一种抗木霉菌白色金针菇菌株及其筛选方法和栽培料配方组成比例

本发明专利技术涉及一种抗木霉菌白色金针菇菌株，其分类名称为金针菇(Flammulina velutipes)，并已于2017年9月20日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO：14560。本发明专利技术还公开了一种抗木霉菌白色金针菇菌株的筛选方法以及抗木霉菌白色金针菇子实体的栽培料配方。

【技术实现步骤摘要】
一种抗木霉菌白色金针菇菌株及其筛选方法和栽培料配方
本专利技术涉及微生物
，特别是涉及一种抗木霉菌白色金针菇菌株及其筛选方法和栽培料配方。
技术介绍
金针菇(Flammulinavelutipes)又名构菌、冬菇、毛柄金钱菌，富含蛋白质、多糖、氨基酸和膳食纤维等多种营养物质，且脂肪含量较低，具有抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、护肝、排除重金属离子、降低胆固醇、预防高血压等多种功能，经常食用可明显提高人体免疫力。金针菇品种按照子实体颜色分为黄色金针菇和白色金针菇。白色金针菇因菇体质地鲜嫩柔软、外观色泽佳、产量高等特点成为金针菇工厂化栽培主栽品种，但该品种抗病性较差，其中木霉菌是最主要的真菌病害之一，是夏季生产中常见且危害严重的杂菌。木霉菌广泛分布在自然界中，如土壤、肥料、植物残体上，且木霉菌生长快、活力强，凡适合于金针菇生长的环境条件都适合木霉发生发展。金针菇栽培料被木霉侵染后，2-3天可萌发成白色、纤细、绒毛状的菌丝在栽培料中迅速定植、蔓延和扩散，几天之后培养料变为淡绿色至深绿色，使菌丝发育受到严重影响，严重时菌丝不能生长，子实体被木霉菌丝包裹而变软，导致死亡，即使长出少量的子实体也会腐败而失去食用价值。
技术实现思路
针对金针菇受木霉菌污染后严重影响菌丝生长甚至造成子实体死亡的技术问题，本专利技术提供一种抗木霉菌白色金针菇菌株。以及，本专利技术还提供一种抗木霉白色金针菇菌株的筛选方法。以及，本专利技术还提供通过培养所述抗木霉白色金针菇菌株得到的孢子、菌丝体、子实体。以及，本专利技术还提供一种上述抗木霉菌白色金针菇子实体的栽培料配方。为达到上述专利技术目的，本专利技术实施例采用了如下的技术方案：一种抗木霉白色金针菇菌株，其分类名称为金针菇(Flammulinavelutipes)，并已于2017年9月20日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCCNO：14560；保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本专利技术所提供的抗木霉白色金针菇菌种能够抵抗木霉菌的污染，在木霉菌存在的情况下依然生长良好，避免了木霉菌使金针菇菌丝生长甚至子实体死亡的情况。以及，上述抗木霉菌白色金针菇菌株的筛选方法，包括以下步骤：步骤a、将白色金针菇菌株SH9作为亲本收集孢子，进行多孢杂交，挑选具有锁状联合的双核菌丝；进行平板出菇，得到出菇的金针菇；步骤b、用对峙培养法对所述双核菌丝进行抗木霉活性测定，筛选出抗木霉白色金针菇菌株。本专利技术通过对峙培养法能够获得对木霉菌具有抗病性的金针菇菌株。以及，一种抗木霉菌白色金针菇孢子，该孢子为通过培养上述抗木霉菌白色金针菇菌株得到的孢子。以及，一种抗木霉菌白色金针菇菌丝体，该菌丝体为通过培养上述抗木霉菌白色金针菇菌株得到的菌丝体。以及，一种抗木霉菌白色金针菇子实体，该子实体为通过培养上述抗木霉将白色金针菇菌株得到的子实体。以及，上述抗木霉菌白色金针菇菌株子实体的栽培料配方，所述栽培料包括下列重量百分比的以下成分：棉籽皮40～45％，麸皮15～20％，核桃木屑30～35％，豆饼粉3～7％，石膏1～3％。该栽培料中不含动物性成分，可减少栽培料的污染率和重金属含量，且该栽培料中石膏含量较低，不会增加栽培料pH，更适宜金针菇生长。该栽培料中不含糖份，麸皮中的碳水化合物是金针菇生命活动的能源和构成细胞的主要成分，与糖类材料相比，不易变质，可降低栽培时的污染率，并含有纤维素、维生素，能够为金针菇提供更丰富的营养；豆饼粉蛋白含量高，有机氮不需要转化，更容易吸收，豆饼粉和麸皮共同为金针菇生长提供了氮元素。核桃枝多被核桃种植方随意丢弃，既存在巨大的安全隐患，又是一种严重的资源浪费，本专利技术以核桃枝屑作为栽培料的成分之一，将核桃枝得以高效利用，并利用核桃枝中的营养成分来促进金针菇的生长，适用于抗木霉菌白色金针菇的工厂化栽培。本方案经过合理的配方比例，使配方中的碳、氮比例更适宜金针菇生长。进一步地，所述栽培料包括下列重量百分比的以下成分：棉籽皮42％，麸皮18％，核桃木屑33％，豆饼粉5％，石膏2％。进一步地，所述核桃木屑为含水量＜15％的干核桃枝粉碎成3～5mm所得。附图说明图1为金针菇JK501菌株与亲本SH9菌株的菌落形态及显微镜观察图；图2为金针菇JK501菌株与亲本SH9菌株的平板对峙试验；图3为金针菇JK501菌株与亲本SH9菌株的漆酶活性测定；图4为金针菇JK501菌株与亲本SH9菌株的羧甲基纤维素酶活性测定；图5为金针菇JK501菌株与亲本SH9菌株的半纤维素酶活性测定；图6为金针菇JK501菌株与亲本SH9菌株的淀粉酶活性测定；图7为金针菇JK501菌株与亲本SH9菌株的出菇试验；图8为基于ITS序列构建的金针菇JK501菌株的系统发育树；图9为金针菇JK501菌株与其他菌株的引物18和22扩增结果；图10为金针菇JK501菌株与其他菌株的引物24和26扩增结果；图11为金针菇JK501菌株与其他菌株的引物12和25扩增结果；图12为金针菇JK501菌株与其他菌株的引物1和17扩增结果；图13为金针菇JK501菌株与其他菌株的引物19和23扩增结果；附图说明11亲本SH9菌株的菌落形态12金针菇JK501菌株的菌落形态13亲本SH9菌株的显微镜观察图14金针菇JK501菌株的显微镜观察图21亲本SH9菌株的平板对峙试验菌落形态22金针菇JK501菌株的平板对峙试验菌落形态具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例所用培养基：PDA培养基(1L)：去皮马铃薯200g，切成小块煮沸半小时，然后纱布过滤，加入葡萄糖20g及琼脂15g，分装于500mL三角瓶中灭菌待用。液体PDA培养基(1L)：去皮马铃薯200g，切成小块煮沸半小时，然后纱布过滤，加入葡萄糖20g，分装于500mL三角瓶中灭菌待用。1、金针菇抗性菌株的筛选(1)金针菇孢子悬液的制备以收集白色金针菇SH9孢子，采用无菌水进行梯度稀释成1×103个/mL，吸取孢子悬液100μL涂布在PDA培养基上，进行多孢杂交。25℃恒温培养10d后挑取不同部位的单菌落，显微镜观察，挑选具有锁状联合的双核菌丝，命名为JK501菌株。如图1所示，亲本SH9菌丝疏松，有分生孢子，筛选出的菌株JK501菌丝浓密，生长旺盛。测量菌落直径，计算菌株生长速度，其中JK501菌株的生长速度为9.66mm/d，生长速度最快，亲本SH9的生长速度为8.385mm/d。显微镜观察菌丝形态，可以看出筛选出的菌株JK501菌丝更粗壮，整齐。待菌丝长满，30d后平板出菇；选择成功出菇的金针菇，在菌柄和菌盖的交接处进行组织分离。(2)金针菇抗性菌株的筛选采用平板对峙法对组织分离后获得的金针菇进行抗木霉活性的测定。PDA培养基活化木霉菌株，25℃培养满皿后，用直径为0.5cm的打孔器打孔制备木霉菌菌饼。使用直径90mm的培养皿，每皿用定量蠕动泵定量加入30mLPDA培养基。将JK501菌株和亲本SH9菌株接种到距离中心2cm处，25℃培养3d后，对称地接入木霉菌饼，在25℃条件下培养3d，观察记录菌丝生长及拮抗情况，菌丝生长半径。结果如图本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗木霉菌白色金针菇菌株，其分类名称为金针菇(Flammulina velutipes)，并已于2017年9月20日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO：14560。

【技术特征摘要】
1.一种抗木霉菌白色金针菇菌株，其分类名称为金针菇(Flammulinavelutipes)，并已于2017年9月20日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCCNO：14560。2.一种权利要求1所述抗木霉菌白色金针菇菌株的筛选方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤a、将白色金针菇菌株SH9作为亲本收集孢子，进行多孢杂交，挑选具有锁状联合的双核菌丝；进行平板出菇，得到出菇的金针菇；步骤b、用对峙培养法对所述双核菌丝进行抗木霉活性测定，筛选出抗木霉白色金针菇菌株。3.一种抗木霉菌白色金针菇孢子，其特征在于，所述抗木霉白色金针菇孢子为通过培养权利要求1所述菌株得到的孢子。4.一种抗木霉菌白色金针菇菌丝体，其特征在于，所述抗木霉白色金针菇菌丝体...

【专利技术属性】
技术研发人员：李书生，刘昆昂，张根伟，马宏，尹淑丽，刘振国，刘萌，付艳菊，
申请(专利权)人：河北省科学院生物研究所，
类型：发明
国别省市：河北,13