一种黑果腺肋花楸嫩芽诱导培养方法技术

本发明专利技术公开了一种黑果腺肋花楸嫩芽诱导培养方法，包括如下步骤：选定所要培养的黑果腺肋花楸植株，生长期剪取健壮无病虫害的嫩枝，经无菌处理，接种到诱导培养基上，在适合光温条件下进行诱导培养，经过愈伤组织诱导、丛生芽诱导，形成无菌离体芽，建立无菌条件下初代培养体系，为下一步的继代培养提供基础材料。本发明专利技术材料简单易得，各环节容易操作，培养条件可控，结果可重复性强，成本低，利于推广和投入生产，对推进黑果腺肋花楸优良种苗快繁具有重要实践意义。

A method of induction and culture of the tender bud of Sorbus nigra

The invention discloses a method of inducing and cultivating the tender bud of Sorbus nigra. The following steps are as follows: selecting the plant of the black fruit gland of the black fruit gland, cutting the young shoots of the strong and sturdy insects during the growing period, inoculating it on the inducible medium by aseptic treatment, and inducing the culture under the conditions of light and temperature, and inducing the callus through the callus. Induced and clustered buds were induced to form aseptic detached buds, and the initial culture system under sterile conditions was established to provide basic materials for the next subculture. The material is simple and easy to get, easy to operate in each link, controllable conditions, strong repeatability and low cost, which is beneficial to popularize and put into production. It is of great practical significance to promote the rapid propagation of fine seeds and seedlings of the black fruit gland.

【技术实现步骤摘要】
一种黑果腺肋花楸嫩芽诱导培养方法
本专利技术涉及农业和花木栽培领域，具体涉及一种黑果腺肋花楸(AroniameLanocarpa)无菌诱导丛生芽方法。
技术介绍
黑果腺肋花楸是蔷薇科腺肋花楸属的一个树种，是从国外引进的树种，简称黑果花楸、黑果、不老莓、野樱莓等，落叶灌木，树高1.5-2.5m，丛状树形，用于园林绿化、浆果栽培。黑果腺肋花楸适合东北地区冬季寒冷的气候，近几年栽培面积不断扩大，种苗缺乏，尤其品种纯正的种苗稀缺。采用植物组织培养技术快速生产种苗是解决种苗需求量大、短期不能繁殖出足够需要难题的最佳选择。由于黑果腺肋花楸引进国内时间较短，组培育苗实用技术处于空白状况，尤其建立无菌诱导体系这一环节尤为重要，初代诱导培养是继代快繁的基础，需要大量试验才能筛选出最佳技术措施。目前东北地区栽种黑果花楸的农民和企业较多，需要优良种苗量预计达几千万株以上，靠分株和扦插方法提供种苗不能满足市场需要，种苗短缺制约了黑果花楸产业发展。
技术实现思路
在多年试验基础上，本专利技术提供了一种黑果腺肋花楸嫩芽诱导培养方法，确保了黑果腺肋花楸组培苗快繁技术的开展，为继代培养提供充足无菌材料，节约大量的摸索时间。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种黑果腺肋花楸嫩芽诱导培养方法，包括如下步骤：确定要扩繁的黑果腺肋花楸植株区域，从其中选择根系强壮、枝干粗壮、结果量大、无病虫害的植株选为采集外植体母树，在生长期4-8月或休眠期，取一健壮枝条长枝段，完成预处理后，在超净工作台内，无菌条件下，取嫩芽，少带木质部，置于酒精中消毒20秒后，置于戊二醛溶液内浸泡，用无菌水冲洗，接种到培养基上，在智能培养箱中进行诱导培养20天。优选地，所述健壮枝条长枝段在清晨时间采集，剪切下来后立即用塑料袋保湿包装好，快速拿到实验室进行无菌处理。优选地，具体包括如下步骤：S1、确定要扩繁的黑果腺肋花楸植株区域，从其中选择根系强壮、枝干粗壮、结果量大、无病虫害的植株选为采集外植体母树，在5-8月份，处于植株生长期，选择半木质化的健壮枝条，在早晨水分饱满时剪取，在流水下冲洗枝条1小时，放肥皂水中浸泡10分钟，再放流水下冲洗20分钟后，用无菌水冲洗枝条，剪成3厘米长短段，放无菌水中浸泡，移入超净工作台紫外光下预消毒30分钟；S2、在超净工作台内，无菌条件下，剪取嫩芽，少带枝条木质部，置于体积分数为70％的酒精中消毒20秒后，放入20g/L戊二醛溶液中浸泡10分钟；用无菌水冲洗3遍，切去木质化部分，剥去外层叶片，将嫩芽接种到诱导培养基中，插入培养基0.3-0.5厘米深，直立插入，每瓶一个嫩芽；S3、将接种后的培养瓶置于智能培养箱中进行诱导培养20天，可见嫩芽切口处生出愈伤组织，嫩芽基部长出3-5个新芽，选成功诱导出丛生芽或茎段的培养瓶用于转瓶培养，进入继代培养阶段；培养条件设置为白天温度控制在22-24℃，夜晚温度控制在20℃，光照强度控制在1500Lx，每天光照12小时，白天给光，夜晚避光。优选地，所述诱导培养基通过以下方法制备：采用MS基本培养基，添加蔗糖30g/L，琼脂粉6g/L，6-BA(6苄基嘌呤)2.0g/L，NAA(萘乙酸)0.2g/L，pH6.5，灌装入50mL培养瓶中，培养基厚度控制在1cm。优选地，所要采集外植体的植株需提前15d不喷施药物和肥料，正常浇水管理。本专利技术具有以下有益效果：本专利技术材料简单易得，各环节容易操作，培养条件可控，结果可重复性强，成本低，利于推广和投入生产；诱导培养是植物组织培养的关键环节，摸索耗时长，无菌操作需要熟练人员开展，在此专利技术步骤指导下，能在2个月内进入无菌苗体系启动环节。该专利技术使用范围大，技术规范，利于规模化生产，为继代培养、生根培养做好了基础工作。个人和公司均可使用，利于工厂化生产，也可继续开展快繁试验。对于解决东北地区黑果腺肋花楸种苗紧缺问题，提供了技术保障。具体实施方式为了使本专利技术的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1一种黑果腺肋花楸嫩芽诱导培养方法，包括如下步骤：将要扩繁的黑果腺肋花楸植株选为采集外植体母树，在生长期剪切顶梢20厘米长枝段，在流水下冲洗，剪成3厘米长段，在超净工作台内，无菌条件下，剪取嫩芽，少带枝条木质部，放酒精中消毒20秒，接着放入戊二醛溶液中浸泡10分钟，用无菌水冲洗，接种到培养基，MS+蔗糖30g/L+琼脂粉6g/L+6-BA(6苄基嘌呤)2.0g/L+NAA(萘乙酸)0.2g/L，在智能培养箱中进行诱导培养20天。实施例2一种黑果腺肋花楸嫩芽诱导培养方法，包括如下步骤：将要扩繁的黑果腺肋花楸植株选为采集外植体母树，在休眠期剪切1年生枝条30厘米长枝段，移入温室内水插培养，塑料膜扣棚保温保湿，待新芽萌发后剪切下来，在流水下冲洗，浸入无菌水中放在超净工作台内，无菌条件下，剥取嫩芽，少带木质部，放酒精中消毒20秒，接着放入戊二醛溶液中浸泡10分钟，用无菌水冲洗，接种到培养基，MS+蔗糖30g/L+琼脂粉6g/L+6-BA(6苄基嘌呤)2.0g/L+NAA(萘乙酸)0.2g/L，在智能培养箱中进行诱导培养20天。以上所述仅是本专利技术的优选实施方式，应当指出，对于本
的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种黑果腺肋花楸嫩芽诱导培养方法，其特征在于，包括如下步骤：确定要扩繁的黑果腺肋花楸植株区域，从其中选择根系强壮、枝干粗壮、结果量大、无病虫害的植株选为采集外植体母树，在生长期4‑8月或休眠期，取一健壮枝条长枝段，完成预处理后，在超净工作台内，无菌条件下，取嫩芽，少带木质部，置于酒精中消毒20秒后，置于戊二醛溶液内浸泡，用无菌水冲洗，接种到培养基上，在智能培养箱中进行诱导培养20天。

【技术特征摘要】
1.一种黑果腺肋花楸嫩芽诱导培养方法，其特征在于，包括如下步骤：确定要扩繁的黑果腺肋花楸植株区域，从其中选择根系强壮、枝干粗壮、结果量大、无病虫害的植株选为采集外植体母树，在生长期4-8月或休眠期，取一健壮枝条长枝段，完成预处理后，在超净工作台内，无菌条件下，取嫩芽，少带木质部，置于酒精中消毒20秒后，置于戊二醛溶液内浸泡，用无菌水冲洗，接种到培养基上，在智能培养箱中进行诱导培养20天。2.如权利要求1所述的一种黑果腺肋花楸嫩芽诱导培养方法，其特征在于，所述健壮枝条长枝段在清晨时间采集，剪切下来后立即用塑料袋保湿包装好，快速拿到实验室进行无菌处理。3.如权利要求1所述的一种黑果腺肋花楸嫩芽诱导培养方法，其特征在于，具体包括如下步骤：S1、确定要扩繁的黑果腺肋花楸植株区域，从其中选择根系强壮、枝干粗壮、结果量大、无病虫害的植株选为采集外植体母树，在5-8月份，处于植株生长期，选择半木质化的健壮枝条，在早晨水分饱满时剪取，在流水下冲洗枝条1小时，放肥皂水中浸泡10分钟，再放流水下冲洗20分钟后，用无菌水冲洗枝条，剪成3厘米长短段，放无菌水中浸泡，移入超净工作台紫外光下预消...

【专利技术属性】
技术研发人员：鞠志新，陈君，史春凤，范文忠，
申请(专利权)人：吉林农业科技学院，
类型：发明
国别省市：吉林,22