FXR激动剂与凋亡抑制剂联用在制备优效抗肝纤维化药物中的应用制造技术

本发明专利技术设计生物医学领域。本发明专利技术提供了一项联用凋亡抑制剂和法尼醇X受体(Farnesoid XReceptor，FXR)激动剂进而发挥协同保肝抗纤维化作用的方案。具体的，本发明专利技术涉及一种针对慢性肝病形成重要阶段肝脏纤维化的治疗用药手段。在本发明专利技术中，提出联用FXR激动剂和凋亡抑制剂在制备优效保肝抗纤维化药物中的应用，具体的选用FXR激动剂奥贝胆酸和凋亡抑制剂IDN6556，二者在低剂量联用时即可显著降低血清中谷丙转氨酶水平，改善肝细胞结构形态和功能，减轻纤维化的症状，并且该联合用药保肝效果显著优于二者单用的效果。提供了一种新的优效的保肝抗纤维化药物制备方法。

Application of FXR agonist combined with apoptosis inhibitor in the preparation of effective anti fibrosis agents

The invention is designed for the field of biomedicine. The invention provides a combination of apoptosis inhibitors and Farnesoid XReceptor (FXR) X receptor (FXR) agonists to play a synergistic effect on liver protection against fibrosis. In particular, the invention relates to a method for treating liver fibrosis in the important stage of chronic liver disease. In the present invention, the application of combined FXR agonist and apoptosis inhibitor in the preparation of excellent liver protection and anti fibrosis drugs is proposed. The specific selection of FXR agonist, austat cholic acid and apoptosis inhibitor IDN6556, can significantly reduce the level of alanine transaminase in serum and improve the structure and function of liver cells in low dose combined use. Reduce the symptoms of fibrosis, and the combined effect of liver protection is significantly better than the two single use effect. It provides a new and effective method for the preparation of liver protective and anti fibrosis drugs.

【技术实现步骤摘要】
FXR激动剂与凋亡抑制剂联用在制备优效抗肝纤维化药物中的应用
本专利技术涉及医药领域。该专利技术涉及法尼醇X受体(FarnesoidXReceptor，FXR)激动剂与凋亡抑制剂联用在制备优效抗纤维化药物中的应用。具体的，本项目选用FXR激动剂奥贝胆酸(Obeticholicacid)和凋亡抑制剂IDN-6556。在CCl4诱导的小鼠肝脏纤维化模型中，二者联用具有显著增强的抗纤维化药效。技术背景肝纤维化(LiverFibrosis)是指以胶原物质为主的细胞外基质的沉积为主要成因的的一种损伤修复反应。肝纤维化是许多复杂肝病在体内形成的基础性阶段，是肝硬化的一个早期可逆阶段，不及时的治疗会导致失代偿期的肝硬化以及各种终末性的肝病和相关并发症。但是目前尚无抗纤维化的特效药物，因此寻找高活性的抗纤维化药物或药物组合是当前肝药的研发热点。肝纤维化的治疗策略方向在近数十年经历过巨大的更迭。目前的治疗策略和方向主要是降低已经激活的星状细胞(HepaticStellateCell，HSC)的数量或者减慢其激活的进程。在正常状态下HSC细胞处于静息状态，当受到外界的各种信号因子刺激后可被激活，激活之后的星状细胞会进而转化为肌成纤维细胞和成纤维细胞，直接导致纤维化的形成，因此HSC细胞的激活被公认是纤维化形成的中心环节，而阻断HSC细胞活化也被认为是抗肝纤维化的主要策略。另外，肝细胞凋亡在肝纤维化的形成和发展过程中具有重要作用。它是肝纤维化的早期病理变化，肝细胞自身的凋亡可以通过凋亡小体直接刺激HSCs的活化，已经凋亡的肝细胞会散发凋亡信号，诱导毗邻的静止期星状细胞吞噬凋亡小体，进而使其表型转化为肌成纤维细胞(FadokVA，CathelineauAD，DalekeDL，etal.Lossofphospholipidasymmetryandsurfaceexposureofphosphatidylserineisrequiredforphagocytosisofapoptoticcellsbymacrophagesandfibroblasts.[J].JournalofBiologicalChemistry，2001，276(2)：1071-7.)，凋亡后的肝细胞也可以通过凋亡小体诱导肝脏枯否细胞来完成对星状细胞的间接活化。可见，肝细胞的凋亡对肝脏纤维化的形成具有重要的意义。抗凋亡也被认为是保肝抗纤维化的重要策略。Caspase是重要的凋亡信号分子，介导了大多数的细胞凋亡过程。IDN-6556是一种广谱的Caspase抑制剂，并且可以显著抑制肝脏及其他组织内的细胞凋亡。在之前的一期临床实验中，IDN-6556可以显著降低肝脏内转氨酶的水平，缓解受试者的肝脏病变症状(PockrosPJ，SchiffER，ShiffmanML，etal.OralIDN-6556，anantiapoptoticcaspaseinhibitor，mayloweraminotransferaseactivityinpatientswithchronichepatitisC[J].Hepatology，2007，46(2)：324-9.)。在小鼠的纤维化模型中，胆管结扎之后的纤维化模型鼠的凋亡指标和炎症指标在IDN-6556之后得到降低，Caspase3/7阳性细胞的比率降低，同时α-SMA阳性细胞也显著减少，胶原沉积也显著减弱(CanbayA，FeldsteinA，BaskinbeyE，etal.ThecaspaseinhibitorIDN-6556attenuateshepaticinjuryandfibrosisinthebileductligatedmouse.[J].JournalofPharmacology&ExperimentalTherapeutics，2004，308(3)：1191-6.)；在大鼠局部缺血/再灌注模型中，IDN-6556的使用也同样降低了转氨酶的水平，并且肝脏功能得到恢复(CanbayA，FeldsteinA，BaskinbeyE，etal.ThecaspaseinhibitorIDN-6556attenuateshepaticinjuryandfibrosisinthebileductligatedmouse.[J].JournalofPharmacology&ExperimentalTherapeutics，2004，308(3)：1191-6)。综上，Caspase抑制剂可以通过抑制肝细胞凋亡，进而发挥保肝抗纤维化作用。法尼醇X受体(FarnesoidXReceptor，FXR)又称NR1H4(NuclearReceptorSubfamily1，GroupH，Member4)，是核受体超家族的一员。FXR在胆汁酸代谢，脂代谢，糖代谢等内稳态的维持中发挥关键的调控作用，另外FXR通路与病毒性肝炎，酒精性脂肪肝，肝纤维化，肝癌等肝病的发生发展密切相关。奥贝胆酸(Obeticholicacid)又名6-乙基鹅去氧胆酸，是人初级胆汁酸鹅去氧胆酸的一种新型衍生物，其对FXR的亲和力和激动效应比鹅去氧胆酸提高了100倍。2014年，Intercept公司公布的结果显示，奥贝胆酸对胆汁性肝硬化具有良好的疗效，且临床实验结果远超预期和其他同类的FXR配体化合物；其作为抗原发性胆汁性肝硬化药物已于2016年5月被美国FDA批准上市(MarkhamA，KeamSJ.ObeticholicAcid：FirstGlobalApproval.Drugs.2016Aug；76(12)：1221-6.)，而且美国FDA给予奥贝胆酸突破性疗法的认定。另外，奥贝胆酸目前还在进行对非酒精性脂肪肝的III期临床实验。奥贝胆酸作为以FXR为靶标研发的第一个成功上市的药物，得到广泛的关注。目前，中国专利申请第201510384385号公开了奥贝胆酸的化学合成方法，中国专利申请第201380043964号公开了奥贝胆酸的C型晶体。然而临床研究中发现，长时间服用较大剂量的奥贝胆酸，会引起胆固醇水平升高，高密度脂蛋白水平降低等多种不良反应。因此，为了避免这些不良反应，在临床应用时需降低奥贝胆酸的剂量，但是也面临着药效降低的风险。在本专利技术中，我们发现肝纤维化状态下大量肝细胞发生凋亡，尽管奥贝胆酸具有抗纤维化作用，但是对肝细胞凋亡却几乎没有影响，提示奥贝胆酸等FXR激动剂并非通过抗肝细胞凋亡途径进而发挥抗纤维化作用。因此，我们拟通过联用奥贝胆酸和IDN6556，通过激动FXR信号通路同时阻断肝细胞凋亡，协同发挥保肝抗纤维化作用。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的是提供优效保肝纤维化药物组合的方式，即将具备肝脏保护作用的FXR激动剂和可以抑制肝细胞凋亡的广谱凋亡抑制剂进行联用，以提供更好的纤维化治疗效果。具体的，我们选用FXR强效激动剂奥贝胆酸，选用广谱caspase抑制剂IDN6556，对比考察二者单用或者联用在CCl4诱导的小鼠肝纤维化的保护作用。为实现上述专利技术目的，本专利技术提供了如下技术方案：凋亡抑制剂和FXR激动剂发挥抗纤维化功能中可以发挥协同的积极作用；优选的，所述肝细胞凋亡抑制剂为广谱caspase抑制剂IDN-6556；优本文档来自技高网...

【技术保护点】
FXR激动剂与凋亡抑制剂联用在制备优效抗肝纤维化药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.FXR激动剂与凋亡抑制剂联用在制备优效抗肝纤维化药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所选用FXR激动剂为转录激活FXR的各种配体，包括但不仅限于奥贝胆酸，还包括各种内源性和外源性激动剂，如鹅去氧胆酸、GW4064等。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所选用凋亡抑制剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：郝海平，王洪，周济宇，王广基，郭怡彤，黄宁宁，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32