一种虫草菌丝体胞外多糖功能饮料及制备方法技术

本发明专利技术公开了一种虫草菌丝体胞外多糖功能饮料及制备方法，所述饮料由虫草菌丝体胞外多糖溶液、β‑环糊精、三氯蔗糖和柠檬酸组成；所述β‑环糊精用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为15‑50g/30L，所述三氯蔗糖用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为5‑30g/30L，所述柠檬酸用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为5‑40g/30L；本发明专利技术对得到的虫草菌丝体胞外多糖功能饮料固形物进行了小鼠脾淋巴细胞转化实验和小鼠脾NK细胞杀伤活性测定。结果表明虫草菌丝体胞外多糖功能饮料具有潜在的提高机体免疫力价值。

Cordyceps mycelia extracellular polysaccharide functional beverage and preparation method thereof

The present invention discloses a kind of Cordyceps mycelium extracellular polysaccharide functional beverage and preparation method. The beverage is composed of exo polysaccharide solution of Cordyceps mycelium, beta cyclodextrin, three sucralose and citric acid; the dosage of the beta cyclodextrin is 15 50g/30L with the volume of the polysaccharide solution of Cordyceps mycelium, and the dosage of three sucralose is used. The volume meter of the extracellular polysaccharide solution of the mycelium of Cordyceps sinensis was 5 30g/30L, and the amount of citric acid used as the volume meter of the polysaccharide solution of Cordyceps mycelium was 5 40g/30L. The inventions carried out the experiment of spleen lymphocyte transformation in mice and the killing activity of mouse spleen NK cells in the polysaccharide functional beverage solid of Cordyceps mycelium. The results showed that the extracellular polysaccharide functional beverage of Cordyceps sinensis mycelia has the potential to enhance immunity.

【技术实现步骤摘要】
一种虫草菌丝体胞外多糖功能饮料及制备方法(一)
本专利技术涉及一种功能饮料，特别涉及一种虫草菌丝体胞外多糖功能饮料及制备方法。(二)
技术介绍
冬虫夏草(Cordycepssinensis(Berk.)Sacc)是由麦角菌科植物冬虫夏草菌的子座及其寄主蝙蝠蛾科昆虫虫草蝙蝠蛾等的幼虫尸体的复合体，是中国传统的名贵中药。中国被毛孢(Hirsutellasinensis)，是冬虫夏草的分生孢子阶段即无性型阶段(刘锡琎，郭英兰，俞永信，曾纬.冬虫夏草无性阶段的分离和鉴定.真菌学报，1989，8(1)：35-40.)。天然冬虫夏草生长环境苛刻，产率极低，市场供不应求。沈晓云等(沈晓云，李兆兰，田军.冬虫夏草与虫草菌丝有效成分分析比较.陕西大学学报，1998，21(1)：80-85.)研究表明，液体发酵培养得到的虫草菌丝体，其有效成分和天然冬虫夏草相近，市场上已有许多以虫草菌丝体为原料制成的虫草保健产品，如百令胶囊、极草含片、东阳光鲜草等。随着菌丝体的大量应用，含有大量胞外多糖的发酵液目前并未被充分利用，而是被当作废液排弃，每年数百万吨的发酵液不仅造成了原料的大量浪费，而且额外增加了污水处理费用。因此，虫草发酵液的产品开发不仅实现了环境友好，而且满足经济环保。中国专利CN103130907A公开了一种中国被毛孢蛋白多糖及其制备和用途，从中国被毛孢深层发酵上清液中分离纯化出中国被毛孢蛋白多糖，并对其进行了成分分析、结构鉴定及免疫功能研究，表明该蛋白多糖是潜在的免疫增强物质；该实验过程中采用了Sevag法对游离蛋白进行脱除，不仅使用了有机溶剂，而且造成了活性蛋白成分的严重流失。赵萍等人(赵萍，王聪，夏闻旭，等.蝙蝠蛾被毛孢菌丝体发酵液口服制剂的研发.中国酿造，2016，35(4)：171-175.)利用蝙蝠蛾被毛孢菌丝体发酵液研制出一种口服制剂；该实验以蝙蝠蛾被毛孢菌丝体发酵液为研究对象，将其直接进行浓缩，澄清等步骤调配成口服制剂，菌丝体发酵液成分复杂，除了含有大量菌丝体等悬浮固形物外，还含有一些小分子的苦味物质和培养基的被代谢产物，不进行去除不仅影响产品风味和稳定性，并且这些小分子物质浓缩后被人体大量摄入会造成潜在的健康风险。方苏等人(方苏、黄久常、倪志婧.冬虫夏草发酵液营养饮料研制.安徽农业科学，2009，37(8)：3762-3764.)以冬虫夏草C-30菌丝发酵滤液为原料研制出一种冬虫夏草发酵液饮料，风味独特，品质稳定；该实验所使用的菌丝发酵滤液只是通过离心技术将菌丝体等固形悬浮物进行固液分离，并未能有效脱除小分子的苦味物质，且蝙蝠蛾被毛孢作为冬虫夏草唯一的无性型菌种，其菌丝体基因组DNA指纹图谱与天然冬虫夏草相似度高达99.39％，药用价值极高，是其他虫草菌种无法超越的。中国专利CN105876405A公开了一种发酵冬虫夏草胞外多糖口服液及其制备方法；该实验利用人工发酵冬虫夏草方式生产冬虫夏草菌丝体后的发酵液生产冬虫夏草胞外多糖口服液，将发酵液用外加热式三效浓缩器浓缩，操作过程中并未脱除杂质，且设备要求较高，对所得浓缩液需再进行提纯干燥，操作复杂，并不适合工业生产。本专利技术采用华东医药集团有限公司制备百令胶囊的蝙蝠蛾被毛孢的发酵滤液为原料，使用三氯蔗糖、β-环糊精及柠檬酸进行调配，并对产品进行稳定性考察和免疫活性研究。(三)
技术实现思路
本专利技术目的是提供一种虫草菌丝体胞外多糖功能饮料及制备方法。本专利技术以中国被毛孢发酵滤液为原料，使用三氯蔗糖、β-环糊精及柠檬酸进行调配，制备成一种口感好、食用方便、稳定性好且可以提高机体免疫功能的虫草菌丝体胞外多糖功能饮料。本专利技术采用的技术方案是：本专利技术提供一种虫草菌丝体胞外多糖功能饮料，所述饮料由虫草菌丝体胞外多糖溶液、β-环糊精、三氯蔗糖和柠檬酸组成；所述β-环糊精用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为15-50g/30L，所述三氯蔗糖用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为5-30g/30L，所述柠檬酸用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为5-40g/30L；所述虫草菌丝体胞外多糖溶液中多糖质量含量为85-95％，蛋白质量含量为3-7％，按如下方法制备：将中国被毛孢(Hirsutellasinensis)经发酵培养获得的发酵液离心，上清液经膜孔径为0.1μm-0.45μm的膜(优选陶瓷管式膜)预过滤，除去微米级悬浮物，得到滤液A；滤液A采用孔径为0.001μm-0.005μm的膜(优选卷式膜)过滤，除去大部分具有苦味的小分子物质，得到含小分子物质的滤液B和含虫草菌丝体胞外多糖的截留液C，将滤液B通过仅允许水分子透过的反渗透膜(优选孔径为0.0001μm二级反渗透膜)进行回水利用，截留液C即得虫草菌丝体胞外多糖溶液。进一步，所述虫草菌丝体胞外多糖溶液按如下方法制备：将中国被毛孢(Hirsutellasinensis)经发酵培养获得的发酵液离心，上清液经膜孔径为0.1μm-0.45μm的陶瓷管式膜预过滤，再将滤液经过孔径为0.01-0.1μm中空纤维膜进行二次过滤，获得滤液A1，滤液A1采用膜孔径为0.001μm-0.005μm的卷式膜过滤，得到滤液B和含虫草菌丝体胞外多糖的截留液C，将滤液B通过仅允许水分子透过的二级反渗透膜(孔径为0.0001μm)进行回水利用，截留液C即得虫草菌丝体胞外多糖溶液。进一步，所述陶瓷管式膜、中空纤维膜、卷式膜和二级反渗透膜的过滤条件均为：40-60psi，流速为30-50mL/min。进一步，所述陶瓷管式膜孔径为0.22μm，中空纤维膜孔径为0.1μm，卷式膜孔径为0.005μm。进一步，优选所述虫草菌丝体胞外多糖功能饮料中β-环糊精用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为15-45g/30L，所述三氯蔗糖用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为5-25g/30L，所述柠檬酸用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为5-35g/30L。更进一步，优选所述虫草菌丝体胞外多糖功能饮料中β-环糊精用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为15-45g/30L，所述三氯蔗糖用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为5-15g/30L，所述柠檬酸用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为10-25g/30L。本专利技术所述离心是在10-20℃下，3000-5000rpm，离心5-10min，优选在18℃下，4500rpm，离心5min。本专利技术还提供一种所述虫草菌丝体胞外多糖功能饮料的制备方法，所述方法为：将虫草菌丝体胞外多糖溶液加热至40-50℃，加入配方量的β-环糊精，搅拌5-10min，室温下静置冷却30min，依次加入配方量的三氯蔗糖和配方量的柠檬酸，搅拌均匀，罐装，在110℃-121℃下灭菌20-30min，即得虫草菌丝体胞外多糖功能饮料。本专利技术所述发酵液的制备方法参照孙秀萍等人(孙秀萍、赵冰、王晓东.中国被毛孢液体发酵培养条件优化.食品研究与开发,2015,36(23)：158-163)，具体为：将中国被毛孢(Hirsutellasinensis)培养72h的种子液，以体积浓度5％的接种量接种至发酵培养基，在初始pH6.5，装液量100ml/500ml，温度为16℃，摇床转速150r/min的条件下发酵培养24h，获得发酵液；所述发酵培养基质量组成为：葡萄糖3％，蚕蛹粉2％，土本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种虫草菌丝体胞外多糖功能饮料，其特征在于所述饮料由虫草菌丝体胞外多糖溶液、β‑环糊精、三氯蔗糖和柠檬酸组成；所述β‑环糊精用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为15‑50g/30L，所述三氯蔗糖用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为5‑30g/30L，所述柠檬酸用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为5‑40g/30L；所述虫草菌丝体胞外多糖溶液中多糖质量含量为85‑95％，蛋白质量含量为3‑7％，按如下方法制备：将中国被毛孢(Hirsutella sinensis)经发酵培养获得的发酵液离心，上清液经孔径为0.1μm‑0.45μm的膜预过滤，得到滤液A；滤液A采用孔径为0.001μm‑0.005μm的膜过滤，得到滤液B和含虫草菌丝体胞外多糖的截留液C，将滤液B通过仅允许水分子透过的反渗透膜进行回水利用，截留液C即得虫草菌丝体胞外多糖溶液。

【技术特征摘要】
1.一种虫草菌丝体胞外多糖功能饮料，其特征在于所述饮料由虫草菌丝体胞外多糖溶液、β-环糊精、三氯蔗糖和柠檬酸组成；所述β-环糊精用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为15-50g/30L，所述三氯蔗糖用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为5-30g/30L，所述柠檬酸用量以虫草菌丝体胞外多糖溶液体积计为5-40g/30L；所述虫草菌丝体胞外多糖溶液中多糖质量含量为85-95％，蛋白质量含量为3-7％，按如下方法制备：将中国被毛孢(Hirsutellasinensis)经发酵培养获得的发酵液离心，上清液经孔径为0.1μm-0.45μm的膜预过滤，得到滤液A；滤液A采用孔径为0.001μm-0.005μm的膜过滤，得到滤液B和含虫草菌丝体胞外多糖的截留液C，将滤液B通过仅允许水分子透过的反渗透膜进行回水利用，截留液C即得虫草菌丝体胞外多糖溶液。2.如权利要求1所述虫草菌丝体胞外多糖功能饮料，其特征在于所述虫草菌丝体胞外多糖溶液按如下方法制备：将中国被毛孢(Hirsutellasinensis)经发酵培养获得的发酵液离心，上清液经膜孔径为0.1μm-0.45μm的陶瓷管式膜预过滤，再将滤液经过孔径为0.01-0.1μm中空纤维膜进行二次过滤，获得滤液A1，滤液A1采用膜孔径为0.001μm-0.005μm的卷式膜过滤，得到滤液B和含虫草菌丝体胞外多糖的截留液C，将滤液B通过孔径为0.0001μm仅允许水分子透过的二级反渗...

【专利技术属性】
技术研发人员：何荣军，梁倩，苏为科，张岳，张薇，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33