小麦基因Yr10分子标记及其在筛选抗小麦条锈病小麦中的应用制造技术

本发明专利技术提供了小麦基因Yr10分子标记及其在抗小麦条锈病中的应用，属于小麦育种技术领域。小麦基因Yr10分子标记，其特征在于，所述Yr10分子标记具有如序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。所述分子标记与小麦抗条锈病基因Yr10完全连锁，命名为Xsdau79。通过检测所述分子标记能够得到小麦基因Yr10是否存在，从而确定小麦品种是否具有抗条锈病的特点。本发明专利技术提供的分子标记能够准确、快速的鉴定抗条锈病基因Yr10，因此本发明专利技术提供了所述的引物在筛选抗条锈病小麦中的应用。

Wheat Yr10 gene marker and its application in screening wheat stripe rust resistant wheat

The invention provides wheat gene Yr10 molecular marker and its application in wheat stripe rust resistance, and belongs to the field of wheat breeding technology. The wheat gene Yr10 molecular marker is characterized by that the Yr10 molecular marker has a nucleotide sequence shown in SEQ SEQ ID No.1. The molecular marker is completely linked to wheat stripe rust resistance gene Yr10, named Xsdau79. The presence of wheat gene Yr10 can be detected by detecting the molecular markers, so as to determine whether wheat varieties have the characteristics of stripe rust resistance. The molecular markers provided by the present invention can accurately and quickly identify the anti stripe rust gene Yr10, thus the present invention provides the application of the primers to the screening of stripe rust resistant wheat.

【技术实现步骤摘要】
小麦基因Yr10分子标记及其在筛选抗小麦条锈病小麦中的应用
本专利技术属于小麦育种
，具体涉及小麦基因Yr10分子标记及其在筛选抗小麦条锈病小麦中的应用。
技术介绍
小麦(TriticumaestivumL.)是我国第二大粮食作物，常年种植面积2400万公顷以上，总产量约1.2亿吨，占粮食作物产量的20％。因此，小麦生产对于我国粮食安全以及经济发展具有重要作用。小麦条锈病由条形柄锈菌(Pucciniastriiformisf.sp.tritici，Pst)引起，主要发生在小麦叶片部位，其次危害小麦叶鞘和茎秆，偶尔蔓延到穗部颖壳和麦芒。小麦条锈病菌喜凉怕热，在凉爽的气候条件下保持活性并繁殖，主要依赖夏孢子往返传播，在小麦上完成周年的侵染循环。菌丝生长和产孢需要从小麦体内汲取水分和营养，影响叶片的光合能力，导致小麦减产。小麦条锈病是一种典型的气传病害可随高空气流远距离传播，在全球多数麦区均有发生，流行性强、发生区域广、危害性大。另外，小麦条锈菌变异速度快，频繁形成新的小种，导致小麦品种的抗病性丧失。我国是小麦生产大国，小麦条锈病的发生普遍，常导致小麦的大幅度减产，严重威胁着我国的粮食安全。化学杀菌剂的使用是防治小麦条锈病危害的重要方法。比如农药代森锌、氟钡化合物、六氟硅酸二钠、磺胺吡啶酸钠、磺胺吡啶酸和波尔多混合液等来控制小麦条锈病的蔓延，对防治小麦条锈病起到了一定作用，但增加了小麦生产成本，加重了环境负担。培育和应用新的抗病品种是防治小麦条锈病最经济、有效、安全的方法。只有实现小麦品种抗病基因使用的多样化，小麦条锈菌的变异和流行才可能被抑制。利用分子标记开展辅助选择，实现多个抗病基因的聚合，对于培育持久抗病品种具有重要作用。小麦抗条锈病基因Yr10基因发现于土耳其小麦PI78383，具有小麦全生育期抗条锈性，对我国目前流行的几乎所有条锈小种都呈现抗性，具有重要的利用价值。该基因定位于小麦1BS染色体，并且已有前人报道NBS-LRR基因(Genbank登录号AF149113)为Yr10基因。然而，我们发现我国许多携带该基因的小麦品种表现感病(Yuanetal.,2012)，而且通过基因定位发现该候选基因Yr10CG(AF149113)与Yr10位点相距1.2cM遗传距离。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供小麦基因Yr10分子标记及其在筛选抗小麦条锈病小麦中的应用，所述分子标记具有快速、准确和高效的特点，辅助选择育种，大大提高育种效率。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了小麦基因Yr10分子标记，所述Yr10分子标记具有如序列表中SEQIDNo.1所示的核苷酸序列。本专利技术提供了用于扩增小麦基因Yr10分子标记的巢式PCR引物，由第一对引物和第二对引物组成，第一对引物包括sdau79-1BF7和sdau79-1BR7；第二对引物包括WJZ104/Xsdau79-F和WJZ104/Xsdau79-R；所述sdau79-1BF7具有如序列表中SEQIDNo.2所示的核苷酸序列；所述sdau79-1BR7具有如序列表中SEQIDNo.3所示的核苷酸序列；所述WJZ104/Xsdau79-F具有如序列表中SEQIDNo.4所示的核苷酸序列；所述WJZ104/Xsdau79-R具有如序列表中SEQIDNo.5所示的核苷酸序列。本专利技术提供了所述的引物在筛选抗条锈病小麦中的应用。在本专利技术中，所述筛选的方法，优选包括以下步骤：1)提取待检测小麦材料的DNA；2)以所述DNA为模板，用所述引物中的sdau79-1BF7与sdau79-1BR7进行第一轮PCR，得到第一轮PCR产物；3)以所述第一轮PCR产物为模板，用所述引物中的WJZ104/Xsdau79-F和WJZ104/Xsdau79-R进行第二轮PCR，得到第二轮PCR产物；4)将所述第二轮PCR产物进行电泳，若得到459bp的电泳条带，表明检测小麦材料为抗条锈病小麦品种。优选的，所述步骤2)中第一轮PCR的反应程序为94℃预变性5min；94℃变性30s；60℃退火30s；72℃延伸1min35s；38个循环；72℃延伸10min。优选的，所述步骤3)中第二轮PCR的反应程序为94℃预变性5min；94℃变性30s；60℃退火30s；72℃延伸30s；38个循环；72℃延伸10min。优选的，所述步骤2)和步骤3)中PCR的反应体系独立为100ng/μL的模板DNA1μL，2xMasterMix10μL，10μmol/Lsdau79-1BF7或WJZ104/Xsdau79-F1μL，10μmol/Lsdau79-1BR7或WJZ104/Xsdau79-R1μL，ddH2O7μL。本专利技术提供了小麦基因Yr10分子标记，所述基因Yr10分子标记具有如序列表中SEQIDNo.1所示的核苷酸序列。本专利技术提供的分子标记与之前报道的Yr10CG(AF149113)相距1.2cM，而与真正的Yr10位点紧密连锁。因此，将该标记用于Yr10基因的分子标记辅助选择育种可显著提高选择效率。本专利技术提供了用于扩增小麦基因Yr10分子标记的巢式PCR引物，两对引物具有扩增特异性高的特点，能够准确扩增得到所述基因Yr10分子标记。本专利技术提供了所述的引物在筛选抗条锈病小麦中的应用。采用巢式PCR法筛选抗条锈病小麦，阳性植株即含有Yr10基因的小麦材料为459bp大小的电泳带。阴性植株即不含有Yr10基因的小麦材料为512bp大小的电泳带。通过电泳条带能够准确快速筛选抗条锈病小麦材料。附图说明图1为实施例1中Yr10基因定位群体中24个个体的基因型；图2为实施例1中Yr10基因定位群体中的表型图；图3为实施例1中Yr10基因的遗传连锁图谱；图4为实施例2中小麦基因Yr10分子标记PCR扩增电泳图。具体实施方式本专利技术提供了本专利技术提供了小麦基因Yr10分子标记，所述Yr10分子标记具有如序列表中SEQIDNo.1所示的核苷酸序列。在本专利技术中，所述小麦基因Yr10分子标记与小麦基因Yr10完全连锁，保证了检测的准确性。本专利技术提供了用于扩增小麦基因Yr10分子标记的巢式PCR引物，由第一对引物和第二对引物组成，第一对引物包括sdau79-1BF7和sdau79-1BR7；第二对引物包括WJZ104/Xsdau79-F和WJZ104/Xsdau79-R；所述sdau79-1BF7具有如序列表中SEQIDNo.2所示的核苷酸序列；所述sdau79-1BR7具有如序列表中SEQIDNo.3所示的核苷酸序列；所述WJZ104/Xsdau79-F具有如序列表中SEQIDNo.4所示的核苷酸序列；所述WJZ104/Xsdau79-R具有如序列表中SEQIDNo.5所示的核苷酸序列。在本专利技术中，所述第一对引物和第二对引物的来源没有特殊限制，委托本领域所熟知的序列合成公司合成即可。本专利技术提供了上述技术方案所述的引物在筛选抗条锈病小麦中的应用。在本专利技术中，所述筛选的方法，优选包括以下步骤：1)提取待检测小麦材料的DNA；2)以所述DNA为模板，用所述引物中的sdau79-1BF7与sdau79-1BR7进行第一轮PCR，得到第一轮PCR产物；3)以所述第一轮PCR产物为模板，用所本文档来自技高网...

【技术保护点】
小麦基因Yr10分子标记，其特征在于，所述Yr10分子标记具有如序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.小麦基因Yr10分子标记，其特征在于，所述Yr10分子标记具有如序列表中SEQIDNo.1所示的核苷酸序列。2.用于扩增小麦基因Yr10分子标记的巢式PCR引物，由第一对引物和第二对引物组成，其特征在于，第一对引物包括sdau79-1BF7和sdau79-1BR7；第二对引物包括WJZ104/Xsdau79-F和WJZ104/Xsdau79-R；所述sdau79-1BF7具有如序列表中SEQIDNo.2所示的核苷酸序列；所述sdau79-1BR7具有如序列表中SEQIDNo.3所示的核苷酸序列；所述WJZ104/Xsdau79-F具有如序列表中SEQIDNo.4所示的核苷酸序列；所述WJZ104/Xsdau79-R具有如序列表中SEQIDNo.5所示的核苷酸序列。3.权利要求2所述的引物在筛选抗条锈病小麦中的应用。4.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述筛选的方法，包括以下步骤：1)提取待检测小麦材料的DNA；2)以所述DNA为模板，用权利要求2所述引物中的sdau79-1BF7与sdau79-1BR7进行第一轮PCR，得到第一轮PCR产物；3)以所述第...

【专利技术属性】
技术研发人员：苑翠玲，吴佳洁，闫百蔷，吴竞争，吕波，倪飞，付道林，
申请(专利权)人：山东农业大学，
类型：发明
国别省市：山东,37