抗病菌的柑橘属植物组合物、生物体、系统和方法技术方案

根据一些实施方式，本发明专利技术涉及抗病菌的柑橘属植物组合物，生物体，系统和方法。例如，组合物可以包括肽(例如，防御素肽)和/或核酸(例如，防御素核酸)。在一些实施方式中，抗病菌的柑橘属植物可以包括防御素肽和/或编码防御素肽的可表达的核酸。

Antimicrobial citrus plant composition, organism, system and method

According to some embodiments, the invention relates to an antifungal citrus plant composition, organism, system and method. For example, the composition can include peptides (e.g. defensin peptides) and / or nucleic acids (e.g. defensin nucleic acids). In some embodiments, citrus plants with antimicrobial resistance can include defensin peptides and / or nucleic acids that express defensin peptides.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗病菌的柑橘属植物组合物、生物体、系统和方法相关申请的交叉引用本申请要求于2015年7月15日提交的美国申请NO.62/192,732的优先权，上述申请的全部内容在此通过引用并入本公开。
在一些实施方式中，本公开涉及抗病菌的柑橘属植物组合物，生物体，系统和方法。
技术介绍
目前，没有柑橘品种对细菌性溃疡(柑橘溃疡病菌(Xanthomonasaxonopodispv.citri))(Xac)，和/或由亚洲韧皮杆菌(CandidatusLiberibacterasiaticus)(Las)引起的柑橘黄龙病(维绿(ex-greening))有抗性。事实上，在柑橘属植物中从未发现过对这些微生物病菌的遗传抗性。致力于培育抗病品种的传统的杂交育种一直受到柑橘属植物的复杂的生殖生物学和长生命周期的阻碍。
技术实现思路
因此，出现了对具有改善的抗病性能的植物(例如柑橘属植物)的需求。对用于制备转基因植物(例如柑橘属植物)的改进的方法，组合物和系统也产生了进一步的需求。根据一些实施方式，本公开涉及抗病菌的柑橘属植物组合物，生物体，系统和方法。例如，组合物可以包含核酸(例如，防御素核酸(adefensinnucleicacid))。在一些实施方式中，核酸可以包括核酸序列，其(a)具有与防御素序列(例如，序列号3，4，5，6，9，10，11，12，29，46，47，48，49，50，51，52，53，54，55，56，57，和/或58)约75％至约100％的同一性和/或(b)编码与序列号1，2，7，8，28，32，33，34，35，36，37，和/或38具有约95％至约100％的同一性(例如，98％的同一性)的氨基酸序列。在一些实施方式中，核酸可以包括核酸序列，该核酸序列与从由序列号3和序列号5组成的组中选择的序列具有约98％的同一性，并且编码具有氨基酸序列的肽，该氨基酸序列与序列号1具有至少约99％的同一性。在一些实施方式中，核酸可以包括核酸序列，该核酸序列与从由序列号4和序列号6组成的组中选择的序列具有约98％的同一性，并且编码具有氨基酸序列的肽，该氨基酸序列与序列号2具有至少约99％的同一性。根据一些实施方式，核酸可以包括核酸序列，该核酸序列与从由序列号9和序列号11组成的组中选择的序列具有约98％的同一性，并且编码具有氨基酸序列的肽，该氨基酸序列与序列号7具有至少约99％的同一性。核酸可以包括核酸序列，该核酸序列与从由序列号10和序列号12组成的组中选择的序列具有约98％的同一性，并且编码具有氨基酸序列的肽，该氨基酸序列与序列号8具有至少约99％的同一性。在一些实施方式中，核酸可以包括核酸序列，该核酸序列与从由序列号46和序列号52组成的组中选择的序列具有约98％的同一性，并且编码具有氨基酸序列的肽，该氨基酸序列与序列号32具有至少约99％的同一性。根据一些实施方式，核酸可以包括核酸序列，该核酸序列与从由序列号47和序列号53组成的组中选择的序列具有约98％的同一性，并且编码具有氨基酸序列的肽，该氨基酸序列与序列号33具有至少约99％的同一性。在一些实施方式中，核酸可以包括核酸序列，该核酸序列与从由序列号48和序列号54组成的组中选择的序列具有约98％的同一性，并且编码具有氨基酸序列的肽，该氨基酸序列与序列号34具有至少约99％的同一性。根据一些实施方式，核酸可以包括核酸序列，该核酸序列与从由序列号55组成的组中选择的序列具有约98％的同一性，并且编码具有氨基酸序列的肽，该氨基酸序列与序列号35具有至少约99％的同一性。在一些实施方式中，核酸可以包括核酸序列，该核酸序列与从包括序列号49和序列号56组成的组中选择的序列具有约98％的同一性，并且编码具有氨基酸序列的肽，该氨基酸序列与序列号36具有至少约99％的同一性。根据一些实施方式，核酸可以包括核酸序列，该核酸序列与从由序列号50和序列号57组成的组中选择的序列具有约98％的同一性，并且编码具有氨基酸序列的肽，该氨基酸序列与序列号37具有至少约99％的同一性。在一些实施方式中，核酸可以包括核酸序列，该核酸序列与从由序列号51和序列号58组成的组中选择的序列具有约98％的同一性，并且编码具有氨基酸序列的肽，该氨基酸序列与序列号38具有至少约99％的同一性。本公开涉及与核苷酸序列和氨基酸序列，它们是(i)在自然界中没有发现的，或者(ii)在它们被引入的生物体中的自然界中没有发现。根据一些实施方式，与参考序列具有小于100％的同一性的任何核酸序列应该与相同大小的任何天然存在的核酸序列相差至少一个核苷酸(例如，通过替换，缺失或插入)。与参考序列具有小于100％的同一性的任何氨基酸序列应该与相同大小的任何天然存在的核酸序列相差至少一个氨基酸(例如，通过替换，缺失或插入)。在一些实施方式中，本公开涉及在柑橘属植物(如柑橘品种(citrusvarieties)，柑橘砧木(citrusrootstocks))中可操作的防御素表达载体。例如，表达载体在5'到3'的方位可以包含(a)表达控制序列；(b)可操作地链接至表达控制序列的可表达的核酸(例如，编码外源性多肽的核酸)；和(c)可操作地链接至可表达的核酸的3'终止序列。在一些实施方式中，外源性核酸可以包括核酸序列，该核酸序列与从由以下所组成的组中选择的核酸序列具有至少约75％的同一性(例如，至少约98％的同一性)：序列号3，序列号4，序列号5，序列号6，序列号9，序列号10，序列号11，序列号12，序列号29，序列号46，序列号47，序列号48，序列号49，序列号50，序列号51，序列号52，序列号53，序列号54，序列号55，序列号56，序列号57，以及序列号58。根据一些实施方式，表达载体可以位于细菌细胞或植物细胞中。在一些实施方式中，表达载体可以包括相对于编码序列(例如，由外源性核酸序列编码)在-4到4位的核苷酸序列AACAATGG。根据一些实施方式，表达载体可以包括具有约1到约200个核苷酸长度的接头(linker)(例如，3'表达控制序列和/或5'核酸(例如，编码外源性多肽的核酸)。在一些实施方式中，本公开涉及包括表达载体的细菌细胞。例如，细菌细胞可以包括表达载体，该表达载体在5'到3'的方位，包括(a)表达控制序列；(b)可操作地链接至表达控制序列的外源性核酸(例如，编码外源性多肽的核酸)；和(c)可操作地链接至可表达的核酸的3'终止序列。细菌细胞可以包括，例如，表达载体，该表达载体在5'到3'的方位，包括(a)表达控制序列；(b)可操作地链接至表达控制序列的外源性核酸；和/或(c)可操作地链接至外源性核酸的3'终止序列，其中，外源性核酸包括与从由以下所组成的组中选择的核酸序列具有至少约98％的同一性的核酸序列：序列号3，序列号4，序列号5，序列号6，序列号9，序列号10，序列号11，序列号12，序列号46，序列号47，序列号48，序列号49，序列号50，序列号51，序列号52，序列号53，序列号54，序列号55，序列号56，序列号57，以及序列号58。在一些实施方式中，本公开涉及包括表达载体的植物细胞(例如，柑橘属植物细胞)。例如，植物细胞(例如，柑橘属植物细胞)可以包括表达载体，该表达载体在5'到3'的方本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种柑橘类水果，包括至少一种防御素肽，所述至少一种防御素肽包括第一防御素肽，其中所述第一防御素肽的氨基酸序列与序列号32具有至少约95％的同一性，与序列号33具有至少约95％的同一性，与序列号34具有至少约95％的同一性，与序列号35具有至少约95％的同一性，与序列号36具有至少约95％的同一性，与序列号37具有至少约95％的同一性，或与序列号38具有至少约95％的同一性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.07.15 US 62/192,7321.一种柑橘类水果，包括至少一种防御素肽，所述至少一种防御素肽包括第一防御素肽，其中所述第一防御素肽的氨基酸序列与序列号32具有至少约95％的同一性，与序列号33具有至少约95％的同一性，与序列号34具有至少约95％的同一性，与序列号35具有至少约95％的同一性，与序列号36具有至少约95％的同一性，与序列号37具有至少约95％的同一性，或与序列号38具有至少约95％的同一性。2.根据权利要求1所述的柑橘类水果，其中所述第一防御素肽的氨基酸序列与序列号32的氨基酸序列具有至少约98％的同一性，与序列号33的氨基酸序列具有至少约98％的同一性，与序列号34的氨基酸序列具有至少约98％的同一性，与序列号35的氨基酸序列具有至少约98％的同一性，与序列号36的氨基酸序列具有至少约98％的同一性，与序列号37的氨基酸序列具有至少约98％的同一性，或与序列号38的氨基酸序列具有至少约98％的同一性。3.根据权利要求1所述的柑橘类水果，其中所述第一防御素肽的氨基酸序列与序列号32的氨基酸序列一致，与序列号33的氨基酸序列一致，与序列号34的氨基酸序列一致，与序列号35的氨基酸序列一致，与序列号36的氨基酸序列一致，与序列号37的氨基酸序列一致，或与序列号38的氨基酸序列一致。4.根据权利要求1所述的柑橘类水果，还包括第二防御素肽，其中所述第二防御素肽的氨基酸序列与序列号32具有至少约95％的同一性，与序列号33具有至少约95％的同一性，与序列号34具有至少约95％的同一性，与序列号35具有至少约95％的同一性，与序列号36具有至少约95％的同一性，与序列号37具有至少约95％的同一性，或与序列号38具有至少约95％的同一性。5.根据权利要求4所述的柑橘类水果，其中所述第二防御素肽的氨基酸序列与序列号32的氨基酸序列具有至少约98％的同一性，与序列号33的氨基酸序列具有至少约98％的同一性，与序列号34的氨基酸序列具有至少约98％的同一性，与序列号35的氨基酸序列具有至少约98％的同一性，与序列号36的氨基酸序列具有至少约98％的同一性，与序列号37的氨基酸序列具有至少约98％的同一性，或与序列号38的氨基酸序列具有至少约98％的同一性。6.根据权利要求4所述的柑橘类水果，其中所述第二防御素肽的氨基酸序列与序列号32的氨基酸序列一致，与序列号33的氨基酸序列一致，与序列号34的氨基酸序列一致，与序列号35的氨基酸序列一致，与序列号36的氨基酸序列一致，与序列号37的氨基酸序列一致，或与序列号38的氨基酸序列一致。7.根据权利要求4所述的柑橘类水果，其中所述第一防御素肽的氨基酸序列与所述第二防御素肽的氨基酸序列不同。8.根据权利要求1所述的柑橘类水果，还包括第二柑橘属植物防御素肽，其中第二防御素肽的氨基酸序列与序列号1具有至少约98％的同一性，与序列号2具有至少约98％的同一性，与序列号7具有至少约98％的同一性，或与序列号8具有至少约98％的同一性。9.根据权利要求1所述的柑橘类水果，其中所述水果为橙子，葡萄柚，柠檬或来檬。10.一种柑橘类水果，包括(a)至少一种菠菜防御素肽或(b)至少一种菠菜防御素核酸或(c)至少一种菠菜防御素肽以及至少一种菠菜防御素核酸。11.一种柑橘类水果，包括至少一种防御素核酸，所述至少一种防御素核酸包括第一防御素核酸，其中所述第一防御素核酸的核酸序列与序列号46具有至少约98％的同一性，与序列号47具有至少约98％的同一性，与序列号48具有至少约98％的同一性，与序列号49具有至少约98％的同一性，与序列号50具有至少约98％的同一性，与序列号51具有至少约98％的同一性，与序列号52具有至少约98％的同一性，与序列号53具有至少约98％的同一性，与序列号54具有至少约98％的同一性，与序列号55具有至少约98％的同一性，与序列号56具有至少约98％的同一性，与序列号57具有至少约98％的同一性，或与序列号58具有至少约98％的同一性。12.根据权利要求11所述的柑橘类水果，其中第一核酸的核酸序列与序列号46具有至少约99％的同一性，与序列号47具有至少约99％的同一性，与序列号48具有至少约99％的同一性，与序列号49具有至少约99％的同一性，与序列号50具有至少约99％的同一性，与序列号51具有至少约99％的同一性，与序列号52具有至少约99％的同一性，与序列号53具有至少约99％的同一性，与序列号54具有至少约99％的同一性，与序列号55具有至少约99％的同一性，与序列号56具有至少约99％的同一性，与序列号57具有至少约99％的同一性，或与序列号58具有至少约99％的同一性。13.根据权利要求11所述的柑橘类水果，其中第一核酸的核酸序列与序列号46的核酸序列一致，与序列号47的核酸序列一致，与序列号48的核酸序列一致，与序列号49的核酸序列一致，与序列号50的核酸序列一致，与序列号51的核酸序列一致，与序列号52的核酸序列一致，与序列号53的核酸序列一致，与序列号54的核酸序列一致，与序列号55的核酸序列一致，与序列号56的核酸序列一致，与序列号57的核酸序列一致，或与序列号58的核酸序列一致。14.根据权利要求11所述的柑橘类水果，还包括第二防御素核酸，其中所述第二防御素核酸的核酸序列与序列号46具有至少约98％的同一性，与序列号47具有至少约98％的同一性，与序列号48具有至少约98％的同一性，与序列号49具有至少约98％的同一性，与序列号50具有至少约98％的同一性，与序列号51具有至少约98％的同一性，与序列号52具有至少约98％的同一性，与序列号53具有至少约98％的同一性，与序列号54具有至少约98％的同一性，与序列号55具有至少约98％的同一性，与序列号56具有至少约98％的同一性，与序列号57具有至少约98％的同一性，或与序列号58具有至少约98％的同一性。15.根据权利要求11所述的柑橘类水果，还包括第二防御素核酸，其中所述第二防御素核酸的核酸序列与序列号46具有至少约99％的同一性，与序列号47具有至少约99％的同一性，与序列号48具有至少约99％的同一性，与序列号49具有至少约99％的同一性，与序列号50具有至少约99％的同一性，与序列号51具有至少约99％的同一性，与序列号52具有至少约99％的同一性，与序列号53具有至少约99％的同一性，与序列号54具有至少约99％的同一性，与序列号55具有至少约99％的同一性，与序列号56具有至少约99％的同一性，与序列号57具有至少约99％的同一性，或与序列号58具有至少约99％的同一性。16.根据权利要求11所述的柑橘类水果，还包括第二防御素核酸，其中所述第二防御素核酸的核酸序列与序列号46一致，与序列号47一致，与序列号48一致，与序列号49一致，与序列号50一致，与序列号51一致，与序列号52一致，与序列号53一致，与序列号54一致，与序列号55一致，与序列号56一致，与序列号57一致，或与序列号58一致。17.根据权利要求14所述的柑橘类水果，其中所述第一防御素核酸的核酸序列与所述第二防御素核酸的核酸序列不同。18.根据权利要求11所述的柑橘类水果，还包括第二防御素核酸，其中所述第二防御素肽的核酸序列与序列号3具有至少约98％的同一性，与序列号4具有至少约98％的同一性，与序列号5具有至少约98％的同一性，与序列号6具有至少约98％的同一性，与序列号9具有至少约98％的同一性，与序列号10具有至少约98％的同一性，与序列号11具有至少约98％的同一性，或与序列号12具有至少约98％的同一性。19.根据权利要求11所述的柑橘类水果，其中所述水果为橙子，葡萄柚，柠檬或来檬。20.一种柑橘属植物组合物，包括至少一种防御素肽，所述至少一种防御素肽包括第一防御...

【专利技术属性】
技术研发人员：T·E·米尔可夫，K·K·曼达迪，
申请(专利权)人：德克萨斯AM大学系统，
类型：发明
国别省市：美国,US