一种杀线虫制剂制造技术

本发明专利技术属于农药领域，具体涉及一种含有阿维菌素和长枝木霉菌的杀线虫制剂。该制剂由阿维菌素溶液和长枝木霉菌(T.longibrachiatum)菌液组成，能够显著提高对小麦禾谷孢囊线虫毒杀作用，而且具有缓释作用，能够延长农药的持效期，该制剂无污染，与环境相容性好，生产成本低，线虫不易产生抗药性，具有扩大防治谱和协同增效等作用。

A nematidal agent

The invention belongs to the field of pesticide, and specifically relates to a nematode killing agent containing abamectin and Trichoderma long. The preparation was composed of abamectin solution and Mycobacterium Long Branch (T.longibrachiatum) bacteria, which could significantly increase the toxicity to wheat cereal cyst nematode, and it has a sustained release effect and can prolong the duration of pesticide retention. The preparation has no pollution, good environmental compatibility, low production cost, and no resistance to nematodes. It has the function of enlarging the control spectrum and synergistic effect.

【技术实现步骤摘要】
一种杀线虫制剂
本专利技术属于农药领域，具体涉及一种含有阿维菌素和长枝木霉菌的杀线虫制剂。
技术介绍
小麦禾谷孢囊线虫(Heteroderaavenae)属于植物固着性寄生线虫，是近年来在我国以及世界小麦主要产区广泛发生的一种病害。该线虫自1908年在英国首次发现以来，目前已经有32个国家报道了该病害，如仅在澳大利亚的维多利亚和南澳大利亚地区，小麦受害面积达200×104hm2，导致粮食减产23％～50％，严重时减产73％～89％，每年造成的经济损失可达7000万美元。在欧洲主要禾谷作物种植区，50％以上的田地受到小麦禾谷孢囊线虫的侵染和危害。在我国，小麦禾谷孢囊线虫于1989年在湖北首次发现，目前已证实该线虫广泛分布于河北、河南、北京、湖北、甘肃和安徽等省市，危害小麦面积达百万公顷以上，已成为我国小麦生产中的一个新问题。目前，对植物线虫病害的防治主要采用化学防治如呋喃丹、地线磷、米乐尔和好年冬等，防治效果可达90％以上，但其具有土壤残留高和毒性大，以及危害土壤中有益微生物等缺陷，并且随着人们对化学药剂危害的认识和环保意识的不断增强，化学农药的使用受到了限制。因此，植物病原线虫生物防治越来越受到广泛的关注，尤其利用寄生性真菌防治小麦禾谷孢囊线虫病害，是目前国内外线虫生物防治的重点和热点之一。木霉菌(Trichodermasp.)是一类广泛分布于土壤中的习居菌。根据张树武等研究表明长枝木霉菌(T.longibrachiatum)对小麦禾谷孢囊线虫具有明显的寄生和致死作用。另外，阿维菌素是一种神经毒剂类生物农药，对农业上许多害虫包括植物寄生线虫具有一定的防治效果，但是在农业生产中单一使用阿维菌素容易引起小麦禾谷孢囊线虫的抗药性和效果不稳定，而且不同生物制剂与其混合配制可以弥补单剂的不足，能够起到扩大防治对象、延缓线虫抗药性和提高防治效果等作用，并且该制剂无污染，与环境相容性好，生产成本低。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术提供了一种杀线虫制剂，所述的制剂由阿维菌素溶液和长枝木霉菌菌液组成，其中阿维菌素溶液与长枝木霉菌菌液的体积比为1:1-3。进一步地，所述的阿维菌素溶液浓度为0.1-0.5μg·mL-1，长枝木霉菌菌液中活菌浓度为2×107cfu·mL-1。进一步地，所述的阿维菌素溶液浓度为0.1μg·mL-1。进一步地，所述的阿维菌素溶液浓度为0.2μg·mL-1。进一步地，所述的阿维菌素溶液浓度为0.3μg·mL-1。进一步地，所述的阿维菌素溶液浓度为0.4μg·mL-1。进一步地，所述的阿维菌素溶液浓度为0.5μg·mL-1。进一步地，所述的线虫为小麦禾谷孢囊线虫。本专利技术的有益效果在于：①不仅能够显著提高对小麦禾谷孢囊线虫毒杀作用，而且能够延长生物农药的持效期。②与环境相容性好，生产成本低，线虫不易产生抗药性，且具有扩大防治谱和协同增效等作用。具体实施例下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术的一部分，而不是专利技术的全部。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1单一长枝木霉、单一阿维菌素、长枝木霉与阿维菌素混剂对2龄幼虫的毒杀作用一、试验材料1、供试菌株：长枝木霉菌株由甘肃农业大学植物病理学实验室提供，并于2016年11月14日保藏于中国科学院微生物研究所，保藏号为CGMCCNo.13183，保藏名称：长枝木霉TrichodermaLongibrachiatum。2、供试土样：病田土样于2015年7月采自河南省小麦禾谷孢囊线虫发生较严重的地块。五点取样法采集土样，取土时将表层干土去除，取0～20cm层的土壤，将土样装入自封袋，带回实验室备用。3、供试药剂：有效成分含量为1.8％的阿维菌素，剂型为乳油，浙江世佳科技有限公司生产。二、试验步骤及方法1、小麦禾谷孢囊线虫2龄幼虫的分离孢囊的分离采用“漂浮法”，向土样中加入适量的自来水搅拌均匀，使土样完全溶解，静置2～3min后，把悬浮液倒入嵌在65目网筛中的25目网筛内，如此重复操作3次。倾去上层25目网筛上的残余物，剩余物再用缓慢水流收集在干净的烧杯中，并弃去下层沉淀的泥沙，把上层样品倒入垫有双层擦镜纸的漏斗内，然后把双层擦镜纸和过滤后的剩余物一并移入洗净的玻璃培养皿中，并在解剖镜下用镊子或自制的竹签从中挑取新鲜而饱满的棕色孢囊，置于4℃冰箱备用。将经1％NaClO消毒后的孢囊放入垫有2层擦镜纸的线虫分离器中，在20℃下孵化13～22d，即得到大量的2龄幼虫，并结合孢囊和2龄幼虫的形态特征鉴定为小麦禾谷孢囊线虫。然后，采用计数皿对2龄幼虫进行计数，通过配制使2龄幼虫悬浮液浓度为200条·mL-1。2、长枝木霉分生孢子菌液的制备：向在PDA平板上培养6d的长枝木霉菌中加入5mL无菌水充分震荡，使长枝木霉菌的分生孢子脱落在无菌水中，收集得到分生孢子菌液的原液，并利用血球计数板计数，稀释至2.0×107cfu·mL-1备用。3、阿维菌素溶液配制：经无菌水分别配制浓度为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg·mL-1阿维菌素溶液备用。4、长枝木霉孢子菌液与阿维菌素溶液混剂配制：将浓度为2.0×107cfu·mL-1的长枝木霉孢子菌液和上述5个浓度梯度的阿维菌素溶液分别按体积比为1:1、2:1、3:1混合，依次标记：混剂1组、混剂2组、混剂3组，并充分震荡使其混合均匀。5、长枝木霉与阿维菌素混剂对2龄幼虫毒杀作用的测定在灭菌的96孔细胞培养板中，每孔加入10μL浓度为200条·mL-1的2龄幼虫悬浮液和90μL长枝木霉与阿维菌素混合液，每个处理16个重复，以相同浓度的单一长枝木霉和单一阿维菌素作为阳性对照，无菌水作为阴性对照。试验在25℃下进行，并每隔24h在显微镜下观察一次线虫的死亡虫数。线虫呈僵直不动为死虫，线虫呈弯曲蠕动状态为活虫，记录处理中2龄幼虫死亡数量。计算其校正死亡率、致死中量及进行方差分析。死亡率(％)＝(死亡2龄幼虫数量/供试2龄幼虫数量)×100校正死亡率(％)＝(处理死亡率－对照死亡率)/(1－对照死亡率)×1006、数据处理采用Excel2007和SPSS16.0软件对数据进行统计分析，并采用DPS软件计算LC50。三、试验结果与分析表1单一长枝木霉菌对2龄幼虫的毒杀作用单一长枝木霉对2龄幼虫具有显著地毒杀效果：由表1可以看出，使用浓度为2.0×107cfu·mL-1的长枝木霉分生孢子菌液在24h后，2龄幼虫的死亡率和校正死亡率分别为57.14％和57.14％；48h后2龄幼虫的死亡率和校正死亡率分别为71.43％和71.43％；72h后2龄幼虫的死亡率和校正死亡率分别为81.03％和79.22％。可以看出长枝木霉分生孢子菌液对小麦禾谷孢囊线虫具有显著的毒杀作用，而且毒杀效果随着处理时间的增加而增强。表2单一阿维菌素对2龄幼虫的毒杀作用单一阿维菌素溶液对2龄幼虫的毒杀作用：由表2可以看出随着浓度的增大和处理时间的增长，2龄幼虫的死亡率逐渐增大。最高浓度为0.5μg·mL-1的阿维菌素在处理2龄幼虫24h后，2龄幼虫的死亡率和校正死亡率分别为45.77％和45.77％；48h后2龄幼虫的死亡率和校正死亡率分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种杀线虫制剂，其特征在于，所述的制剂由阿维菌素溶液和长枝木霉菌(T.longibrachiatum)菌液组成，其中阿维菌素溶液与长枝木霉菌菌液的体积比为1:1‑3。

【技术特征摘要】
1.一种杀线虫制剂，其特征在于，所述的制剂由阿维菌素溶液和长枝木霉菌(T.longibrachiatum)菌液组成，其中阿维菌素溶液与长枝木霉菌菌液的体积比为1:1-3。2.如权利要求1所述的一种杀线虫制剂，其特征在于，所述的阿维菌素溶液浓度为0.1-0.5μg·mL-1，长枝木霉菌(T.longibrachiatum)菌液中活菌浓度为2×107cfu·mL-1。3.如权利要求2所述的一种杀线虫制剂，其特征在于，所述的阿维菌素溶液浓度为0.1μg·mL-1。4....

【专利技术属性】
技术研发人员：张树武，徐秉良，毛维兴，
申请(专利权)人：甘肃农业大学，
类型：发明
国别省市：甘肃,62