一种生产土霉素的培养基及发酵方法技术

本发明专利技术公开了一种生产土霉素的培养基及发酵方法，所述的发酵培养基的组成为：麦秸秆浆液5‑10份、糊精3‑6份、氢化植物油5‑7份、豆粉1‑4份、尿素3‑6份、十二烷基硫酸钠0.5‑0.9份、碘化钾0.3‑0.7份、葡萄糖酸钙1.5‑3.5份、葡萄糖酸锌0.5‑1份、水100份；选用地中海链丝菌为菌种，微波辐照后的改性菌种经发酵后得到效价为41000u/mL的土霉素发酵液，与传统的发酵6‑8天相比，不仅大大缩短了发酵时间，而且土霉素发酵液的效价也比传统发酵后的效价高出近20％，提高了生产效率。

A culture medium and fermentation method for the production of Oxytetracycline

The invention discloses a culture medium and a fermentation method for the production of oxytetracycline. The composition of the fermentation medium is: wheat straw pulp 5, 10, 3, 7, 1, 7, 1, 3, 6, twelve sodium sulfate 0.5, potassium iodate 0.3, calcium gluconate. With zinc gluconate 0.5 and 1 water and 100 water of water, the strain of Bacillus thalamus was selected as the strain, and the modified strain after microwave irradiation was fermented to get the oxytetracycline fermentation broth of 41000u/mL. Compared with the traditional fermentation 6 8 days, the fermentation time was greatly shortened, and the titer of oxytetracycline fermentation liquid was also compared with the traditional fermentation. The titer is up to 20%, and the production efficiency is improved.

【技术实现步骤摘要】
一种生产土霉素的培养基及发酵方法
本专利技术属于生物制药
，具体涉及一种生产土霉素的培养基及发酵方法。
技术介绍
土霉素具有广谱抗病原微生物作用，为快速抑菌剂，高浓度时对某些细菌呈杀菌作用。其作用机制在于药物能特异性地与核糖体30S亚基的A位置结合，阻止氨基酰-tRNA在该位置上的联结，从而抑制肽链的增长和影响细菌或其他病原微生物的蛋白质合成。土霉素对金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、化脓性链球菌、淋球菌、脑膜炎球菌、大肠杆菌、产气杆菌、志贺菌属、耶尔森菌、单核细胞李斯特菌等有较强抗菌活性；此外，土霉素对立克次体、支原体、衣原体、放线菌等也有较强作用，土霉素的结构如式(1)：土霉素属传统的发酵产品，是采用龟裂链霉菌在发酵过程中的次级代谢产物。目前所采用的土霉素生产工艺发酵时间长，所生产出来的土霉素收率低，通过721分光光度计进行质量检测，在490nm光波下，普遍能够检测出大量杂质，严重影响后续制剂的质量和临床疗效。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种生产土霉素的培养基及发酵方法，改进了传统的土霉素发酵方法，优选了改进了菌种，大大提高了效价，缩短了发酵周期。本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：一种生产土霉素的培养基，包括改性培养基和发酵培养基，其中：所述的改性培养基的组成为：麦秸秆浆液2-5份、琼脂2-5份、黑芝麻粉2-4份、氢化植物油5-7份、玉米浆1-3份、薏仁粉1-3份、尿素3-6份、十二烷基硫酸钠0.5-0.9份、碘化钾0.3-0.7份、葡萄糖酸钙1.5-3.5份、葡萄糖酸锌0.5-1份、水100份；所述的发酵培养基的组成为：麦秸秆浆液5-10份、糊精3-6份、氢化植物油5-7份、豆粉1-4份、尿素3-6份、十二烷基硫酸钠0.5-0.9份、碘化钾0.3-0.7份、葡萄糖酸钙1.5-3.5份、葡萄糖酸锌0.5-1份、水100份。进一步，培养基的配制方法为：a、将水烧开，30％的开水保温为热开水，另外70％的水冷却至室温得到冷开水做调节备用；b、称取组分量的十二烷基硫酸钠、碘化钾、葡萄糖酸钙和葡萄糖酸锌这些盐类用冷开水溶解得到盐溶液；c、称取组分量除盐类外的成分用热开水糊化得到培养浆；d、边搅拌培养浆边加入盐溶液，混合均匀后，加入余量水搅拌均匀，高温灭菌后即得到培养基。进一步，步骤a所述的保温的温度为85-92℃，所述的室温温度为22-26℃；步骤b所述的冷开水的用量为冷开水总量的10％-20％；步骤d所述的高温灭菌条件为在115-130℃温度下灭菌20-30min。进一步，所述的麦秸秆浆液的相对密度为0.3-0.4，玉米浆的相对密度为1.1-3.2。一种生产土霉素的发酵方法，具体包括以下步骤：选用地中海链丝菌为菌种，将海链丝菌接到改性培养基中，微波辐照后，转移至第一恒温室内培养即得到改性菌种，将改性菌种接到发酵培养基中，将发酵培养基放到第二恒温室中的振摇器上培养，待发酵结束即形成土霉素发酵液。进一步，所述的微波辐照条件为：微波功率为300MHz-500MHz，,微波辐照时间为6-10s。进一步，所述的第一恒温室内的温度为35-40℃，湿度为50-60％；所述的第二恒温室内的温度为30-35℃，湿度为45-55％。进一步，所述的第一恒温室内培养的时间为35-48h；第二恒温室内的培养时间为2-3天。进一步，所述的振摇器的振摇频率为180-210rpm。进一步，所述的土霉素发酵液程棕褐色，发酵液中菌丝可自溶，发酵结束的条件为菌体浓度为35～40％，pH值为6.3～8.2，效价为41000u/mL时发酵结束。本专利技术的有益效果：本专利技术的提供的一种生产土霉素的培养基及发酵方法，选用地中海链丝菌为菌种，微波辐照后的改性菌种经发酵后得到效价为41000u/mL的土霉素发酵液，与传统的发酵6-8天相比，不仅大大缩短了发酵时间，而且土霉素发酵液的效价也比传统发酵后的效价高出近20％，提高了生产效率。具体实施方式下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1改性培养基的组成为：麦秸秆浆液2kg、琼脂2kg、黑芝麻粉2kg、氢化植物油5kg、玉米浆1kg、薏仁粉1kg、尿素3kg、十二烷基硫酸钠0.5kg、碘化钾0.7kg、葡萄糖酸钙3.5kg、葡萄糖酸锌0.5kg、水100kg；发酵培养基的组成为：麦秸秆浆液5kg、糊精6kg、氢化植物油7kg、豆粉1kg、尿素3kg、十二烷基硫酸钠0.5kg、碘化钾0.3kg、葡萄糖酸钙1.5kg、葡萄糖酸锌0.5kg、水100kg；(1)、培养基的制备：100kg水烧开后，30kg水保温在85℃，70kg水冷却至22℃，用7kg冷开水溶解盐溶液，其他组分用热开水糊化得到培养浆，边搅拌培养浆边加入盐溶液，混合均匀后，加入余量冷开水搅拌均匀，在115℃的温度下灭菌20min即得到培养基；(2)、土霉素发酵液的制备选用地中海链丝菌为菌种，将海链丝菌接到改性培养基中，在300MHz微波辐照6s后，转移至温度为35℃，湿度为50％的第一恒温室内培养35h即得到改性菌种，将改性菌种接到发酵培养基中，将发酵培养基放到温度为30℃，湿度为45％的第二恒温室中的振摇器上，在振摇频率为180rpm下培养2天，待发酵液程棕褐色，发酵液中菌丝可自溶，菌体浓度为35％，pH值为6.5，效价为41000u/mL时发酵结束即形成土霉素发酵液。实施例2改性培养基的组成为：麦秸秆浆液5kg、琼脂5kg、黑芝麻粉4kg、氢化植物油7kg、玉米浆1kg、薏仁粉3kg、尿素6kg、十二烷基硫酸钠0.5kg、碘化钾0.3kg、葡萄糖酸钙1.5kg、葡萄糖酸锌1kg、水100kg；发酵培养基的组成为：麦秸秆浆液10kg、糊精3kg、氢化植物油5kg、豆粉4kg、尿素6kg、十二烷基硫酸钠0.9kg、碘化钾0.7kg、葡萄糖酸钙3.5kg、葡萄糖酸锌1kg、水100kg；(1)、培养基的制备：100kg水烧开后，30kg水保温在92℃，70kg水冷却至26℃，用14kg冷开水溶解盐溶液，其他组分用热开水糊化得到培养浆，边搅拌培养浆边加入盐溶液，混合均匀后，加入余量冷开水搅拌均匀，在130℃的温度下灭菌20min即得到培养基；(2)、土霉素发酵液的制备选用地中海链丝菌为菌种，将海链丝菌接到改性培养基中，在500MHz微波辐照7s后，转移至温度为40℃，湿度为55％的第一恒温室内培养48h即得到改性菌种，将改性菌种接到发酵培养基中，将发酵培养基放到温度为35℃，湿度为55％的第二恒温室中的振摇器上，在振摇频率为210rpm下培养3天，待发酵液程棕褐色，发酵液中菌丝可自溶，菌体浓度为40％，pH值为8.1，效价为42500u/mL时发酵结束即形成土霉素发酵液。实施例3改性培养基的组成为：麦秸秆浆液3kg、琼脂3kg、黑芝麻粉2kg、氢化植物油6kg、玉米浆1.5kg、薏仁粉2.5kg、尿素5kg、十二烷基硫酸钠0.7kg、碘化钾0.5kg、葡萄糖酸钙2.5kg、葡萄糖酸锌0.6kg、水100kg；发酵培养基的组成为：麦秸秆浆液6本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生产土霉素的培养基，其特征在于：包括改性培养基和发酵培养基，其中：所述的改性培养基的组成为：麦秸秆浆液2‑5份、琼脂2‑5份、黑芝麻粉2‑4份、氢化植物油5‑7份、玉米浆1‑3份、薏仁粉1‑3份、尿素3‑6份、十二烷基硫酸钠0.5‑0.9份、碘化钾0.3‑0.7份、葡萄糖酸钙1.5‑3.5份、葡萄糖酸锌0.5‑1份、水100份；所述的发酵培养基的组成为：麦秸秆浆液5‑10份、糊精3‑6份、氢化植物油5‑7份、豆粉1‑4份、尿素3‑6份、十二烷基硫酸钠0.5‑0.9份、碘化钾0.3‑0.7份、葡萄糖酸钙1.5‑3.5份、葡萄糖酸锌0.5‑1份、水100份。

【技术特征摘要】
1.一种生产土霉素的培养基，其特征在于：包括改性培养基和发酵培养基，其中：所述的改性培养基的组成为：麦秸秆浆液2-5份、琼脂2-5份、黑芝麻粉2-4份、氢化植物油5-7份、玉米浆1-3份、薏仁粉1-3份、尿素3-6份、十二烷基硫酸钠0.5-0.9份、碘化钾0.3-0.7份、葡萄糖酸钙1.5-3.5份、葡萄糖酸锌0.5-1份、水100份；所述的发酵培养基的组成为：麦秸秆浆液5-10份、糊精3-6份、氢化植物油5-7份、豆粉1-4份、尿素3-6份、十二烷基硫酸钠0.5-0.9份、碘化钾0.3-0.7份、葡萄糖酸钙1.5-3.5份、葡萄糖酸锌0.5-1份、水100份。2.根据权利要求1所述的一种生产土霉素的培养基，其特征在于：培养基的配制方法为：a、将水烧开，30％的开水保温为热开水，另外70％的水冷却至室温得到冷开水做调节备用；b、称取组分量的十二烷基硫酸钠、碘化钾、葡萄糖酸钙和葡萄糖酸锌这些盐类用冷开水溶解得到盐溶液；c、称取组分量除盐类外的成分用热开水糊化得到培养浆；d、边搅拌培养浆边加入盐溶液，混合均匀后，加入余量水搅拌均匀，高温灭菌后即得到培养基。3.根据权利要求2所述的一种生产土霉素的培养基，其特征在于：步骤a所述的保温的温度为85-92℃，所述的室温温度为22-26℃；步骤b所述的冷开水的用量为冷开水总量的10％-20％；步骤d所述的高温灭菌条件为在115-130℃温度下灭菌20...

【专利技术属性】
技术研发人员：程玉柱，夏运喜，刘晓燕，
申请(专利权)人：安徽永生堂药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34