min。S4.将AB-8大孔吸附树脂和聚酰胺树脂进行双柱偶联，对步骤S3浓缩后的桂花粗提取物进行纯化。请参考图2，AB-8大孔吸附树脂和聚酰胺树脂进行纯化的具体方法为：S4.1.对AB-8大孔吸附树脂和聚酰胺树脂进行预处理；请参考图3，具体方法为：S4.1.1.取一定量的树脂，用蒸馏水洗涤3-5次，去杂质；S4.1.2.加入95％的乙醇浸泡24h，用蒸馏水洗涤3-4次；S4.1.3.加入5％NaOH溶液浸泡24h，洗涤至中性；S4.1.4.加入5％HCl溶液浸泡24h，洗涤至中性。S4.2.向AB-8大孔吸附树脂中上样，先后用80％的乙醇溶液和40％的甲醇溶液进行洗脱，优选地，向AB-8大孔吸附树脂中上样的桂花粗提取物的浓度为2.5mg/mL，pH＝7，体积为10mL，乙醇溶液和甲醇溶液的体积均为100mL，乙醇溶液和甲醇溶液的流速均为1mL/min，洗脱时间为6h；S4.3.向聚酰胺树脂中上样，用80％的乙醇溶液进行洗脱，优选地，向聚酰胺树脂中上样的桂花粗提取物的浓度为1.5mg/mL，pH＝7，体积为10mL，乙醇溶液的体积为100mL，乙醇溶液的流速为1mL/min，洗脱时间为3h。HPLC测定纯化后提取物：纯化后提取物溶液的制备：精密称量纯化后提取物5mg，置于25mL量瓶中，加入适量甲醇溶解并定容，得到纯化后提取物溶液。HPLC条件：ShimaduODSC18色谱柱(4.6mm×200mm，5μm)，流动相:A:甲醇，B:1％冰醋酸(V/V)，梯度洗脱程序见表1，流速0.7mL/min，柱温30℃，检测波长360nm，进样量20μL；记录60min色谱图。结果如图5所示，由图5可看出纯化后提取物中主要有两种物质。浓缩后的桂花粗提取物和纯化后提取物的HPLC测定条件相同，所以相同保留时间对应的是同种物质，比较图4，图5，不难得出，保留时间为22.571min对应的物质经两次柱层析后被洗脱去，保留时间为26.160min对应的物质进一步分析。中低压液相制备色谱分析纯化后提取物：精密称取纯化后提取物420mg，加入6mL0.05％TFA的水和乙腈溶解。中低压液相制备色谱条件：sunfireC18色谱柱(19mm×150mm，5μm)；流动相：A:水(0.05％TFA)，B：乙腈(V/V)，梯度洗脱程序见表2；流速5mL/min，柱温30℃，检测波长260nm，进样量6mL，记录30min色谱图。表2流动相梯度洗脱程序结果如图6所示，由图可看出，纯化后提取物中主要有两种物质，与HPLC检测的结果是一致的。根据收集保留时间峰1对应的物质，处理后得到固体物质57mg。S5.收集峰1处的物质，在40℃旋蒸，除去乙腈，再冻干，即得到麦角甾苷。通过核磁共振波谱仪测定最终提取物，结果如图7所示。本专利技术提取方法简单，成本低，提取的麦角甾苷纯度高，分离效率高和适合工业化。在不冲突的情况下，本文中上述实施例及实施例中的特征可以相互结合。以上所述仅为本专利技术的较佳实施例，并不用以限制本专利技术，凡在本专利技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.桂花中麦角甾苷的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.将桂花研磨为粉末；S2.用索式提取器进行提取；S3.将步骤S2得到的桂花粗提取物进行萃取和浓缩；S4.将AB‑8大孔吸附树脂和聚酰胺树脂进行双柱偶联，对步骤S3浓缩后的桂花粗提取物进行纯化；S5.在40℃旋蒸，再冻干，即得到麦角甾苷。

【技术特征摘要】
1.桂花中麦角甾苷的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.将桂花研磨为粉末；S2.用索式提取器进行提取；S3.将步骤S2得到的桂花粗提取物进行萃取和浓缩；S4.将AB-8大孔吸附树脂和聚酰胺树脂进行双柱偶联，对步骤S3浓缩后的桂花粗提取物进行纯化；S5.在40℃旋蒸，再冻干，即得到麦角甾苷。2.根据权利要求1所述的桂花中麦角甾苷的提取方法，其特征在于，所述步骤S3中，先后用石油醚，乙酸乙酯，水饱和的正丁醇对桂花粗提取物萃取和浓缩。3.根据权利要求1所述的桂花中麦角甾苷的提取方法，其特征在于，所述步骤S4中，AB-8大孔吸附树脂和聚酰胺树脂进行纯化的具体方法为：S4.1.对AB-8大孔吸附树脂和聚酰胺树脂进行预处理；S4.2.向AB-8大孔吸附树脂中上样，先后用80％的乙醇溶液和40％的甲醇溶液进行洗脱，乙醇溶液和甲醇溶液的流速均为1mL/min，洗脱时间为6h；S4.3.向聚酰胺树脂中上样，用80％的乙醇溶液进行洗脱，...

【专利技术属性】
技术研发人员：史玉敏，陈洪国，
申请(专利权)人：湖北科技学院，
类型：发明
国别省市：湖北,42