用于治疗移植物抗宿主病的组合物和方法技术

一种在接受同种异体造血干细胞(HSC)移植物的哺乳动物受试者中预防GvHD发展或降低GvHD严重性的方法，所述方法包括向受所述试者施用包含活性剂的药物组合物，所述活性剂抑制缺氧诱导因子‑1α(HIF‑1α)或缺氧诱导因子‑2α(HIF‑2α)的生物活性或表达，其中所述活性剂以有效预防或降低所述受试者的严重GvHD的量施用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗移植物抗宿主病的组合物和方法本申请要求于2015年8月19日提交的序列号为No.62/207,000的美国专利申请的优先权。前述申请的全部内容在此通过参引方式引入本文。
本申请主要涉及移植物抗宿主病(“GvHD”)的医学治疗。更具体地说，本申请涉及HIF-α-抑制性组合物用于在接受同种异体造血干细胞(HSC)移植物的哺乳动物受试者中预防GvHD发展或减轻GvHD严重性的应用。
技术介绍
同种异体造血干细胞移植(HSCT)是血液恶性肿瘤的潜在治疗疗法。尽管供体骨髓(BM)中的淋巴细胞在预防肿瘤复发中起关键作用，但它们也造成了移植物抗宿主病(GvHD)的发展(Ferrara,JL等,Lancet,373(9674):1550-1561(2009)。GvHD引起多器官损伤，是造成患者HSCT有关的发病率和死亡率的主要原因之一。尽管有采用非特异性免疫抑制药物预防人类GvHD方面的进展，但是GVHD仍是HSCT后发病率和死亡率的重要原因，目前对已确定的GVHD尚无有效治疗的方法。临床上，移植物抗宿主病分为急性形式和慢性形式。急性或暴发形式的疾病(aGvHD)通常在移植后的第一个100天内观察到，并且由于相关的发病率和死亡率的缘故，是对移植物的有效性的重大挑战。慢性形式的移植物抗宿主病(cGvHD)通常在100天后发生。中度至重度cGvHD病例的出现对长期存活产生不利影响。骨髓移植后，存在于移植物中的T细胞(作为污染物或被有意引入宿主)在感知宿主组织为抗原性外来物后攻击移植物受体的组织。T细胞产生过量的细胞因子，包括TNFα和干扰素-γ(IFNγ)。广泛的宿主抗原可引发移植物抗宿主病，其中包括人类白细胞抗原(HLA)。然而，即使HLA相同的兄弟姐妹是供体，也会发生移植物抗宿主病。传统上，急性移植物抗宿主病的特征在于对肝脏、皮肤和粘膜以及胃肠道的选择性损伤。另有研究表明，其他移植物抗宿主病靶器官包括免疫系统(如骨髓和胸腺)本身，以及肺部(以特发性肺炎的形式)。慢性移植物抗宿主病也会攻击上述器官，但是在其长期病程中也会对结缔组织和外分泌腺造成损伤。临床上相关的人源化动物模型对于开发用于治疗GvHD的新策略而言是至关重要的。在为人源化小鼠的GvHD产生的稳健模型方面取得了重大进展，尽管这些模型并非没有缺点。迄今为止，最佳模型利用了免疫缺陷小鼠，特别是非肥胖糖尿病(NOD)鼠伤寒沙门氏菌IL2rγ0(NSG)株(non-obesediabetic(NOD).scidIL2rγ0)，其中至少5×106人PBMC被静脉内移植到成年小鼠中(Ito,R.等,Transplantation,87(11):1654-1658(2009)；King,MA等,Clin.Exp.Immunol.,157(1):104-118(2009))。虽然这些模型表现出致命的GvHD，但它们并不完全再现人类疾病的发病机制。例如，免疫损伤显然在肺部中最为严重，但是皮肤和肝脏仅出现轻微浸润(Id.)，后者是人类GvHD中最常见的靶器官(JacobsohnDA等,OrphanetJRareDis.,2:35(2007)。此外，目前所有依赖人类PBMC或T细胞纯化脐带血来诱导异种GvHD的模型事实上均未解决人类GvHD在HSCT后发生的问题，其中BM(而不是外周血)是HSC的主要来源。目前尚不清楚BM和外周血中的T细胞是否对治疗产生类似的反应。鉴于上述情况，需要用于解决GvHD的改进治疗，包括鉴定更好的可药用分子靶标，以及开发更好地反映人GvHD病理特征的动物模型以促进对GvHD药物的发现。
技术实现思路
本申请的一个方面涉及在接受同种异体造血干细胞(HSC)移植物的哺乳动物受试者中预防GvHD发展或降低GvHD严重性的方法。所述方法包括向所述受试者施用药物组合物的步骤，所述药物组合物包含抑制缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和/或缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)的生物学活性或表达的活性剂，其中所述药物组合物以有效预防或降低所述受试者的严重GvHD(severityGvHD)的量施用。本申请的另一个方面涉及一种治疗接受同种异体造血干细胞(HSC)移植物的哺乳动物受试者中的GvHD的方法。所述方法包括向受试者施用有效量的包含抑制HIF-1α和/或HIF-2α的生物学活性或表达的活性剂的药物组合物的步骤。本申请的另一个方面涉及一种用于在接受同种异体造血干细胞(HSC)移植物的哺乳动物受试者中预防GvHD发展或降低GvHD严重性的药物组合物。所述药物组合物包含抑制HIF-1α和/或HIF-2α的生物活性或表达的第一试剂、增强Treg活性的第二试剂和药学上可接受的载体。本申请的另一方面涉及一种鉴定用于治疗GvHD的候选药物的方法。所述方法包括以下步骤：将测试试剂施用到具有人源化系统性GvHD的小鼠中；监测小鼠的存活和GvHD临床表现；以及如果与接受对照试剂的具有人源化系统性GvHD的小鼠相比所述测试试剂预防或降低了所述小鼠的严重GvHD，则将所述测试试剂鉴定为GvHD的候选药物；其中具有人源化系统性GvHD的所述小鼠是通过将人骨髓细胞移植到新生NSG小鼠中来产生的。附图说明结合以下附图和段落的详细描述一起考虑，本申请的上述和其他目的和优点将变得显而易见。图1：将人BM细胞移植到新生NSG小鼠中导致急性GvHD。向经用1.3Gy照射的新生NSG幼崽肝内注射0.5×106人BM细胞。图A是展示移植后第17天受体PBMC中的人CD45+、CD4+、CD8+和CD4+CD8+分布的代表性FACS图谱。图B总结了移植后第17天受体PBMC中人CD45+、CD45+CD4+、CD45+CD8+和CD45+CD4+CD8+的百分比。图C是NSG小鼠中人细胞扩增的纵向分析。所示数据是在第21、31和41天通过FACS分析测量的每个受体的PBL中人CD45+细胞的百分比。图D显示了被照射(1.3Gy)的正常NSG小鼠(n＝25)和接受照射并在出生时肝内注射0.5×106人BM细胞(GvHD，n＝30)的小鼠的体重。显示的数据是平均值和SEM。图E为移植有BM细胞的人类BMNSG受体(n＝24)和正常NSG小鼠(n＝10)的Kaplan-Meier存活曲线。每天观察小鼠的存活情况。对照小鼠(绿色曲线)仅接受照射。图F为移植有人BM细胞或来自人BM细胞的分选CD3+和CD3-细胞的人BMNSG受体的Kaplan-Meier存活曲线。每天观察小鼠的存活情况。图2.对异种NSG受体器官中人CD3+细胞浸润进行的组织病理学和免疫组织化学分析。图A为从GvHD小鼠的皮肤、肝、肾、舌、肺、胰腺、胃和肠获得的组织切片的苏木精和伊红(H&E)染色图示。图B为用抗人CD3染色的免疫组织化学图示，该图示显示了高比例的CD3+细胞已经侵入了人BMNSG受体的各种器官。所述免疫组织化学评估在20只小鼠中进行。组织使用福尔马林固定并用石蜡包埋。图3.通过免疫荧光显示人类细胞在异种NSG受体的器官中的分布。图A为人类CD4+和CD8+细胞在异种NSG受体器官中的分布。用抗人CD4和CD8染色的免疫荧光图示显示CD4+和CD8+T细胞在人类BMNSG受体的各种器官中的分布。该免疫荧光评估本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在接受同种异体造血干细胞(HSC)移植物的哺乳动物受试者中预防GvHD发展或降低GvHD严重性的方法，所述方法包括：向所述受试者施用包含抑制缺氧诱导因子‑1α(HIF‑1α)和/或缺氧诱导因子‑2α(HIF‑2α)的表达或生物活性的活性剂的药物组合物，其中所述药物组合物以有效预防或降低所述受试者的GvHD严重性的量施用。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.08.19 US 62/207,0001.一种在接受同种异体造血干细胞(HSC)移植物的哺乳动物受试者中预防GvHD发展或降低GvHD严重性的方法，所述方法包括：向所述受试者施用包含抑制缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和/或缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)的表达或生物活性的活性剂的药物组合物，其中所述药物组合物以有效预防或降低所述受试者的GvHD严重性的量施用。2.根据权利要求1所述的方法，其中在移植所述HSC之前将所述药物组合物施用于所述受试者。3.根据权利要求1所述的方法，其中在移植所述HSC之后将所述药物组合物施用于所述受试者。4.根据权利要求1所述的方法，其中在移植所述HSC之前和之后将所述药物组合物施用于所述受试者。5.根据权利要求1所述的方法，其中在移植所述HSC之前14天至移植所述HSC之后2个月的时间段内将所述药物组合物施用于所述受试者。6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中移植的所述HSC包含所述活性剂。7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述移植物包含来自骨髓、外周血或脐带血的HSC。8.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述移植物包含胚胎干细胞或诱导性多能干细胞。9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述受试者还接受间充质基质细胞的移植物。10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述受试者患有白血病。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述白血病选自由急性淋巴母细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、急性骨髓性白血病、慢性髓性白血病、毛细胞性白血病、T细胞幼淋巴细胞性白血病、大颗粒淋巴细胞性白血病和成人T细胞性白血病组成的组。12.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述受试者患有非造血系统疾病。13.根据权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述活性剂包含HIF-1α或HIF-2α的小分子抑制剂。14.根据权利要求13所述的方法，其中所述小分子抑制剂选自由HIF与DNA之间相互作用的抑制剂、HIF-α与p300之间相互作用的抑制剂、HIF二聚化抑制剂、拓扑异构酶I抑制剂、拓扑异构酶II抑制剂、热休克蛋白-90抑制剂、微管破坏剂、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、PI3-激酶抑制剂及其组合组成的组。15.根据权利要求13所述的方法，其中所述小分子抑制剂是棘霉素。16.根据权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述活性剂包含抗HIF-1α或HIF-2...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘阳，王茵，
申请(专利权)人：儿研所儿童医学中心，
类型：发明
国别省市：美国,US