一种樟脑磺酸或其盐的异构体检测方法技术

本发明专利技术公开了一种樟脑磺酸或其盐的异构体检测方法，所述检测方法采用高效液相色谱法对樟脑磺酸或其盐的异构体进行定性或定量检测，检测条件包括：色谱柱：离子交换型柱；检测波长：210~400nm；流动相：含酸和二乙胺的有机相，所述酸为甲酸或乙酸，所述检测方法还包括以下步骤：（1）制备供试品溶液、对照品溶液；（2）分别将供试品溶液、对照品溶液进样检测；所述供试品溶液为樟脑磺酸或其盐的异构体溶液，优选为左旋樟脑磺酸溶液或/和右旋樟脑磺酸溶液，进一步优选为左旋樟脑磺酸溶液。采用本发明专利技术的方法分离度好，理论塔板数高。

【技术实现步骤摘要】
一种樟脑磺酸或其盐的异构体检测方法
本专利技术涉及检测方法领域，特别是涉及一种樟脑磺酸或其盐的异构体检测方法。
技术介绍
樟脑磺酸具有棱状结晶体，是一对手性光学对映体，分为左旋樟脑磺酸和右旋樟脑磺酸，其熔点分别在193～195℃和197～200℃。樟脑磺酸或其盐是一种重要的有机合成中间体，旋光体拆分剂。由于其具有的旋光性，在工业上可用于旋光异构体的消旋，同时又广泛作为医药中间体，如用于生产肠道紊乱抑制剂、H1V改善剂等。左、右樟脑磺酸或其盐用于光学活性氨基酸类药物的重要拆分剂，如以樟脑磺酸或其盐为手性离子对试剂，分离具有抑制真菌中由细胞色素P450介导的14α-甾醇去甲基化，抑制麦角甾醇的生物合成作用的伏立康唑。现有检测方法难以将樟脑磺酸或其盐的异构体检测分析，本专利技术研究了一种樟脑磺酸或其盐的异构体检测方法。
技术实现思路
樟脑磺酸或其盐为药物合成中常用的手性拆分剂，对于伏立康唑手性中心的形成有关键作用。但樟脑磺酸或其盐易在合成原料的过程中易残留，而食品药品监督管理局在药物报批或发补中要求对樟脑磺酸或其盐残留情况采用专门的方法控制。由于左、右樟脑磺酸或其盐的理化性质具有较大的相似性，现有检测方法难以将左、右樟脑磺酸或其盐在分析仪器中分开并进行检测，然而，申请人在实验阶段发现了一种樟脑磺酸或其盐的异构体检测方法，所述检测方法采用高效液相色谱法对樟脑磺酸或其盐的异构体进行定性或定量检测，检测条件包括：色谱柱：离子交换型柱；检测波长：210～400nm；流动相：含酸和二乙胺的有机相，所述酸为甲酸或乙酸。上述检测方法可以用来检测樟脑磺酸或其盐的异构体的含量或有关物质，所述检测方法还包括以下步骤：(1)制备供试品溶液、对照品溶液；(2)分别将供试品溶液、对照品溶液进样检测；所述供试品溶液为樟脑磺酸或其盐的异构体溶液，优选为左旋樟脑磺酸溶液或/和右旋樟脑磺酸溶液，在本专利技术的一个具体实施例中为左旋樟脑磺酸溶液。进一步地，所述色谱柱为离子交换型手性柱，优选为阴离子交换型手性柱。进一步地，所述色谱柱填料为表面键合有奎尼丁衍生物的硅胶。在本专利技术的一个实施例中，所述色谱柱为，DaicelChiralpakZWIX(-)250mm×4mm，3μm或效能相当的色谱柱。进一步地，所述检测波长为250nm～290nm，优选为280nm～290nm，进一步优选为283～287nm，更进一步优选为285nm。进一步地，所述有机相为甲醇或乙腈，优选为甲醇。相较乙腈，甲醇毒性较小，价格明显低，使用甲醇在检测效果好的基础上，有利于操作人员的健康，同时大大降低了检测成本。进一步地，所述流动相中甲酸浓度为50～100mmol/L，优选为100mmol/L；二乙胺浓度为25～100mmol/L，优选为50mmol/L。进一步地，所述检测条件还包括以下i～iv中的一项或多项：i流速为每分钟0.18～0.22ml，优选为每分钟0.2ml；ii柱温为18～22℃，优选为20℃；iii进样量为10～50μl，优选为10μl；iv检测浓度为0.007mg/ml～12mg/ml，优选为0.75mg/ml～10mg/ml，进一步优选为5mg/ml。进一步地，所述色谱柱规格为4.0mm×150～250mm，3μm，优选为4.0mm×250mm，3μm。所述检测方法在进样检测前还可以包括系统适用性试验，以保障系统的稳定性和检测结果的准确性。所述检测方法可使用面积归一化法、自身对照法、外标法等方法分析、计算检测结果。进一步地，所述樟脑磺酸或其盐的异构体选自左旋樟脑磺酸或其盐、右旋樟脑磺酸或其盐中的一种或两种的混合物。有益效果：采用本专利技术的方法检测樟脑磺酸或其盐的异构体，能够有效对樟脑磺酸或其盐进行检测，且其检测结果，基线平整，峰形对称，分离度好，理论塔板数高，稳定性高。附图说明图1是本专利技术初步筛选条件色谱图；图2是本专利技术左旋樟脑磺酸全波长扫描图；图3是本专利技术右旋樟脑磺酸全波长扫描图；图4是本专利技术样品为5mg/ml左旋樟脑磺酸，流动相为含50mmol/L甲酸、25mmol/L二乙胺的甲醇溶液的图谱；图5是本专利技术样品为5mg/ml左旋樟脑磺酸，流动相为含100mmol/L甲酸、50mmol/L二乙胺的甲醇溶液的图谱；图6是本专利技术空白、系统适用性、对照溶液、供试品叠图。具体实施方式实施例1取左旋樟脑磺酸供试品适量，精密称定，用甲醇溶解并稀释成每1ml约含5mg左旋樟脑磺酸的溶液，作为供试品溶液；精密移取供试品溶液适量，用甲醇稀释成每1ml中约含50μg左旋樟脑磺酸的溶液作为对照溶液。另精密称取樟脑磺酸消旋体对照品适量，用甲醇溶解并稀释成每1ml中约含左旋樟脑磺酸与右旋樟脑磺酸各约2.5mg的溶液，作为系统适用性溶液。照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)试验，用表面键合有奎尼丁衍生物的硅胶为填充剂(DaicelChiralpakZWIX(-)250mm×4mm，3μm或效能相当的色谱柱)，以甲醇：甲酸：二乙胺体积比1000:3.8:5.2为流动相，检测波长为285nm，流速为每分钟0.2ml；柱温20℃。精密量取系统适用性溶液10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，出峰顺序依次为左旋樟脑磺酸、右旋樟脑磺酸，分离度应符合规定。精密量取供试品溶液、对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有右旋樟脑磺酸峰，其峰面积不得大于对照溶液主峰面积2倍(2％)。实施例2左旋樟脑磺酸异构体方法学研究1.分析方法建立1.1概述左旋樟脑磺酸为伏立康唑合成过程中使用的手性拆分剂，对于伏立康唑手性中心的形成有关键作用。由左旋樟脑磺酸合成路线可知左旋樟脑磺酸对映异构体较右旋樟脑磺酸易残留，结合食品药品监督管理局针对伏立康唑发出的意见中，以专属性方法控制左旋樟脑磺酸光学纯度的要求。建立HPLC法控制左旋樟脑磺酸中对映异构体的含量。1.2筛选与优化1.2.1方法初步筛选在实验过程中在以如下色谱条件进行初步检测检测，结果见图1，左旋樟脑磺酸与右旋樟脑磺酸在此条件下峰型较差，无保留且无分离的迹象。表1初步筛选色谱条件色谱柱OJ-RH4.6*150um，5um流动相乙腈-水(10:90)检测波长210nm流速1ml/min柱温30℃供试品1mg/ml溶剂水洗脱程序等度洗脱1.2.2方法初步确定在实验过程中意外发现如下初步色谱条件，表2初步色谱条件色谱柱ZWIX(-)4.0*150um，3um流动相甲醇(50mmol/L甲酸+25mmol/L二乙胺)检测波长254nm流速0.2ml/min柱温15℃供试品1.5mg/ml溶剂甲醇洗脱程序等度洗脱1.2.3检测波长进一步筛选以浓度约为1.5mg/ml的左旋樟脑磺酸及右旋樟脑磺酸溶液在200-400nm进行扫描，由图可见左旋樟脑磺酸与右旋樟脑磺酸最大吸收波长均在280nm至290nm之间。故选择检测波长为285nm。结果如图1-图2。1.2.4供试品浓度的确定将左旋樟脑磺酸及右旋樟脑磺酸混合溶液稀释至峰S/N均约为10时、浓度分别约为1.5μg/ml。结合右旋樟脑磺酸控制限度2％，确定供试品浓度为5mg/ml时能满足检测灵敏度的要求。1.2.5流动相优化将5mg/ml左旋樟脑磺酸在初步色谱条件下进样，结果如图3，主峰本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种樟脑磺酸或其盐的异构体检测方法，其特征在于，所述检测方法采用高效液相色谱法对樟脑磺酸或其盐的异构体进行定性或定量检测，检测条件包括：色谱柱：离子交换型柱；检测波长：210～400nm；流动相：含酸和二乙胺的有机相，所述酸为甲酸或乙酸，所述检测方法还包括以下步骤：(1)制备供试品溶液、对照品溶液；(2)分别将供试品溶液、对照品溶液进样检测；所述供试品溶液为樟脑磺酸或其盐的异构体溶液，优选为左旋樟脑磺酸溶液或/和右旋樟脑磺酸溶液，进一步优选为左旋樟脑磺酸溶液。

【技术特征摘要】
1.一种樟脑磺酸或其盐的异构体检测方法，其特征在于，所述检测方法采用高效液相色谱法对樟脑磺酸或其盐的异构体进行定性或定量检测，检测条件包括：色谱柱：离子交换型柱；检测波长：210～400nm；流动相：含酸和二乙胺的有机相，所述酸为甲酸或乙酸，所述检测方法还包括以下步骤：(1)制备供试品溶液、对照品溶液；(2)分别将供试品溶液、对照品溶液进样检测；所述供试品溶液为樟脑磺酸或其盐的异构体溶液，优选为左旋樟脑磺酸溶液或/和右旋樟脑磺酸溶液，进一步优选为左旋樟脑磺酸溶液。2.根据权利要求1所述的一种樟脑磺酸或其盐的异构体检测方法，其特征在于，所述色谱柱为离子交换型手性柱，优选阴离子交换型手性柱。3.根据权利要求1或2所述的一种樟脑磺酸或其盐的异构体检测方法，其特征在于，所述色谱柱固定相为表面键合有奎尼丁衍生物的硅胶。4.根据权利要求1所述的一种樟脑磺酸或其盐的异构体检测方法，其特征在于，所述检测波长为250nm～290nm，优选为280nm～290nm，进一步优选为283～287nm，更进一步优选为285nm。5.根据权利要求1所述的一种樟脑磺酸或其...

【专利技术属性】
技术研发人员：周一帆，童庆国，罗鸣，李英富，苏忠海，
申请(专利权)人：成都倍特药业有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51