一种提取绞股蓝总甙的方法技术

本发明专利技术公开了一种便捷、系统、集成化的提取绞股蓝总甙的方法，所述方法包括如下步骤：第1步：绞股蓝药材前处理；第2步：将绞股蓝粉放在乙醇中浸提，得到滤液；第3步：树脂预处理；第4步：柱层析，得到绞股蓝总甙粉末；第5步：采用树脂再生溶液将树脂所吸附的杂质洗脱除去，使其恢复原来的组成和性能。该方法具有药材前处理、浸提、树脂预处理、柱层析、树脂再生的无间断差别的分离配合过程，分离效率高、分离过程稳定、便于质控，通过部分环节的控制便可得到目标数量的绞股蓝总甙。

【技术实现步骤摘要】
一种提取绞股蓝总甙的方法
本专利技术涉及中药材有效成分提取
，具体涉及一种提取绞股蓝总甙的方法。
技术介绍
绞股蓝总甙，具有降血脂、改善心肌缺血缺氧、脑缺血的保护、抗氧化等作用。养心健脾、益气和血、除痰化瘀，适用于高脂血症，见有心悸气短、胸闷肢麻、眩晕头痛、健忘耳鸣、自汗乏力、或脘腹胀满等心脾气虚，痰阻血瘀者。绞股蓝总甙的药理作用：药物组成主要有绞股蓝总苷。有降血脂、抗血小板聚集、抗心肌缺血损伤、抗衰老等作用，具体如下：1.降血脂：用高糖高脂饲料诱发大鼠高脂血症，给予绞股蓝总苷治疗(7天)，结果治疗组血清胆固醇、三酰甘油含量比对照组显著降低；其疗效与剂量呈线性关系。体外实验表明，绞股蓝总苷可抑制脂肪细胞分解形成游离脂肪酸、抑制脂肪细胞摄取葡萄糖合成中性脂肪酸。另外，该药在降低血脂同时，也能抗动脉粥样硬化，使动脉壁斑块形成减少，损伤减轻。2.抗心肌缺血损伤：动物实验研究结果表明，绞股蓝总苷不但可缩小心肌梗死范围，而且可对抗心肌缺血后再灌注损伤(使心肌细胞排列整齐，结构清晰，线粒体肿胀减轻，空泡减少，细胞染色体均匀)。3.抗血小板聚集：体外实验证明绞股蓝总苷明显抑制血小板聚集诱导剂(胶原、ADP、花生四烯酸)诱导的血小板聚集；超微结构观察可见血小板呈分散状，表面光滑，无伪足形成，细胞内颗粒多而清晰。4.对血流动力学的影响：给犬静脉注射绞股蓝总苷(1mg/kg)，可见心血管呈兴奋作用，收缩压及舒张压均见升高(收缩压升高大于舒张压)，作用维持30分钟以上；心率变化不明显。另外可提高心肌收缩及舒张性能，使每分输出量增加，心肌血循环改善。加大剂量静注(20mg/kg)对心血管呈抑制作用(血压降低，心率变慢，心肌收缩及舒张性能降低，使输出量减少)。5.增强性功能作用：绞股蓝提取物灌胃能使雄性小鼠的睾丸和前列腺、雌性小鼠子宫重量与对照组比较有明显增加，说明绞股蓝有雄性、雌性激素样作用。6.增强体力及抗疲劳作用：(1)绞股蓝总苷、水提物实验证明能延长小鼠游泳时间及爬杆时间和荷重游泳时间。较大剂量的绞股蓝提取物灌胃连续14天，能使长时间游泳大鼠保持较高血糖水平，减少肌糖原损耗，这可能是绞股蓝抗疲劳的重要原因；(2)绞股蓝可提高小鼠对常压缺氧的耐受力和气温较高环境下的存活时间。7.增强免疫作用绞股蓝能增加正常小鼠脾脏和胸腺重量；绞股蓝皂苷还能对抗环磷酰胺所致的小鼠脾脏和胸腺重量下降。并能增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能。8.抗自由基损伤作用：(1)绞股蓝皂苷能明显降低自然衰老和实验衰老大鼠肝脏和血浆脂质过氧化物(LPO)含量。临床研究报道，老年男冠心病患者血中LPO值明显增高，服用复方绞股蓝制剂后LPO值明显降低，恢复到健康男性老年人的水平；(2)绞股蓝总甙可使力竭运动小鼠心肾组织中丙二醛(MDA)减少，肾组织中超氧化物歧化化物歧化酶(SOD)活性升高，SOD/MDA比值相对增大，达到保护心肾组织免疫自由基损伤的作用。用绞股蓝醇提物喂养小鼠不仅提高小鼠肝SOD活性，同时也增强SOD耐热，耐酸性能，起到保护SOD的作用。9.寿命试验—“细胞赋活作用”：绞股蓝及其复方制剂均可延长小鼠平均寿命和最高寿命。另据报道，绞股蓝延长组成生物的细胞繁殖传代，含总苷200mg/ml的培养液中，使人胎儿离体正常二倍体的成纤维细胞繁殖到59代，而对照组只传至51代就停止生长，延长15.7％；对雄尔纳综合征患者的皮肤细胞离体培养，对照组只繁衍22代，绞股蓝组延长至27代，延长22％，因此有细胞赋活剂之称。原有的绞股蓝总甙的提取工艺在药材前处理、浸提、柱层析中均存在较大缺陷，具体表现为：成本高、产量低、总苷种类缺失进而导致疗效下降。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种提取绞股蓝总甙的方法，用以解决现有的绞股蓝总甙的提取工艺成本高、产量低、总苷种类缺失进而导致疗效下降的问题。为实现上述目的，本专利技术的技术方案为：一种提取绞股蓝总甙的方法，所述方法包括如下步骤：第(1)步：将绞股蓝药材粉碎，得到绞股蓝粉；第(2)步：将第(1)步得到的绞股蓝粉放在乙醇中浸提，得到滤液；第(3)步：在树脂中加入水，浸泡，使树脂充分溶胀；加入树脂预处理溶液，冲洗，备用；第(4)步：将第(2)步所得滤液上第(3)步预处理过的树脂柱进行吸附，树脂吸附饱和后，停止滤液上柱；采用乙醇解吸所述树脂柱内所吸附的皂苷，得到乙醇解吸液；将所述乙醇解吸液蒸馏，回收乙醇，固体烘干，得到水溶和脂溶成分的绞股蓝总甙粉末(A粉末)；所述树脂柱由从上往下依次串联的D101大孔吸附树脂柱、第一D113阳离子树脂柱、LSA-700B大孔树脂柱和第二D113阳离子树脂柱组成；D101大孔吸附树脂是一种具有多孔海绵状结构人工合成的聚合物吸附剂，依靠树脂骨架和被吸附的分子(吸附质)之间的范德华力，通过树脂巨大的比表面积进行物理吸附而达到从水溶液中分离提取水溶性较差的有机大分子的目的。采用大孔吸附树脂提取中草药有效成分如皂甙类、黄酮类、生物碱类，具有操作简便、成本较低、树脂可反复使用等优点，适于工业化规模生产。D101树脂是一种非极性吸附剂，比表面积为480～530m2/g。D113树脂是在大孔结构的丙烯酸共聚体上带有羧酸基(-COOH)的阳离子交换树脂。主要用于工业水处理，特别是除去碳酸氢盐、碳酸盐及其它一些碱性盐类，也可用于锌、镍废液的回收处理，生化药物的分离提纯等。第(5)步：采用树脂再生溶液将树脂所吸附的杂质洗脱除去，使所述树脂恢复原来的组成和性能。作为一种优选的方案，第(3)步包括如下步骤：将D101大孔吸附树脂装入容皿中，加纯化水并使液面高于树脂面5-10cm，浸泡4h以上，使树脂充分溶胀后，再将树脂和水一同抽入柱内；静置10-30min；调整液面与树脂面持平，加入体积分数为80％-95％的乙醇1.5-2.5BV，流速1.5-2.5BV/h，冲洗，备用；将D113阳离子树脂装入容皿中，加纯水并使液面高于树脂面5-10cm，浸泡4h以上，使树脂充分溶胀，再将树脂和水一同抽入柱内，静置10-30min；调整液面与树脂面持平，加入2％-6％HCl溶液1.5-2.5BV，流速0.5-1.5BV/h，使树脂转型；再加入纯水以相同流速洗至柱底流出液PH＝6.5～7.0；再加入80％-95％乙醇1.5-2.5BV，流速0.5-1.5BV/h，冲洗后，备用；将LSA-700B大孔树脂装入容皿中，加纯水并使液面高于树脂面5-10cm，浸泡4h以上，使树脂充分溶胀，再将树脂和水一同抽入柱内；静置10-30min；调整液面与树脂面持平，加入2％-6％NaOH溶液1.5-2.5BV，流速0.5-1.5BV/h，使树脂转型；再加入纯水以相同流速洗至柱底流出液PH＝6.5～7.0；再加入体积分数为80％-95％的乙醇1.5-2.5BV，流速0.5-1.5BV/h，冲洗后，备用。作为一种优选的方案，所述从上往下依次串联的D101大孔吸附树脂柱、第一D113阳离子树脂柱、LSA-700B大孔树脂柱和第二D113阳离子树脂柱的柱体积比例为1：1：3：1。作为一种优选的方案，所述第(5)步包括如下步骤：第(5.1)步：配制体积分数为3％-7％酸性醇溶液；第(5.2)步：配制体积分数为2％-6％的氢氧化钠溶液；第(5.3)步：将本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提取绞股蓝总甙的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：第(1)步：将绞股蓝药材粉碎，得到绞股蓝粉；第(2)步：将第(1)步得到的绞股蓝粉放在乙醇中浸提，得到滤液；第(3)步：在树脂中加入水，浸泡，使树脂充分溶胀；加入树脂预处理溶液，冲洗，备用；第(4)步：将第(2)步所得滤液上第(3)步预处理过的树脂柱进行吸附，树脂吸附饱和后，停止滤液上柱；采用乙醇解吸所述树脂柱内所吸附的皂苷，得到乙醇解吸液；将所述乙醇解吸液蒸馏，回收乙醇，固体烘干，得到水溶和脂溶成分的绞股蓝总甙粉末；所述树脂柱由从上往下依次串联的D101大孔吸附树脂柱、第一D113阳离子树脂柱、LSA‑700B大孔树脂柱和第二D113阳离子树脂柱组成；第(5)步：采用树脂再生溶液将树脂所吸附的杂质洗脱除去，使所述树脂恢复原来的组成和性能。

【技术特征摘要】
1.一种提取绞股蓝总甙的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：第(1)步：将绞股蓝药材粉碎，得到绞股蓝粉；第(2)步：将第(1)步得到的绞股蓝粉放在乙醇中浸提，得到滤液；第(3)步：在树脂中加入水，浸泡，使树脂充分溶胀；加入树脂预处理溶液，冲洗，备用；第(4)步：将第(2)步所得滤液上第(3)步预处理过的树脂柱进行吸附，树脂吸附饱和后，停止滤液上柱；采用乙醇解吸所述树脂柱内所吸附的皂苷，得到乙醇解吸液；将所述乙醇解吸液蒸馏，回收乙醇，固体烘干，得到水溶和脂溶成分的绞股蓝总甙粉末；所述树脂柱由从上往下依次串联的D101大孔吸附树脂柱、第一D113阳离子树脂柱、LSA-700B大孔树脂柱和第二D113阳离子树脂柱组成；第(5)步：采用树脂再生溶液将树脂所吸附的杂质洗脱除去，使所述树脂恢复原来的组成和性能。2.根据权利要求1所述的提取绞股蓝总甙的方法，其特征在于，第(3)步包括如下步骤：将D101大孔吸附树脂装入容皿中，加纯化水并使液面高于树脂面5-10cm，浸泡4h以上，使树脂充分溶胀后，再将树脂和水一同抽入柱内；静置10-30min；调整液面与树脂面持平，加入体积分数为80％-95％的乙醇1.5-2.5BV，流速1.5-2.5BV/h，冲洗，备用；将D113阳离子树脂装入容皿中，加纯水并使液面高于树脂面5-10cm，浸泡4h以上，使树脂充分溶胀，再将树脂和水一同抽入柱内，静置10-30min；调整液面与树脂面持平，加入2％-6％HCl溶液1.5-2.5BV，流速0.5-1.5BV/h，使树脂转型；再加入纯水以相同流速洗至柱底流出液PH＝6.5～7.0；再加入80％-95％乙醇1.5-2.5BV，流速0.5-1.5BV/h，冲洗后，备用；将LSA-700B大孔树脂装入容皿中，加纯水并使液面高于树脂面5-10cm，浸泡4h以上，使树脂充分溶胀，再将树脂和水一同抽入柱内；静置10-30min；调整液面与树脂面持平，加入2％-6％NaOH溶液1.5-2.5BV，流速0.5-1.5BV/h，使树脂转型；再加入纯水以相同流速洗至柱底流出液PH＝6.5～7.0；再加入体积分数为80％-95％的乙醇1.5-2.5BV，流速0.5-1.5BV/h，冲洗后，备用。3.根据权利要求1所述的提取绞股蓝总甙的方法，其特征在于，所述从上往下依次串联的D101大孔吸附树脂柱、第一D113阳离子树脂柱、LSA-700B大孔树脂柱和第二D113阳离子树脂柱的柱体积比例为1：1：3：1。4.根据权利要求1所述的提取绞股蓝总甙的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘哲，
申请(专利权)人：刘哲，
类型：发明
国别省市：陕西,61