小花清风藤提取物及其提取方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种小花清风藤提取物及其提取方法和应用，该提取物是以小花清风藤的茎、叶、茎叶自然混合物中的任意一种为原料，采用水、50%乙醇及95%乙醇中的任意一种为溶剂进行提取得到的。该小花清风藤提取物可用于制备保肝护肝药物或治疗肝细胞L‑O2损伤的药物。小花清风藤提取物能降低血清中TC、TG含量，升高肝组织中SOD和GSH‑Px水平，降低肝组织中ALT、AST水平及MDA含量；提高L‑O2细胞的成活率，降低细胞培养液中LDH和ALT、AST水平，升高L‑O2细胞内SOD和GSH‑Px水平，降低细胞内MDA含量。其具有毒副作用小、疗效较好的优势，值得开发应用。

Extraction and application of the extract of the Chinese herb

The present invention discloses a flower extract and its extraction method and its application. The extract is extracted from any kind of natural mixture of stem, leaf and stem and leaf of vane. The extract is extracted by any kind of solvent in water, 50% ethanol and 95% ethanol. This flower extract can be used to prepare medicine for protecting liver and liver or for treating L O2 damage in liver cells. The extract of herb extract can reduce the content of TC and TG in serum, increase the level of SOD and GSH Px in liver tissue, reduce the level of ALT and AST and the content of MDA in liver tissue, improve the survival rate of L O2 cells, reduce LDH and ALT, and reduce the levels of LDH and ALT, and reduce the intracellular content. It has advantages of small toxic side effects and good curative effect, and is worthy of development and application.

【技术实现步骤摘要】
小花清风藤提取物及其提取方法和应用
本专利技术属于医药
，具体涉及小花清风藤不同部位和溶剂提取物的保肝护肝应用。
技术介绍
小花清风藤(SabiaparvifloraWall.exRoxb.)是清风藤科(Sabiaceae)清风藤属(Sabia.)的常绿木质攀援缠绕藤本。入药部位包括根、茎、叶，其性味苦，微寒，归肝经。具有清热利湿、利胆、止血之功，为布依族、苗族的民间用药，民间俗称“小黄药”、“黄肿药”、“黄眼药”、“雅希强(布依语)”。具有治疗风湿关节痛、腰痛，止血止痛的作用，对甲型和乙型病毒性肝炎疗效良好。据文献报道，具有抗病毒性肝炎的小花清风藤的主要化学成分为五环三萜类化合物、生物碱类化合物和其他类化合物。五环三萜类化合物由6个异戊二烯结构单元联结而成，是小花清风藤化学成分中种类最多的化合物，文献报道小花清风藤地上部分(1)五环三萜类化合物有19个，均以游离状态存在。其数目类型较多，但主要的结构母核有四种，分别为齐墩果烷型(oleanane)，乌苏烷型(ursane)，羽扇豆烷型(lupane)和木栓烷型(friedelane)。其中①齐墩果烷型五环三萜类化合物有：1α,2β-二羟基齐墩果酸、1α,2α,2β-三羟基齐墩果酸、齐墩果酸、3α-羟基齐墩果酸、阿江三帖酸、3-氧化齐墩果酸、古柯三萜二醇、反山楂酸、3β-羟基-1-齐墩果酸、3-氧化齐墩果酸、3-oxo-hydroxytaraxastare、20-hydroxy-lupan-3-one；②乌苏烷型五环三萜类化合物有：2β,2β,19α-三羟基-乌苏酸、木栓酮；③羽扇豆烷型五环三萜类化合物有：羽扇豆醇、羽扇豆酸、羽扇豆-3-酮、桦木酸、桦木酸甲酯；④木栓烷型五环三萜类化合物有：木栓酮。(2)小花清风藤中生物碱类化合物种类很少，仅有5种共9个，包括吡咯类生物碱和异喹啉类生物碱，①吡咯类生物碱(pyrrrolidines)主要由吡咯或四氢吡咯衍生而成，吡咯环类生物碱为脱美叶绿甲酯酸a；②异喹啉类生物碱包括7个苄基四氢异喹啉类和1个苯酞类四氢异喹啉类生物碱，其中苄基四氢异喹啉类生物碱按骨架分为3种，苄基四氢异喹啉类、阿朴菲类和普罗托品类。(3)其他类化合物主要有槲皮素、二十五烷酸、二十九烷醇、β-谷甾醇、棕榈酸、9-芴酮等。肝脏在调节各种生理学功能的过程中起到重要的作用。药物滥用、酒精成瘾以及长期暴露于有毒环境都会造成各种肝脏疾病。由于能够刺激肝功能，修复受损肝细胞这类有效的预防手段和药物治疗的缺乏，肝脏疾病已成为全球性的高死亡率疾病。全国多中心急性药物性肝损伤住院病历调查分析结果显示，药物性肝损伤在我国的发病率呈逐年增加趋势，药物性肝损伤发病率占黄疸住院患者的2％～5％，占爆发性肝功能衰竭患者15％～30％，占非病毒性慢性肝炎的20％～50％。肝损伤主要是在短期内由多种原因引起的肝功能突发性异常的疾病，医学科学国际组织委员会表明，肝损伤的确诊标准为肝功能异常持续时间不超过3个月。肝损伤发展至晚期会表现为终末期肝损伤，两者是一个连续渐进的生理病理过程，终末期肝损伤在临床中的表现为肝细胞迅速损害并迅速恶化，病死率极高。为预防急性肝损伤的发生及恶化，在了解肝损伤发病原因的基础上，重中之重是要研发治疗肝脏疾病的有效药物，而近年来中药对于肝损伤的治疗成为了研究热点。
技术实现思路
本专利技术专利技术人经过广泛深入的文献调研和深入布依族、苗族了解，发现小花清风藤提取物可显著改善肝炎患者症状，降低由肝炎引起的黄疸和转氨酶升高体征的效果明显，对重症肝炎亦有较好的疗效；可降低四氯化碳、扑热息痛诱导的肝损伤模型小鼠血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶的活性；可降低四氯化碳和D-半乳糖致小鼠急性肝损伤小鼠血清中的谷丙转氨酶、谷草转氨酶和丙二醛水平和肝脏指数，升高血清中超氧化物歧化酶含量。当前大量的临床和实验研究发现小花清风藤对病毒性肝炎、急性肝损伤具有比较好的疗效，并初步证实与其中的五环三萜类化合物、生物碱类化合物和其他类化合物有关。但是选择茎叶的何种部位比较好，保肝护肝作用与其中的何种成分关系比较密切等未见报道。本专利技术采用这样的技术方案来实现：一种小花清风藤提取物，其是以小花清风藤的茎、叶、茎叶自然混合物中的任意一种为原料，采用水、50％乙醇及95％乙醇中的任意一种为溶剂进行提取得到的提取物。本专利技术还涉及所述小花清风藤提取物的提取方法，包括以下步骤：1)将小花清风藤的茎、叶或者茎叶自然混合物干燥至恒重，然后粉碎过筛；2)将步骤1)的得到的物料加入水、50％乙醇或95％乙醇作为溶剂进行提取，提取完后过滤，收集滤液；其中50％乙醇或95％乙醇均为质量百分数。3)步骤2)收集到的滤液，回收溶剂后，经减压浓缩，即得小花清风藤提取物的浸膏。进一步地，所述步骤1)中，采用鼓风箱进行干燥，干燥温度在40-50℃。进一步地，所述步骤2)中，溶剂与小花清风藤物料的料液体积比为1:15-30；提取时，在30-60℃超声1-3次，每次30-90分钟。本专利技术还涉及所述的小花清风藤提取物或者采用上述方法得到的小花清风藤提取物在制备保肝护肝药物中的应用。本专利技术还涉及所述的小花清风藤提取物或者采用上述方法得到的小花清风藤提取物在制备治疗肝细胞L-O2损伤药物中的应用。进一步地，所述的应用中，小花清风藤提取物能降低血清中TC、TG含量，升高肝组织中SOD和GSH-Px水平，降低肝组织中ALT、AST水平及MDA含量。更进一步地，小花清风藤提取物提高L-O2细胞的成活率，降低细胞培养液中LDH和ALT、AST水平，升高L-O2细胞内SOD和GSH-Px水平，降低细胞内MDA含量。本专利技术提取得到的小花清风藤茎、叶、茎叶自然混合物水提物、50％乙醇提取物和95％的乙醇提取物在四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤、酒精致小鼠急性肝损伤及CCl4致肝细胞L-O2损伤模型上实验，表明它们对多种不同类型的肝损伤具有较好的治疗作用。本专利技术的有益效果本专利技术提供了一种从布依族、苗族药物---小花清风藤中提取得到的小花清风藤茎、叶、茎叶自然混合物水提物、50％乙醇提取物和95％的乙醇提取物，研究显示小花清风藤茎、叶、茎叶自然混合物水提物、50％乙醇提取物和95％的乙醇提取物对CCl4/酒精诱导的肝损伤，以及CCl4诱导的肝细胞L-O2损伤均具有较好的治疗作用，能减轻CCl4/酒精对肝脏的脂质过氧化损伤，降低血清中TC、TG含量，升高肝组织中SOD和GSH-Px水平，降低肝组织中ALT、AST水平及MDA含量，从而减轻CCl4/酒精对肝组织氧化损伤，改善肝脏的组织病理学形态，保护肝细胞并恢复肝功能；小花清风藤提取物可提高L-O2细胞的成活率，降低细胞培养液中LDH和ALT、AST水平，升高L-O2细胞内SOD和GSH-Px水平，降低细胞内MDA含量，其可能作用机制是通过增强SOD和GSH-Px对活性氧簇的清除能力，降低脂质过氧化产物MDA含量，从而减轻CCl4对L-O2细胞氧化损伤，保护肝细胞并恢复肝功能。因此，小花清风藤具有毒副作用小、疗效较好的优势，值得开发应用。附图说明图1为小花清风藤提取图；图2小花清风藤不同药用部位的水提取物对CCl4致小鼠急性肝损伤模型肝组织病理学的影响(A：正常组，B：模型组，C：水飞蓟素组本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种小花清风藤提取物，其特征在于，其是以小花清风藤的茎、叶、茎叶自然混合物中的任意一种为原料，采用水、50%乙醇及95%乙醇中的任意一种为溶剂进行提取得到的提取物。

【技术特征摘要】
1.一种小花清风藤提取物，其特征在于，其是以小花清风藤的茎、叶、茎叶自然混合物中的任意一种为原料，采用水、50%乙醇及95%乙醇中的任意一种为溶剂进行提取得到的提取物。2.权利要求1所述小花清风藤提取物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将小花清风藤的茎、叶或者茎叶自然混合物干燥至恒重，然后粉碎过筛；2）将步骤1）的得到的物料加入水、50%乙醇或95%乙醇作为溶剂进行提取，提取完后过滤，收集滤液；3）步骤2）收集到的滤液，回收溶剂后，经减压浓缩，即得小花清风藤提取物的浸膏。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤1）中，采用鼓风箱进行干燥，干燥温度在40-50℃。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤2）中，溶剂与小花清风藤物料的料液体积比为...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺海波，李玉玲，邹坤，李建桥，胡建忠，李蓉，殷丽强，汪鋆植，
申请(专利权)人：三峡大学，水利部沙棘开发管理中心水利部水土保持植物开发管理中心，
类型：发明
国别省市：湖北,42