HPLC-CAD测定葡萄糖氯化钠注射液中钠含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种HPLC‑CAD测定葡萄糖氯化钠注射液中钠含量的方法。属于化学检测领域，旨在提供一种测定准确、操作简单的检测方法，该方法依次包括下述步骤：1)供试品溶液的制备：取葡萄糖氯化钠注射液1ml用甲醇定容至1000ml，摇匀，过滤，即得；2)对照品溶液的制备：精密称取氯化钠对照品15g，置于250mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；3)采用高效液相色谱法进行分析。本发明专利技术可替代传统检测方法用于葡萄糖氯化钠注射液中钠含量测定方法。

Determination of sodium content in Glucose and Sodium Chloride Injection by HPLC-CAD

The invention discloses a method for determining sodium content in Glucose and Sodium Chloride Injection by HPLC CAD. In the field of chemical testing, it is designed to provide an accurate and simple method of detection, which in turn includes the following steps: 1) preparation of the solution of the test product: the preparation of the Glucose and Sodium Chloride Injection 1ml with methanol to 1000ml, shake up, filter, and get; 2) the preparation of the control solution: the precision of sodium chloride is called the control of sodium chloride. Sample 15g, placed in 250 mL flask, dissolved in methanol and diluted to the scale, shake well, then get; 3) Analysis by high performance liquid chromatography. The invention can replace the traditional detection method for the determination of sodium content in Glucose and Sodium Chloride Injection.

【技术实现步骤摘要】
HPLC-CAD测定葡萄糖氯化钠注射液中钠含量的方法
本专利技术涉及化学检测领域，尤其是一种HPLC-CAD测定葡萄糖氯化钠注射液中钠含量的方法。
技术介绍
中国药典2010版3.6.2节记录采用硝酸银滴定法测定注射液中的氯化钠的含量，该方法对操作人员专业技能要求高，不同测试人员测试结果存在一定的偏差。现有国标中并未记载HPLC-CAD法测量葡萄糖氯化钠注射液中钠含量的测定方法，即使采用传统的HPLC的测量方法，其线性率在整个测量范围内并不服从严格的线性分布标准。电喷雾检测器(CAD)是目前通用的检测器，与HPLC联用时，HPLC洗脱液经雾化器中氮气的作用而雾化,其中较大的液滴在碰撞器的作用下经废液管流出，较小的溶质(分析物)液滴在室温下干燥，形成溶质颗粒。同时，用于载气的氮气分流形成的第二股氮气流经过电晕式装置(含高压铂金丝电极)形成带正电荷的氮气颗粒，与溶质颗粒反向相遇时经碰撞使溶质颗粒带上正电。它不依赖于分析物的结构，也不需要将分析物电离，只要该物质属于半挥发性或非挥发性化合物就可以被检出，且灵敏度可以达到pg级别，重现性良好，是紫外(UV)、质谱(MS)、示差折光(RI)与蒸发光散射(ELSD)等常用检测器的有力补充。
技术实现思路
针对上述不足，本专利技术旨在提供一种测定准确、操作简单的HPLC-CAD测定葡萄糖氯化钠注射液中钠含量的方法。为了解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案是这样的：一种HPLC-CAD测定葡萄糖氯化钠注射液中钠含量的方法，依次包括下述步骤：1)取葡萄糖氯化钠注射液1ml用甲醇定容至1000ml，摇匀，过滤，得供试品溶液；2)对照品溶液的制备：精密称取氯化钠对照品15g，置于250mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；3)采用高效液相色谱法进行分析，参数设置如下：色谱柱：ThermoMixed-ModeHilic，2.1×150mm，1.3μm；流速：0.3mL/min；柱温：40℃；进样量：10μL；流动相：50mmol/L醋酸铵-乙腈。进一步的，所述的高效液相色谱仪的型号为：Thermo-U3000高效液相色谱仪，所述的Thermo-U3000高效液相色谱仪附带CoronaUltra电喷雾检测器。进一步的，所述的流动相中50mmol/L醋酸铵-乙腈的体积比为15～80：20～85。进一步的，所述的流动相采用梯度洗脱的方法加入，其中具体的参数如下：洗脱总时间为10分钟；第0-2分钟，流动相中50mmol/L醋酸铵-乙腈的体积比为15：85；第4-5分钟，流动相中50mmol/L醋酸铵-乙腈的体积比为80：20；第6-10分钟，流动相中50mmol/L醋酸铵-乙腈的体积比为15：85。进一步的，所述的供试品溶液的制备需过0.45μm滤膜。本专利技术的有益效果如下：采用上述方案可以测量葡萄糖氯化钠注射液中氯的浓度，避免了国标测试的人员操作和环境因素影响，同时HPLC结合电喷雾检测器(CAD)，可以保证在整个浓度范围内符合线性分布的规律，避免了极低浓度下的传统HPLC测试方法带来的不准确性。CoronaUltra电喷雾检测器(CAD)技术的工作原理是将分析物转化成溶质颗粒，颗粒的大小随着被分析物的含量而增加；溶质颗粒与带正电荷的氮气颗粒相撞，电荷随之转移到颗粒上(溶质颗粒越大，带电越多)；溶质颗粒把它们的电荷转移给收集器，通过高灵敏度的静电检测计测出溶质颗粒的带电量，由此产生的信号电流与溶质的含量成正比；检测结果与分析物颗粒有关，信号电流与样品中分析物的质量成正比。上述测试方法采用梯度洗脱的方式进行洗脱，能够在较宽的范围内实现待测成分的有效分离，同时，采用CoronaUltra电喷雾检测器能够实现极低浓度时的准确测量，克服了传统测试方法的人工操作带来的不稳定性。具体实施方法下面结合具体实施例对权利要求书做进一步说明，但不构成对本专利技术的任何限制，任何在对本专利技术做有限次修改所得到的技术方案仍然属于本专利技术所要保护的范围。实施例11仪器与试剂Thermo-U3000高效液相色谱仪(美国热电公司，附带CoronaUltra电喷雾检测器)，色谱柱为ThermoMixed-ModeHilic(2.1×150mm，1.3μm)。醋酸铵(分析纯，上海阿拉丁生化科技股份有限公司)；氯化钠对照品(批号：GBW(E)060024，中国计量科学研究院，含量＝99.99％)；250ml葡萄糖氯化钠注射液(批号：E131102K2，湖南科伦制药有限公司)；250ml葡萄糖氯化钠注射液(批号：131228804，安徽双鹤药业有限责任公司)；250ml葡萄糖氯化钠注射液(批号：H13121609，广西裕源药业有限公司)；均由医院提供；乙腈(色谱纯，美国Sigma-aldrich公司)；提取用甲醇为超纯甲醇。2.方法2.1供试品溶液的制备取葡萄糖氯化钠注射液1ml用甲醇定容至1000ml，摇匀，过滤，滤液过0.45μm滤膜，得供试品溶液。2.2对照品溶液的制备参照《中国药典》2015年版二部中葡萄糖氯化钠注射液规格(7)项下配制，取氯化钠约15g，精密称定，置于250mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。2.3线性配制精密移取对照品贮备液1ml置于10ml量瓶中，加超纯甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，再精密移取各1ml分别置于100ml、50ml、25ml、10ml、5ml量瓶中，加超纯甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，即得。制成表1所示线性溶液：表12.4色谱条件流速：0.3mL/min，柱温40℃，进样量10μL，流动相为A(50mmol/L醋酸铵)：B(乙腈)。所述的流动相采用梯度洗脱的方法加入，其中具体的参数如下：洗脱总时间为10分钟；第0-2分钟，流动相中50mmol/L醋酸铵-乙腈的体积比为15：85；第4-5分钟，流动相中50mmol/L醋酸铵-乙腈的体积比为80：20；第6-10分钟，流动相中50mmol/L醋酸铵-乙腈的体积比为15：85。3.结果3.1专属性试验取适量超纯甲醇，按“2.4”项下色谱条件上机检测，表明超纯甲醇中ClO-对检测无干扰。3.2结果及线性关系按“2.4”项下色谱条件，Cl-不受溶剂超纯甲醇中杂质ClO-等干扰。精密量取供试品溶液和对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，以对照品浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，进行线性回归。葡萄糖在0.5～1.0mg/ml范围内与峰面积线性关系良好，回归方程Y＝125.8386X+1.2101(r＝0.9993)；氯、钠在0.09～1.80mg/ml范围内与峰面积线性关系良好，回归方程分别为Y＝33.6836X+0.6429(r＝0.9999)、Y＝17.3087X+0.0395(r＝0.9999)。3.3精密度试验精密精取同一对照品溶液，连续进样6次，记录峰面积，计算Cl-的RSD，为0.25％。结果表明，仪器精密度良好。3.4重复性试验取样品6份，按“2.1”供试品方法制备，测定峰面积。计算6份样品中Cl-的平均含量，为12.51g/250ml，RSD为1.50％。结果表明，本方法重复性良好。3.5稳定性试验取样品，在0、4、8、12、16、20、24h内进样7次，测定峰面积，计算样品中不同时间点的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种HPLC‑CAD测定葡萄糖氯化钠注射液中钠含量的方法，其特征在于，依次包括下述步骤：1)取葡萄糖氯化钠注射液1ml用甲醇定容至1000ml，摇匀，过滤，得供试品溶液；2)对照品溶液的制备：精密称取氯化钠对照品15g，置于250mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；3)采用高效液相色谱法进行分析。

【技术特征摘要】
1.一种HPLC-CAD测定葡萄糖氯化钠注射液中钠含量的方法，其特征在于，依次包括下述步骤：1)取葡萄糖氯化钠注射液1ml用甲醇定容至1000ml，摇匀，过滤，得供试品溶液；2)对照品溶液的制备：精密称取氯化钠对照品15g，置于250mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；3)采用高效液相色谱法进行分析。2.根据权利要求1所述的HPLC-CAD测定葡萄糖氯化钠注射液中钠含量的方法，其特征在于，步骤2所述的高效液相色谱法的检测参数如下：色谱柱：ThermoMixed-ModeHilic，2.1×150mm，1.3μm；流速：0.3mL/min；柱温：40℃；进样量：10μL；流动相：50mmol/L醋酸铵-乙腈。3.根据权利要求2所述的HPLC-CAD测定葡萄糖氯化钠注射液中钠含量的方法，其特征在于，所述的高效液相色谱仪的型号为：Thermo-U3000高效液相色谱...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈学松，钟水桥，梁峰，
申请(专利权)人：广西壮族自治区梧州食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：广西,45