一种白花蛇舌草初代培养基及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种白花蛇舌草初代培养基，培养基包括大量元素组分、微量元素组分、铁盐组分、有机物组分、肌醇、蔗糖和琼脂粉；大量元素组分包括：硝酸钾、硝酸铵、二水氯化钙、七水硫酸镁和磷酸二氢钾；微量元素组分包括：碘化钾、硼酸、四水硫酸锰、七水硫酸锌、钼酸钠、五水硫酸铜和氯化钴；铁盐组分包括：硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠；有机物组分包括：烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素和甘氨酸。把白花蛇舌草种子置于上述培养基中，在适当的条件下，白花蛇舌草种子能够迅速大量萌发，且萌发率大于95％，种子出芽率高，保证品种的纯正。本发明专利技术还公开了一种白花蛇舌草初代培养基的制备方法，流程简单，操作简便，制备成本低。

A primary culture medium of Hedyotis diffusa Willd and its preparation method

The present invention discloses a primary culture medium of Hedyotis diffusa, which includes a large number of element components, trace element components, iron salt components, organic components, inositol, sucrose and agar powder, and a large number of element components include potassium nitrate, ammonium nitrate, two water calcium chloride, seven water Magnesium Sulfate and potassium dihydrogen phosphate; The components include: potassium iodide, boric acid, four water manganese sulfate, seven water zinc sulfate, sodium molybdate, five water copper sulfate and cobalt chloride; iron salt components include ferrous sulfate and ethylenediamine tetra acetic acid two; organic components include nicotinic acid, pyridoxine hydrochloride, thiamine HCl and glycine. The seeds of Hedyotis diffusa were placed in the above medium. Under appropriate conditions, the seed of Hedyotis diffusa could germinate rapidly, and the germination rate was greater than 95%, the seed germination rate was high and the variety was pure. The invention also discloses a method for preparing the primary culture medium of Hedyotis diffusa, which has the advantages of simple process, simple operation and low preparation cost.

【技术实现步骤摘要】
一种白花蛇舌草初代培养基及其制备方法
本专利技术涉及白花蛇舌草组织培养育苗
，尤其涉及一种白花蛇舌草初代培养基及其制备方法。
技术介绍
白花蛇舌草(HedyotisdiffusaWilld)为茜草科一年生披散草本，高15-50cm，根细长，分枝，白花。茎略带方形或扁圆柱形，光滑无毛，从基部发出多分枝，花期春季，种子细小黄棕色；一年可收两季，春种8月收，秋种11月收。生长在海拔800米的地区，多生长在水田、田埂和湿润的旷地。主要分布在国内的福建、广东、香港、广西、海南、安徽、云南等地区；其味苦、淡，性寒，主要功效是清热解毒、消肿散结、利尿除湿，毒蛇咬伤等症，近年来发现白花蛇舌草对癌症和肝炎有较好的作用，临床用量较大。但是，白花蛇舌草多为野生，家种很少，野生白花蛇舌草伪品较多，有水线草、纤花耳草、漆姑草、蚤缀、粟米草，伪品在新鲜时可通过细小的植株特征辨别，但干品和种子很难区分真伪。而传统的白花蛇草育种方法是将白花蛇舌草种子直接播种到大田，这样的播种存在以下问题：(1)种子质地较轻，播撒不均匀，较密的地方会影响长势；(2)大田杂草多，混有伪品品种容易掺进白花蛇舌药材或种子；(3)大田受温度，干湿度的影响，萌发率和成活率偏低。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足，本专利技术的目的之一在于提供一种白花蛇舌草初代培养基，把白花蛇舌草种子置于培养基中，在温度为24-26℃，光照强度为2000-2500lx，光照时间为10-12h/天的条件下，白花蛇舌草种子能够迅速大量萌发，且萌发率大于95％，种子出芽率高，保证品种的纯正。本专利技术的目的之二在于提供一种白花蛇舌草初代培养基的制备方法，流程简单，操作简便，制备成本低。本专利技术的目的之一采用如下技术方案实现：一种白花蛇舌草初代培养基，所述培养基包括大量元素组分、微量元素组分、铁盐组分、有机物组分、肌醇、蔗糖和琼脂粉；所述大量元素组分包括：硝酸钾、硝酸铵、二水氯化钙、七水硫酸镁和磷酸二氢钾；所述微量元素组分包括：碘化钾、硼酸、四水硫酸锰、七水硫酸锌、钼酸钠、五水硫酸铜和氯化钴；所述铁盐组分包括：硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠；所述有机物组分包括：烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素和甘氨酸。进一步地，肌醇的浓度为96-100mg/L，蔗糖的质量百分浓度为2％，琼脂粉的浓度为4.8g/L。进一步地，所述大量元素中组分中各组分的浓度如下：硝酸钾1890-1900mg/L，硝酸铵1640-1650mg/L，二水氯化钙440-445mg/L，七水硫酸镁370-375mg/L，磷酸二氢钾160-170mg/L。进一步地，所述微量元素组分中各组分的浓度如下：碘化钾0.8-0.83mg/L，硼酸6.0-6.2mg/L，四水硫酸锰22.3-23.0mg/L，七水硫酸锌8.6-9.0mg/L，钼酸钠0.2-0.25mg/L，五水硫酸铜0.025-0.028mg/L，氯化钴0.028-0.03mg/L。进一步地，所述铁盐组分中各组分的浓度如下：硫酸亚铁27.5-29mg/L，乙二胺四乙酸二钠23-25mg/L。进一步地，所述有机物组分中各组分的浓度如下：烟酸0.2-0.3mg/L，盐酸吡哆醇0.25-0.35mg/L，盐酸硫胺素0.2-0.3mg/L，甘氨酸0.8-0.9mg/L。进一步地，所述培养基用酸碱指示剂将pH调至5.8-6.0。本专利技术的目的之二采用如下技术方案实现：一种白花蛇舌草初代培养基的制备方法，包括：大量元素母液制备步骤：分别取大量元素组分，配制成大量元素母液，所述大量元素母液中各组分的浓度均为各自配方浓度的10-20倍；微量元素母液制备步骤：分别取微量元素组分，配制成微量元素母液，所述微量元素母液中各组分的浓度均为各自配方浓度的10倍；铁盐母液制备步骤：分别取铁盐组分，配制成铁盐母液，所述铁盐母液中各组分的浓度均为各自配方浓度的10-20倍；有机物母液制备步骤：分别取有机物组分，配制成有机物母液，所述有机物母液中各组分的浓度均为各自配方浓度的10-20倍；肌醇溶液制备步骤：取肌醇，用无菌水溶解，获取肌醇溶液；混合定容加热步骤：分别取大量元素母液20-30ml、微量元素母液10-15ml、铁盐母液10-15ml、有机物母液10-15ml、肌醇溶液、琼脂粉3.5-4.8g、蔗糖20-40g，混合，待蔗糖溶解后定溶到1L，然后加热直至琼脂粉融化，接着分装至培养瓶，冷却凝固后即得。进一步地，还包括灭菌步骤：加热直至琼脂粉融化，分装到培养瓶中，每瓶30-40ml，盖紧瓶盖，将培养瓶放到温度为121-125℃、压力为0.15-0.3MPa的灭菌锅中，灭菌20-30min，灭菌完毕出锅，拧紧培养瓶盖并放到培养基储放室，冷却凝固后即得。进一步地，在所述大量元素母液制备步骤中：除二水氯化钙单独进行配制存放外，所述大量元素组分中的其余组分混合配制。相比现有技术，本专利技术的有益效果在于：(1)本专利技术所提供的白花蛇舌草初代培养基，组分易得，配方合理，把白花蛇舌草种子置于该培养基中，在温度为24-26℃，光照强度为2000-2500lx，光照时间为10-12h/天的条件下，白花蛇舌草种子能够迅速大量萌发，且萌发率大于95％，种子出芽率高，得到纯净的白花蛇舌草种苗后，将其栽种在锯末中育种，即可得到正品白花蛇舌草及种子，保证品种的纯正。(2)本专利技术所提供的白花蛇舌草初代培养基的制备方法，流程简单，操作简便，制备成本低。具体实施方式下面，结合具体实施方式，对本专利技术做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。一种白花蛇舌草初代培养基，包括大量元素组分(硝酸钾、硝酸铵、二水氯化钙、七水硫酸镁和磷酸二氢钾)、微量元素组分(碘化钾、硼酸、四水硫酸锰、七水硫酸锌、钼酸钠、五水硫酸铜和氯化钴)、铁盐组分(硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠)、有机物组分(烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素和甘氨酸)、肌醇、蔗糖和琼脂粉。作为进一步的实施方式，大量元素中组分中各组分的浓度如下：硝酸钾1890-1900mg/L，硝酸铵1640-1650mg/L，二水氯化钙440-445mg/L，七水硫酸镁370-375mg/L，磷酸二氢钾160-170mg/L；微量元素组分中各组分的浓度如下：碘化钾0.8-0.83mg/L，硼酸6.0-6.2mg/L，四水硫酸锰22.3-23.0mg/L，七水硫酸锌8.6-9.0mg/L，钼酸钠0.2-0.25mg/L，五水硫酸铜0.025-0.028mg/L，氯化钴0.028-0.03mg/L；铁盐组分中各组分的浓度如下：硫酸亚铁27.5-29mg/L，乙二胺四乙酸二钠23-25mg/L；有机物组分中各组分的浓度如下：烟酸0.2-0.3mg/L，盐酸吡哆醇0.25-0.35mg/L，盐酸硫胺素0.2-0.3mg/L，甘氨酸0.8-0.9mg/L；肌醇的浓度为96-100mg/L，蔗糖的质量百分浓度为2％，琼脂粉的浓度为4.8g/L。作为进一步的实施方式，培养基用酸碱指示剂将pH调至5.8-6.0。本专利技术实施例所提供的白花蛇舌草初代培养基，组分易得，配方合理，把白花蛇舌草种子置于该培养基中，在温度为24-26℃，光照强度为2000-2500lx，光照时间为1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种白花蛇舌草初代培养基，其特征在于，所述培养基包括大量元素组分、微量元素组分、铁盐组分、有机物组分、肌醇、蔗糖和琼脂粉；所述大量元素组分包括：硝酸钾、硝酸铵、二水氯化钙、七水硫酸镁和磷酸二氢钾；所述微量元素组分包括：碘化钾、硼酸、四水硫酸锰、七水硫酸锌、钼酸钠、五水硫酸铜和氯化钴；所述铁盐组分包括：硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠；所述有机物组分包括：烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素和甘氨酸。

【技术特征摘要】
1.一种白花蛇舌草初代培养基，其特征在于，所述培养基包括大量元素组分、微量元素组分、铁盐组分、有机物组分、肌醇、蔗糖和琼脂粉；所述大量元素组分包括：硝酸钾、硝酸铵、二水氯化钙、七水硫酸镁和磷酸二氢钾；所述微量元素组分包括：碘化钾、硼酸、四水硫酸锰、七水硫酸锌、钼酸钠、五水硫酸铜和氯化钴；所述铁盐组分包括：硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠；所述有机物组分包括：烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素和甘氨酸。2.如权利要求1所述的白花蛇舌草初代培养基，其特征在于，肌醇的浓度为96-100mg/L，蔗糖的质量百分浓度为2％，琼脂粉的浓度为4.8g/L。3.如权利要求2所述的白花蛇舌草初代培养基，其特征在于，所述大量元素中组分中各组分的浓度如下：硝酸钾1890-1900mg/L，硝酸铵1640-1650mg/L，二水氯化钙440-445mg/L，七水硫酸镁370-375mg/L，磷酸二氢钾160-170mg/L。4.如权利要求3所述的白花蛇舌草初代培养基，其特征在于，所述微量元素组分中各组分的浓度如下：碘化钾0.8-0.83mg/L，硼酸6.0-6.2mg/L，四水硫酸锰22.3-23.0mg/L，七水硫酸锌8.6-9.0mg/L，钼酸钠0.2-0.25mg/L，五水硫酸铜0.025-0.028mg/L，氯化钴0.028-0.03mg/L。5.如权利要求4所述的白花蛇舌草初代培养基，其特征在于，所述铁盐组分中各组分的浓度如下：硫酸亚铁27.5-29mg/L，乙二胺四乙酸二钠23-25mg/L。6.如权利要求5所述的白花蛇舌草初代培养基，其特征在于，所述有机物组分中各组分的浓度如下：烟酸0.2-0.3mg/L，盐酸吡哆醇0.25-0.35mg/L，盐酸硫胺素0.2-0.3mg/L，...

【专利技术属性】
技术研发人员：许冬瑾，严新，
申请(专利权)人：康美药业文山药材种植管理有限公司，
类型：发明
国别省市：云南,53