一株屎肠球菌菌株及其在酸浆豆腐加工中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种屎肠球菌菌株，其16S rDNA基因序列如SEQ ID No.1所示；所述菌株为R2，其分类命名为屎肠球菌Enterococcus faecium，其保藏编号为CGMCC No.14944；本发明专利技术还涉及一种屎肠球菌菌株R2在酸浆豆腐加工中的应用，其包括如下步骤：黄浆水灭菌；屎肠球菌菌株R2接种到灭菌后的黄浆水中；静置发酵，使黄浆水的pH达到预定值，获得酸浆；将酸浆加到熟豆浆中，获得豆脑，豆脑经过后续处理制得酸浆豆腐。本发明专利技术所述的屎肠球菌菌株培养条件简单，产酸速度快，稳定性好；利用该菌株进行酸浆豆腐的生产，能有效减少污染致病菌和杂菌的含量，且在发酵过程中，无需补充营养素，同时在发酵结束后无需补充醋酸即可达到合适的酸度，这有效降低了生产成本。

A strain of Enterococcus faecium and its application in processing sour bean curd

The invention relates to a strain of Enterococcus faecium whose 16S rDNA gene sequence, such as SEQ ID No.1, is R2, which is classified as Enterococcus faecium of Enterococcus faecium, and its preservation is numbered CGMCC No.14944; the invention also involves the application of a strain of Enterococcus faecium in the processing of acid pulp tofu, including the following steps Sudden: yellow slurry sterilization; Enterococcus faecium strain R2 inoculated into the yellow pulp water after sterilization; statically fermented, the pH of Huang Jiangshui reached the predetermined value and obtained the acid pulp; the acid pulp was added into the ripe soybean milk to obtain the bean brain and the bean brain was processed by subsequent treatment to produce acid bean curd tofu. The culture condition of the strain of Enterococcus faecium described in the invention is simple, the acid producing speed is fast and the stability is good. The production of the acid pulp tofu can effectively reduce the content of the contamination pathogenic bacteria and the heterozygous bacteria, and in the process of fermentation, there is no need for supplementation of nutrients and no need to supplement acetic acid at the end of the fermentation. Acidity, which effectively reduces the cost of production.

【技术实现步骤摘要】
一株屎肠球菌菌株及其在酸浆豆腐加工中的应用
本专利技术涉及于微生物
，尤其涉及一株屎肠球菌菌株及其在酸浆豆腐加工中的应用。
技术介绍
黄浆水是豆腐加工过程中产生的副产物，含有大豆异黄酮、蛋白质和维生素等营养物质，以及大量水溶性的糖类如水苏糖、棉籽糖等低聚糖，可以被微生物发酵利用。生产过程中直接排放不仅造成资源的浪费，而且会对周围的环境造成严重的污染。我国民间有利用黄浆水在自然条件下发酵产酸获得酸浆凝固剂，制得酸浆豆腐。与石膏、卤水作为凝固剂的豆腐相比，酸浆豆腐具有质地细腻、保水性好、口感鲜嫩等特点，深受人们的喜爱。但是自然发酵条件下制备的酸浆，微生物菌群复杂，除了产酸的乳酸菌外，还可能污染致病菌和杂菌，造成酸浆质量不稳定，并对豆腐的安全性构成危害。而一些商用乳酸菌如干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌在发酵利用黄浆水时需要前期补充蔗糖、葡萄糖等营养素或者在发酵结束后补充醋酸才能达到合适的酸度，增加了生产成本。屎肠球菌是农业部《饲料添加剂品种目录》所列菌种，是微生态制剂常用乳酸菌菌种，其相对于商用乳酸菌如干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌等来说，培养条件和保存条件较为简单，更有利于生产和使用。一直以来，屎肠球菌主要用作动物饲料添加剂、中药发酵、有机肥料发酵等。到目前为止，还没有将屎肠球菌应用于发酵生产酸浆豆腐的相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术中的缺陷，提供一株屎肠球菌菌株及其在酸浆豆腐加工中的应用，使用该屎肠球菌菌株生产的酸浆豆腐中杂菌含量少，且无需补充各类营养素，易于达到合适的酸度，有效保证了酸浆豆腐的品质。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的第一个目的是提供一株屎肠球菌菌株，所述屎肠球菌菌株的16SrDNA基因序列如SEQIDNo.1所示，具体如下：ATGCAGTCGAACGCTTCTTTTTCCACCGGAGCTTGCTCCACCGGAAAAAGAGGAGTGGCGAACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCATCAGAAGGGATAACACTTGGAAACAGGTGCTAATACCGTATAACAATCGAAACCGCATGGTTTTGATTTGAAAGGCGCTTTCGGGTGTCGCTGATGGATGGACCCGCGGTGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCCACGATGCATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCGGCAATGGACGAAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGTTAGAGAAGAACAAGGATGAGAGTAACTGTTCATCCCTTGACGGTATCTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCCCGGCTCAACCGGGGAGGGTCATTGGAAACTGGGAGACTTGAGTGCAGAAGAGGAGAGTGGAATTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAGGAACACCAGTGGCGAAAGCGGCTCTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTTAGA(SEQIDNO.1)进一步地，所述菌株为R2，其分类命名为屎肠球菌Enterococcusfaecium，其保藏编号为CGMCCNo.14944，保藏日期为2017年11月20日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本专利技术的第二个目的是提供一种上述的屎肠球菌菌株在酸浆豆腐加工中的应用。为了进一步优化上述应用，本专利技术所采取的技术措施还包括：进一步地，在上述应用中，所述屎肠球菌菌株在在酸浆豆腐加工中的应用方法包括如下步骤：步骤(1)将黄浆水在110～121℃灭菌15-30min；步骤(2)将所述屎肠球菌菌株按3％-5％(v/v)的接种量接种到步骤(1)灭菌后的黄浆水中；步骤(3)在35-40℃下将步骤(2)接种菌株后的黄浆水静置发酵30-36h，使黄浆水的pH达到3.6-4.0，获得酸浆；步骤(4)将步骤(3)所得的酸浆按14～16％(v/v)添加到熟豆浆中，获得豆脑，所述豆脑经过后续处理制得酸浆豆腐。进一步地，在步骤(2)中灭菌完成的黄浆水冷却至32～38℃后，进行屎肠球菌菌株的接种。进一步地，所述步骤(2)中屎肠球菌菌株以屎肠球菌液体种子液的形式进行接种。进一步地，所述屎肠球菌液体种子液的制备方法包括：取液氮中保藏的屎肠球菌R2甘油管，在37℃水浴锅中速溶后，无菌条件下转接到新鲜MRS液体培养基中，37℃静置培养20h，得种子液。进一步地，所述步骤(4)中的后续处理为将获得的豆脑倾倒入铺好豆腐布的型框中，加网布、覆平、自沥后加压成型得酸浆豆腐。进一步地，所述熟豆浆的制备步骤：大豆经除杂、清晰、浸泡、打浆去渣后煮沸得到熟豆浆。进一步地，所述步骤(2)中的屎肠球菌菌株的接种量为3％(v/v)，所述步骤(4)中酸浆的添加量为16％(v/v)。进一步地，所述屎肠球菌菌株在在酸浆豆腐加工中的应用方法具体如下：取新鲜的豆腐黄浆水，分装在250mL锥形瓶中，120℃，灭菌15min。冷却至35℃左右接种3％(v/v)屎肠球菌EnterococcusfaeciumR2液体种子液(MRS培养基)，于37℃下静置培养32h，得到pH为4.0的豆腐酸浆。此豆腐酸浆可直接作为酸浆豆腐的凝固剂使用。大豆经除杂、清晰、浸泡、打浆去渣后煮沸得到豆浆，将所得酸浆凝固剂按16％(v/v)的添加量加入到所得熟豆浆中得到豆脑，所得豆脑倾倒入铺好豆腐布的型框中，加网布、覆平、自沥后加压成型得酸浆豆腐。与现有技术相比，本专利技术采用上述技术方案具有以下有益效果：本专利技术所述的屎肠球菌菌株培养条件简单，产酸速度快，稳定性好，使用方便；利用该菌株进行酸浆豆腐的生产，其能有效地生产乳酸菌等益生菌，减少污染致病菌和杂菌的含量，保证了酸浆的质量及其稳定性，从而保证了豆腐的安全性；在采用屎肠球菌发酵过程中，无需补充蔗糖、葡萄糖等营养素，且在发酵结束后无需补充醋酸即可达到合适的酸度，这有效降低了生产成本。附图说明图1为屎肠球菌R2的生长曲线图；生物材料保藏说明：分类命名：屎肠球菌Enterococcusfaecium；菌株编号：R2；保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(保藏机构简称：CGMCC)；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2017年11月20日；保藏中心登记入册编号：CGMCCNo.14944。具体实施方式本专利技术涉及一株屎肠球菌菌株，所述屎肠球菌菌株的16SrDNA基因序列如SEQIDNo.1所示；所述菌株为R2，其分类命名为屎肠球菌Enterococcusfaecium，其保藏编号为C本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株屎肠球菌菌株，其特征在于，所述菌株的16S rDNA基因序列如SEQ ID No.1所示。

【技术特征摘要】
1.一株屎肠球菌菌株，其特征在于，所述菌株的16SrDNA基因序列如SEQIDNo.1所示。2.根据权利要求1所述的屎肠球菌菌株，其特征在于，所述菌株为R2，其分类命名为屎肠球菌Enterococcusfaecium，其保藏编号为CGMCCNo.14944。3.一种如权利要求1或2所述的屎肠球菌菌株在酸浆豆腐加工中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述屎肠球菌菌株在在酸浆豆腐加工中的应用方法包括如下步骤：步骤(1)将黄浆水在110～121℃灭菌15-30min；步骤(2)将所述屎肠球菌菌株按3％-5％(v/v)的接种量接种到步骤(1)灭菌后的黄浆水中；步骤(3)在35-40℃下将步骤(2)接种菌株后的黄浆水静置发酵30-36h，使黄浆水的pH达到3.6-4.0，获得酸浆；步骤(4)将步骤(3)所得的酸浆按12～16％(v/v)添加到熟豆浆中，获得豆脑，所述豆脑经过后续处理制得酸浆豆腐。5.根据权利要求4...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈志娜，张科贵，叶韬，丁曼，黄琳，
申请(专利权)人：淮南师范学院，
类型：发明
国别省市：安徽,34