一种从刺五加中提取刺五加甙的新方法技术

本发明专利技术应用超声波微波双辅助纯化刺五加甙，对刺五加甙的吸附选择性良好，吸附快解析也快，吸附容量较大；提取方便快捷，生产成本低廉，分离效果明显，提取纯度高，可以得到含量90％以上的刺五加甙，克服了常规提取率相对较低、提取纯度低的缺点。本发明专利技术选用理化性质稳定、表面积较大、交换速度较快、机械强度高、抗污染能力强、热稳定性好的聚酰胺树脂吸附色谱法，对有机物选择性较好，不受无机盐类及强离子低分子化合物存在的影响，可以通过物理吸附从溶液中有选择地吸附桑黄素，吸附快、解析也快，吸附容量较大。

A new method for extracting Acanthopanax Glucoside from Acanthopanax senticosus

The invention uses ultrasonic microwave double auxiliary purification of Acanthopanax, the adsorption selectivity of Acanthopanax senticosus is good, the adsorption fast analysis is fast, the adsorption capacity is large, the extraction is convenient, quick, the production cost is low, the separation effect is obvious, the extraction purity is high, the content of acanthopanin can be more than 90%, and the conventional extraction rate is overcome. The disadvantages of relatively low and low extraction purity. The invention uses polyamide resin adsorption chromatography with stable physicochemical properties, large surface area, high exchange speed, high mechanical strength, strong anti pollution ability and good thermal stability. It has good selectivity to organic compounds and is free from the presence of inorganic salts and strong ion low molecular compounds. It can be physically adsorbed from the solution by physical adsorption. Selective adsorption of morin has fast adsorption, fast resolution and large adsorption capacity.

【技术实现步骤摘要】
一种从刺五加中提取刺五加甙的新方法
：本专利技术属于天然有机化学领域，涉及一种刺五加甙的纯化方法，特别是涉及一种从刺五加中提取刺五加甙的新方法。
技术介绍
：刺五加，灌木，高1-6米；分枝多，一、二年生的通常密生刺，稀仅节上生刺或无刺；刺直而细长，针状，下向，基部不膨大，脱落后遗留圆形刺痕，叶有小叶5，稀3；叶柄常疏生细刺，长3-10厘米；小叶片纸质，椭圆状倒卵形或长圆形，长5-13厘米，宽3-7厘米，先端渐尖，基部阔楔形，上面粗糙，深绿色，脉上有粗毛，下面淡绿色，脉上有短柔毛，边缘有锐利重锯齿，侧脉6-7对，两面明显，网脉不明显；小叶柄长0.5-2.5厘米，有棕色短柔毛，有时有细刺。伞形花序单个顶生，或2-6个组成稀疏的圆锥花序，直径2-4厘米，有花多数；总花梗长5-7厘米，无毛；花梗长1-2厘米，无毛或基部略有毛；花紫黄色；萼无毛，边缘近全缘或有不明显的5小齿；花瓣5，卵形，长-2毫米；雄蕊5，长1.5-2毫米；子房5室，花柱全部合生成柱状。果实球形或卵球形，有5棱，黑色，直径7-8毫米，宿存花柱长1.5-1.8毫米。花期6-7月，果期8-10月。刺五加，拉丁名称：RadixAcanthopanacisSenticosl，英文名称：ManyprickleAcathopanaxRoot，中文学名：刺五加、五加参，第二学名：AcanthopanaxExtract，别名：五加皮、刺拐棒(中国东北)，俗名：Ciwujia，科属：五加科五加属，使用部位：根和根状茎，生于山坡林中及路旁灌丛中；药圃常有栽培。分布于华中、华东、华南和西南。根皮祛风湿、强筋骨，泡酒制五加皮酒(或制成五加皮散)。根皮含挥发油、鞣质、棕桐酸、亚麻仁油酸、维生素A，B1。具有益气健脾，补肾安神。用于脾肾阳虚、体虚乏力、食欲不振、腰膝酸痛、失眠多梦的功效。刺五加甙具有明显抗疲劳，抗辐射，抗应激，耐缺氧，提高机体对温度变化的适应力，解毒作用；还能改善大脑皮质的兴奋、抑制过程，提高脑力劳动效能；还有抗心律失常、改善大脑供血量、调节血压，止咳、祛痰、抗炎、抗菌和抗病毒等作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服常规技术提取率相对较低、提取纯度低等缺点，提供一种从刺五加中提取刺五加甙的新方法。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：一种从刺五加中提取刺五加甙的新方法，其步骤如下：(1)将刺五加粉碎至40-80目，加入发酵液，用70％甲醇浸提，用超声波和微波双辅助，提取液减压浓缩，得刺五加初提液；(2)将所得溶液上大孔树脂吸附，型号为DA201、D101、HPD300、AB-8、LX-100树脂中的一种；(3)在常温常压下，以1BV/h流速，先用蒸馏水洗脱，洗脱体积为3-5BV，洗掉刺五加水溶液中的色素、鞣质、无机盐类等水溶性杂质；(4)再用70％-95％的乙醇溶液在1-3BV/h流速、洗脱体积为6-8BV下进行洗脱，洗脱液用薄层层析跟踪监测；(5)收集乙醇洗脱液浓缩，回收乙醇，减压干燥，得到含量为65％以上刺五加半成品粗粉；(6)将所得刺五加粗粉溶于醋酸乙酯加适量硅胶搅拌，烘干过60-80目筛，干法上样，上工业级柱200-300目硅胶柱层析，并以氯仿-甲醇或石油醚-乙酸乙酯溶液以95～85∶2比例进行洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集刺五加各阶段洗脱液；所述的步骤(1)中，发酵液组成为：酵母粉0.5％，KH2PO40.2％，MgSO40.1％；最适培养条件为：500mL摇瓶量140mL，接种量10％，转速200r/min，温度35℃，初始pH5.8。在此条件下发酵7-10天。所述的步骤(1)中，70％甲醇浸提料液比1∶20-1∶30g/mL、30-40℃超声处理30min、微波功率200-400W、微波时间3-5min；所述的步骤(6)中，聚酰胺树脂吸附色谱法动态吸附上样量1∶55-1∶75、上样浓度2.100mg/mL、吸附流速和解析流速均为1mL/min、吸附时间60min、75％乙醇作为洗脱剂；本专利技术应用超声波微波双辅助纯化刺五加甙，对刺五加甙的吸附选择性良好，吸附快解析也快，吸附容量较大；提取方便快捷，生产成本低廉，分离效果明显，提取纯度高，可以得到含量90％以上的剌五加甙，克服了常规提取率相对较低、提取纯度低的缺点。本专利技术选用理化性质稳定、表面积较大、交换速度较快、机械强度高、抗污染能力强、热稳定性好的聚酰胺树脂吸附色谱法，对有机物选择性较好，不受无机盐类及强离子低分子化合物存在的影响，可以通过物理吸附从溶液中有选择地吸附桑黄素，吸附快、解析也快，吸附容量较大。具体实施方式：实施例1：一种从刺五加中提取刺五加甙的新方法，其步骤如下：(1)将刺五加粉碎至40目，加入发酵液，用70％甲醇浸提，料液比1∶30g/mL，45℃超声处理30min和微波功率400W、微波时间3min双辅助。提取液减压浓缩，得刺五加初提液；(2)将所得溶液上大孔树脂吸附，型号为LX-100树脂；(3)在常温常压下，以1BV/h流速，先用蒸馏水洗脱，洗脱体积为3-5BV，洗掉刺五加水溶液中的色素、鞣质、无机盐类等水溶性杂质；(4)再用70％、75％、80％、85％、90％、95％的乙醇溶液在1-3BV/h流速、洗脱体积为6-8BV下进行洗脱，洗脱液用薄层层析跟踪监测；(5)收集乙醇洗脱液浓缩，回收乙醇，减压干燥，得到含量为65.7％刺五加半成品粗粉；(6)将所得刺五加粗粉溶于醋酸乙酯加适量硅胶搅拌，烘干过80目筛，干法上样，上工业级柱200-300目硅胶柱层析，并以氯仿-甲醇以95∶2比例进行洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集刺五加各阶段洗脱液；用高效液相色谱法检测可得刺五加甙91.3％实施案例2：一种从刺五加中提取刺五加甙的新方法，其步骤如下：(1)将刺五加粉碎至60目，加入发酵液，用70％甲醇浸提，料液比1∶20g/mL，45℃超声处理30min和微波功率400W、微波时间5min双辅助。提取液减压浓缩，得刺五加初提液；(2)将所得溶液上大孔树脂吸附，型号为LX-100树脂；(3)在常温常压下，以1BV/h流速，先用蒸馏水洗脱，洗脱体积为3-5BV，洗掉刺五加水溶液中的色素、鞣质、无机盐类等水溶性杂质；(4)再用70％、75％、80％、85％、90％、95％的乙醇溶液在1-3BV/h流速、洗脱体积为6-8BV下进行洗脱，洗脱液用薄层层析跟踪监测；(5)收集乙醇洗脱液浓缩，回收乙醇，减压干燥，得到含量为63.1％刺五加半成品粗粉；(6)将所得刺五加粗粉溶于醋酸乙酯加适量硅胶搅拌，烘干过60目筛，干法上样，上工业级柱200-300目硅胶柱层析，并以氯仿-甲醇以90∶2比例进行洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集刺五加各阶段洗脱液；用高效液相色谱法检测可得刺五加甙90.7％实施案例3：一种从刺五加中提取刺五加甙的新方法，其步骤如下：(1)将刺五加粉碎至80目，加入发酵液，用70％甲醇浸提，料液比1∶25g/mL，45℃超声处理30min和微波功率400W、微波时间5min双辅助。提取液减压浓缩，得刺五加初提液；(2)将所得溶液上大孔树脂吸附，型号为AB-8树脂；(3)在常温常压下，以1BV/h流速，先用蒸馏水洗脱，洗脱体积为3-5BV，洗掉刺五加水溶液中的色素、鞣质、无机盐类等本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从刺五加中提取刺五加甙的新方法，其步骤如下：(1)将刺五加粉碎至40‑80目，加入发酵液，用70％甲醇浸提，用超声波和微波双辅助，提取液减压浓缩，得刺五加初提液；(2)将所得溶液上大孔树脂吸附，型号为DA201、D101、HPD300、AB‑8、LX‑100树脂中的一种；(3)在常温常压下，以1BV/h流速，先用蒸馏水洗脱，洗脱体积为3‑5BV，洗掉刺五加水溶液中的色素、鞣质、无机盐类等水溶性杂质；(4)再用70％‑95％的乙醇溶液在1‑3BV/h流速、洗脱体积为6‑8BV下进行洗脱，洗脱液用薄层层析跟踪监测；(5)收集乙醇洗脱液浓缩，回收乙醇，减压干燥，得到含量为65％以上刺五加半成品粗粉；(6)将所得刺五加粗粉溶于醋酸乙酯加适量硅胶搅拌，烘干过60‑80目筛，干法上样，上工业级柱200‑300目硅胶柱层析，并以氯仿‑甲醇或石油醚‑乙酸乙酯溶液以95～85∶2比例进行洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集刺五加各阶段洗脱液；所述的步骤(1)中，发酵液组成为：酵母粉0.5％，KH2PO40.2％，MgSO40.1％；最适培养条件为：500mL摇瓶量140mL，接种量10％，转速200r/min，温度35℃，初始pH5.8。在此条件下发酵7‑10天；所述的步骤(1)中，70％甲醇浸提料液比1∶20‑1∶30g/mL、30‑40℃超声处理30min、微波功率200‑400W、微波时间3‑5min；所述的步骤(6)中，聚酰胺树脂吸附色谱法动态吸附上样量1∶55‑1∶75、上样浓度2.100mg/mL、吸附流速和解析流速均为1mL/min、吸附时间60min、75％乙醇作为洗脱剂。...

【技术特征摘要】
1.一种从刺五加中提取刺五加甙的新方法，其步骤如下：(1)将刺五加粉碎至40-80目，加入发酵液，用70％甲醇浸提，用超声波和微波双辅助，提取液减压浓缩，得刺五加初提液；(2)将所得溶液上大孔树脂吸附，型号为DA201、D101、HPD300、AB-8、LX-100树脂中的一种；(3)在常温常压下，以1BV/h流速，先用蒸馏水洗脱，洗脱体积为3-5BV，洗掉刺五加水溶液中的色素、鞣质、无机盐类等水溶性杂质；(4)再用70％-95％的乙醇溶液在1-3BV/h流速、洗脱体积为6-8BV下进行洗脱，洗脱液用薄层层析跟踪监测；(5)收集乙醇洗脱液浓缩，回收乙醇，减压干燥，得到含量为65％以上刺五加半成品粗粉；(6)将所得刺五加粗粉溶于醋酸乙酯加适量硅胶搅拌，烘干过60-80目筛，干法上样，上工业级...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚德坤，邹静，李玉伟，万莉，王雷，
申请(专利权)人：大兴安岭林格贝寒带生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23