治疗性CD47抗体制造技术

提供了具有如本文所述的不同功能分布的抗‑CD47单克隆抗体(抗‑CD47mAb)、产生抗‑CD47mAb的方法、以及使用这些抗‑CD47mAb作为治疗剂用于预防或治疗实体癌和血液癌、缺血再灌注损伤、心血管疾病、自身免疫性疾病、炎性疾病的治疗剂或作为诊断学用于确定组织样品中的CD47水平的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗性CD47抗体相关申请的交叉引用本申请要求以下美国临时申请号的权益：2015年9月18日提交的62/220,691；2015年12月4日提交的62/263,544；2015年9月22日提交的62/221,852；2015年9月18日提交的62/220,725；2015年9月25日提交的62/232,681；2015年11月6日提交的62/252,171；以及2016年6月24日提交的62/354,592；这些申请的披露内容均通过引用结合在此，如同整体在此写出一般。
本披露大体上涉及具有如本文所述的不同功能分布的抗-CD47单克隆抗体(抗-CD47mAb)、产生抗-CD47mAb的方法、以及使用这些抗-CD47mAb作为治疗剂用于预防或治疗实体癌和血液癌、缺血再灌注损伤、心血管疾病、自身免疫性疾病或炎性疾病或作为诊断学用于确定组织样品中的CD47水平的方法。
技术介绍
CD47是一种细胞表面受体，其包括细胞外IgV组结构域、5跨膜结构域、以及替代性剪接的胞质尾区。两种配体结合CD47：信号抑制性受体蛋白α(SIRPα)和血小板应答蛋白-1(TSP1)。CD47表达和/或活性已牵涉到许多疾病和病症。因此，需要用于治疗人类和动物中与CD47相关的疾病和病状的治疗性组合物和方法，包括预防和治疗实体癌和血液癌、缺血再灌注损伤(IRI)、心血管疾病、或自身免疫性或炎性疾病。还需要用于确定肿瘤样品中的CD47表达水平的诊断组合物和方法。
技术实现思路
本披露描述了具有不同功能分布的抗-CD47mAb。这些抗体具有选自以下各项的不同特性组合：1)表现出与CD47的一种或多种物种同系物的交叉反应性；2)阻断CD47与其配体SIRPα之间的相互作用；3)增加对人类肿瘤细胞的吞噬作用，4)诱导易感性人类肿瘤细胞的死亡；5)不诱导人类肿瘤细胞的细胞死亡；6)减少了与人类血红细胞(hRBC)的结合；7)不具有可检测的与hRBC的结合；8)引起减少的hRBC凝集；9)不引起可检测的hRBC凝集；10)逆转一氧化氮(NO)的TSP1抑制，和/或11)不逆转NO途径的TSP1抑制。本披露的抗体适用于用以治疗人类和动物中与CD47相关的疾病和病状的不同治疗方法，包括预防和治疗实体癌和血液癌、自身免疫性疾病、炎性疾病、IRI、以及心血管疾病。本披露的抗体也适用作确定组织样品中的CD47表达水平的诊断学。本披露的实施例包括分离的抗体及其免疫活性结合片段；包含一种或多种抗-CD47单克隆抗体、优选嵌合或人源化形式的所述抗体的药物组合物；此类抗-CD47单克隆抗体的治疗性使用方法；以及产生这些抗-CD47单克隆抗体的细胞系。本披露的实施例包括通过参考特异性结构特征(即CDR或整个重链可变结构域或轻链可变结构域的指定氨基酸序列)来定义的mAb或其抗原结合片段。所有这些抗体均结合CD47。单克隆抗体或其抗原结合片段可包含至少一个、通常至少三个如本文所提供的CDR序列，这些序列通常与来自人类可变区的框架序列组合或呈分离的CDR肽的形式。在一些实施例中，抗体包含至少一条轻链和至少一条重链，该至少一条轻链包含本文提供的位于可变区框架中的三个轻链CDR序列，该可变区框架可以是但不限于鼠类或人类可变区框架，该至少一条重链包含本文提供的位于可变区框架中的三个重链CDR序列，该可变区框架可以是但不限于人类或鼠类可变区框架。优选的实施例是包含重链可变结构域的抗-CD47mAb或其抗原结合片段，该重链可变结构域包含可变重链CDR1、可变重链CDR2和可变重链CDR3，其中所述可变重链CDR1包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3；所述可变重链CDR2包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6；并且所述可变重链CDR3包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9以及SEQIDNO:10。重链可变结构域可包含所列出的可变重链CDR1序列(HCDR1)中的任一个与可变重链CDR2序列(HCDR2)中的任一个和可变重链CDR3序列(HCDR3)中的任一个的组合。然而，HCDR1和HCDR2以及HCDR3的某些实施例是特别优选的，这些实施例来源于单一常见VH结构域，该结构域的实例是本文所述的。抗体或其抗原结合片段可另外包含轻链可变结构域(VL)，该轻链可变结构域与VH结构域配对形成抗原结合结构域。优选的轻链可变结构域是包含可变轻链CDR1、可变轻链CDR2和可变轻链CDR3的那些轻链可变结构域，其中所述可变轻链CDR1包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14；所述可变轻链CDR2任选地包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17；并且所述可变轻链CDR3任选地包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:18、SEQIDNO:19、SEQIDNO:20。轻链可变结构域可包含所列出的可变轻链CDR1序列(LCDR1)中的任一个与可变轻链CDR2序列(LCDR2)中的任一个和可变轻链CDR3序列(LCDR3)中的任一个的组合。然而，LCDR1和LCDR2以及LCDR3的某些实施例是特别优选的，这些实施例来源于单一常见VL结构域，该结构域的实例是本文所述的。包含于VL结构域配对的VH结构域的任何给定CD47抗体或其抗原结合片段将包含6个CDR的组合：可变重链CDR1(HCDR1)、可变重链CDR2(HCDR2)、可变重链CDR3(HCDR3)、可变轻链CDR1(LCDR1)、可变轻链CDR2(LCDR2)、以及可变轻链CDR1(LCDR1)。尽管选自以上所列出的CDR序列组的6个CDR的所有组合均是可允许的，并且在本披露的范围内，6个CDR的某些组合是特别优选的。6个CDR的优选组合包括但不限于可变重链CDR1(HCDR1)、可变重链CDR2(HCDR2)、可变重链CDR3(HCDR3)、可变轻链CDR1(LCDR1)、可变轻链CDR2(LCDR2)、以及可变轻链CDR3(LCDR3)的组合，该组合选自由以下各项组成的组：(i)包含SEQIDNO:1的HCDR1、包含SEQIDNO:4的HCDR2、包含SEQIDNO:7的HCDR3、包含SEQIDNO:11的LCDR1、包含SEQIDNO:15的LCDR2、包含SEQIDNO:18的LCDR3；(ii)包含SEQIDNO:1的HCDR1、包含SEQIDNO:4的HCDR2、包含SEQIDNO:8的HCDR3、包含SEQIDNO:11的LCDR1、包含SEQIDNO:15的LCDR2、包含SEQIDNO:18的LCDR3；(iii)包含SEQIDNO:2的HCDR1、包含SEQIDNO:5的HCDR2、包含SEQIDNO:9的HCDR3、包含SEQIDNO:12的LCDR1、包含SEQIDNO:16的LCDR2、包含SEQIDNO:19的LCDR3；(iv)包含本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段：a.结合人类CD47，b.阻断SIRPα与人类CD47的结合，c.增加对人类肿瘤细胞的吞噬作用；并且d.诱导人类肿瘤细胞的死亡。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.09.18 US 62/220,691;2015.09.18 US 62/220,725;1.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段：a.结合人类CD47，b.阻断SIRPα与人类CD47的结合，c.增加对人类肿瘤细胞的吞噬作用；并且d.诱导人类肿瘤细胞的死亡。2.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段：a.结合人类CD47，b.阻断SIRPα与人类CD47的结合，c.增加对人类肿瘤细胞的吞噬作用，d.诱导人类肿瘤细胞的死亡；并且e.引起人类血红细胞(hRBC)不凝集。3.如前述权利要求中任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段是嵌合抗体或人源化抗体。4.如前述权利要求中任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中该单克隆抗体或其抗原结合片段与CD47的一种或多种物种同系物进行交叉反应。5.如前述权利要求中任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中该单克隆抗体或其抗原结合片段不结合hRBC。6.如前述权利要求中任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域，该重链可变结构域包含可变重链CDR1、可变重链CDR2和可变重链CDR3，其中所述可变链CDR1包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3；其中所述可变重链CDR2包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6；并且其中所述可变重链CDR3包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9、以及SEQIDNO:10。7.如权利要求8所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段进一步包含轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含可变轻链CDR1、可变轻链CDR2和可变轻链CDR3，其中所述可变链CDR1包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14；其中所述可变轻链CDR2包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17；并且其中所述可变轻链CDR3包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:18、SEQIDNO:19、SEQIDNO:20。8.如权利要求7所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含可变重链CDR1(HCDR1)、可变重链CDR2(HCDR2)、以及可变重链CDR3(HCDR3)、可变轻链CDR1(LCDR1)、可变轻链CDR2(LCDR2)、以及可变轻链CDR3(LCDR3)的组合，其中该组合选自下组，该组由以下各项组成：(i)包含SEQIDNO:1的HCDR1、包含SEQIDNO:4的HCDR2、包含SEQIDNO:7的HCDR3、包含SEQIDNO:11的LCDR1、包含SEQIDNO:15的LCDR2、包含SEQIDNO:18的LCDR3；(ii)包含SEQIDNO:1的HCDR1、包含SEQIDNO:4的HCDR2、包含SEQIDNO:8的HCDR3、包含SEQIDNO:11的LCDR1、包含SEQIDNO:15的LCDR2、包含SEQIDNO:18的LCDR3；(iii)包含SEQIDNO:2的HCDR1、包含SEQIDNO:5的HCDR2、包含SEQIDNO:9的HCDR3、包含SEQIDNO:12的LCDR1、包含SEQIDNO:16的LCDR2、包含SEQIDNO:19的LCDR3；(iv)包含SEQIDNO:3的HCDR1、包含SEQIDNO:6的HCDR2、包含SEQIDNO:10的HCDR3、包含SEQIDNO:14的LCDR1、包含SEQIDNO:17的LCDR2、包含SEQIDNO:20的LCDR3。9.如权利要求8所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含具有选自下组的氨基酸序列的重链可变结构域(VH)，该组由以下各项组成：SEQIDNO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:23、SEQIDNO:34、SEQIDNO:36、SEQIDNO:38、SEQIDNO:39、以及SEQIDNO:40，并且任选地包含具有选自下组的氨基酸序列的轻链可变结构域(VL)，该组由以下各项组成：SEQIDNO:41、SEQIDNO:42、SEQIDNO:43、SEQIDNO:49、SEQIDNO:51、以及SEQIDNO:52。10.如权利要求9所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)和轻链可变结构域(VL)的组合，其中该组合选自下组，该组由以下各项组成：(i)包含氨基酸序列SEQIDNO:21的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:41的轻链可变结构域；(ii)包含氨基酸序列SEQIDNO:23的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:43的轻链可变结构域；(iii)包含氨基酸序列SEQIDNO:22的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:42的轻链可变结构域；(iv)包含氨基酸序列SEQIDNO:34的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:49的轻链可变结构域；(v)包含氨基酸序列SEQIDNO:36的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:52的轻链可变结构域；(vi)包含氨基酸序列SEQIDNO:38的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:52的轻链可变结构域；以及(vii)包含氨基酸序列SEQIDNO:39的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:52的轻链可变结构域。11.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段：a.结合人类CD47，b.阻断SIRPα与人类CD47的结合，c.增加对人类肿瘤细胞的吞噬作用，d.诱导人类肿瘤细胞的死亡；并且e.引起人类血红细胞(hRBC)凝集减少。12.如权利要求11所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段是嵌合抗体或人源化抗体。13.如权利要求11或权利要求12所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中该单克隆抗体或其抗原结合片段与CD47的一种或多种物种同系物进行交叉反应。14.根据权利要求11-13所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中该单克隆抗体或其抗原结合片段减少了hRBC结合。15.如权利要求11-14所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域，该重链可变结构域包含可变重链CDR1、可变重链CDR2和可变重链CDR3，其中所述可变链CDR1包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:1和SEQIDNO:3，其中所述可变重链CDR2包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:4和SEQIDNO:6；并且其中所述可变重链CDR3包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:7、SEQIDNO:8和SEQIDNO:10。16.如权利要求15所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段进一步包含轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含可变轻链CDR1、可变轻链CDR2和可变轻链CDR3，其中所述可变链CDR1包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:11和SEQIDNO:14；其中所述可变轻链CDR2包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:15和SEQIDNO:17；并且其中所述可变轻链CDR3包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:18和SEQIDNO:20。17.如权利要求16所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含可变重链CDR1(HCDR1)、可变重链CDR2(HCDR2)、以及可变重链CDR3(HCDR3)、可变轻链CDR1(LCDR1)、可变轻链CDR2(LCDR2)、以及可变轻链CDR3(LCDR3)的组合，其中该组合选自下组，该组由以下各项组成：(i)包含SEQIDNO:1的HCDR1、包含SEQIDNO:4的HCDR2、包含SEQIDNO:8的HCDR3、包含SEQIDNO:11的LCDR1、包含SEQIDNO:15的LCDR2、以及包含SEQIDNO:18的LCDR3；(ii)包含SEQIDNO:3的HCDR1、包含SEQIDNO:6的HCDR2、包含SEQIDNO:10的HCDR3、包含SEQIDNO:14的LCDR1、包含SEQIDNO:17的LCDR2、以及包含SEQIDNO:20的LCDR3。18.如权利要求17所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含具有选自下组的氨基酸序列的重链可变结构域(VH)，该组由以下各项组成：SEQIDNO:24和SEQIDNO:37，并且任选地包含具有选自下组的氨基酸序列的轻链可变结构域(VL)，该组由以下各项组成：SEQIDNO:43和SEQIDNO:52。19.如权利要求18所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)和轻链可变结构域(VL)的组合，其中该组合选自下组，该组由以下各项组成：(i)包含氨基酸序列SEQIDNO:24的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:43的轻链可变结构域；以及(ii)包含氨基酸序列SEQIDNO:37的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:52的轻链可变结构域。20.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段：a.结合人类CD47，b.阻断SIRPα与人类CD47的结合，c.增加对人类肿瘤细胞的吞噬作用d.诱导人类肿瘤细胞的死亡；并且e.减少了hRBC结合。21.如权利要求20所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段是嵌合抗体或人源化抗体。22.如权利要求20或权利要求21所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中该单克隆抗体或其抗原结合片段与CD47的一种或多种物种同系物进行交叉反应。23.如权利要求20-22所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域，该重链可变结构域包含可变重链CDR1、可变重链CDR2和可变重链CDR3，其中所述可变链CDR1包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:1和SEQIDNO:2；其中所述可变重链CDR2包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:4和SEQIDNO:5，并且其中所述可变重链CDR3包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:7、SEQIDNO:8和SEQIDNO:9。24.如权利要求23所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段进一步包含轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含可变轻链CDR1、可变轻链CDR2和可变轻链CDR3，其中所述可变链CDR1包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:11、SEQIDNO:12和SEQIDNO:13；其中所述可变轻链CDR2包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:15和SEQIDNO:16；并且其中所述可变轻链CDR3包含选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQIDNO:18和SEQIDNO:19。25.如权利要求24所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含可变重链CDR1(HCDR1)、可变重链CDR2(HCDR2)、以及可变重链CDR3(HCDR3)、可变轻链CDR1(LCDR1)、可变轻链CDR2(LCDR2)、以及可变轻链CDR3(LCDR3)的组合，其中该组合选自下组，该组由以下各项组成：(i)包含SEQIDNO:1的HCDR1、包含SEQIDNO:4的HCDR2、包含SEQIDNO:7的HCDR3、包含SEQIDNO:11的LCDR1、包含SEQIDNO:15的LCDR2、包含SEQIDNO:18的LCDR3；(ii)包含SEQIDNO:2的HCDR1、包含SEQIDNO:5的HCDR2、包含SEQIDNO:9的HCDR3、包含SEQIDNO:13的LCDR1、包含SEQIDNO:16的LCDR2、包含SEQIDNO:19的LCDR3。26.如权利要求25所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含具有选自下组的氨基酸序列的重链可变结构域(VH)，该组由以下各项组成：SEQIDNO:26、SEQIDNO:27和SEQIDNO:33，并且任选地包含具有选自下组的氨基酸序列的轻链可变结构域(VL)，该组由以下各项组成：SEQIDNO:44和SEQIDNO:48。27.如权利要求26所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)和轻链可变结构域(VL)的组合，其中该组合选自下组，该组由以下各项组成：(i)包含氨基酸序列SEQIDNO:26的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:44的轻链可变结构域；(ii)包含氨基酸序列SEQIDNO:27的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:44的轻链可变结构域；以及(iii)包含氨基酸序列SEQIDNO:33的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:48的轻链可变结构域。28.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段：a.结合人类CD47，b.阻断SIRPα与人类CD47的结合，c.增加对人类肿瘤细胞的吞噬作用，d.引起人类血红细胞(hRBC)不凝集；并且e.不结合hRBC。29.如权利要求28所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段是嵌合抗体或人源化抗体。30.如权利要求28或权利要求29所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中该单克隆抗体或其抗原结合片段与CD47的一种或多种物种同系物进行交叉反应。31.如权利要求28-30所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含可变重链CDR1(HCDR1)、可变重链CDR2(HCDR2)、以及可变重链CDR3(HCDR3)、可变轻链CDR1(LCDR1)、可变轻链CDR2(LCDR2)、以及可变轻链CDR3(LCDR3)的组合，其中该组合是：(i)包含SEQIDNO:3的HCDR1、包含SEQIDNO:6的HCDR2、包含SEQIDNO:10的HCDR3、包含SEQIDNO:14的LCDR1、包含SEQIDNO:17的LCDR2、包含SEQIDNO:20的LCDR3。32.如权利要求“X”所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含具有选自下组的氨基酸序列的重链可变结构域(VH)，该组由以下各项组成：SEQIDNO:38、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40，并且任选地包含具有选自下组的氨基酸序列的轻链可变结构域(VL)，该组由以下各项组成：SEQIDNO:51和SEQIDNO:52。33.如权利要求8所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)和轻链可变结构域(VL)的组合，其中该组合选自下组，该组由以下各项组成：(i)包含氨基酸序列SEQIDNO:38的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:51的轻链可变结构域；(ii)包含氨基酸序列SEQIDNO:39的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:51的轻链可变结构域；以及(iii)包含氨基酸序列SEQIDNO:40的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:52的轻链可变结构域。34.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段：a.结合人类CD47，b.阻断SIRPα与人类CD47的结合，c.增加对人类肿瘤细胞的吞噬作用，d.引起人类血红细胞(hRBC)不凝集；并且e.减少了hRBC结合。35.如权利要求34所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段是嵌合抗体或人源化抗体。36.如权利要求34或权利要求35所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中该单克隆抗体或其抗原结合片段与CD47的一种或多种物种同系物进行交叉反应。37.如权利要求34-36所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含可变重链CDR1(HCDR1)、可变重链CDR2(HCDR2)、以及可变重链CDR3(HCDR3)、可变轻链CDR1(LCDR1)、可变轻链CDR2(LCDR2)、以及可变轻链CDR3(LCDR3)的组合，其中该组合是：(i)包含SEQIDNO:3的HCDR1、包含SEQIDNO:6的HCDR2、包含SEQIDNO:10的HCDR3、包含SEQIDNO:14的LCDR1、包含SEQIDNO:17的LCDR2、包含SEQIDNO:20的LCDR3。38.如权利要求8所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，该单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)和轻链可变结构域(VL)的组合，其中该组合是：(i)包含氨基酸序列SEQIDNO:36的重链可变结构域和包含氨基酸序列SEQIDNO:51的轻链可变结构域。39.一种结合CD47的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或抗原结合片段包含可变重链CDR1(HCDR1)、可变重链CDR2(HCDR2)和可变重链CDR3(HCDR3)的组合，其中该组合选自下组，该组由以下各项组成：(i)包含SEQIDNO:1的HCDR1、包含SEQIDNO:4的HCDR2、包含SEQIDNO:7的HCDR3；(ii)包含SEQIDNO:1的HCDR1、包含SEQIDNO:4的HCDR2、包含SEQIDNO:8的HCDR3；(iii)包含SEQIDNO:2的HCDR1、包含SEQIDNO:5的HCDR2、包含SEQIDNO:9的HCDR3；以及(iv)包含SEQIDNO:3的HCDR1、包含SEQIDNO:6的HCDR2、包含SEQIDNO:10的HCDR3。40.如权利要求39所述的单克隆抗体或抗原结合片段，该单克隆抗体或抗原结合片段包含轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含可变轻链CDR3(LCDR3)、可变轻链CDR2(LCDR2)和可变轻链CDR1(LCDR1)的组合，该组合选自由以...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·曼宁，罗宾·普罗，胡安·C·阿尔马格罗，罗伯特·W·卡尔，
申请(专利权)人：安驰肿瘤公司，
类型：发明
国别省市：美国,US