一种环糊精接枝改性聚苹果酸的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种环糊精接枝改性聚苹果酸的制备方法，步骤如下：步骤一、取聚苹果酸菌株接种到平板上，在25℃‑29℃中培养2‑4小时，挑取单菌落进行活化；步骤二、种子培养，将上述活化中的菌种接种到种子培养基，培养温度为26℃，转速为300转/分钟，培养时间为48小时；步骤三、扩大培养，将种子液按照10%的接种量在扩大培养基中进行培养，温度为26℃，转速为300转/分钟，培养时间为72小时；步骤四、将扩大培养液按照5%的接种量接种到发酵罐中培养，培养温度为30℃，培养时间为10天，发酵转速为300转/分钟；步骤五、取发酵液，离心收集细胞，用氯仿水浴加热，离心取上清液，抽干氯仿，制得聚苹果酸。

A preparation method of cyclodextrin grafted poly malic acid

The invention discloses a preparation method of cyclodextrin graft modified polymalic acid. Steps are as follows: Step 1, inoculating the polymalic acid strain on the plate, cultivating a single colony for 4 hours at 25 degrees centigrade for 4 hours, and picking up a single colony for activation; step two, seed culture, inoculating the above activated bacteria to the seed medium and culture. The temperature was 26 C, the speed was 300 rpm / min, the culture time was 48 hours; step three and expanded culture, the seed liquid was cultured in the expanded medium according to 10% inoculation, the temperature was 26 C, the speed was 300 / min, the culture time was 72 hours; step four, the expanded culture liquid was inoculated in 5% inoculation amount. In the fermentation tank, the culture temperature was 30 C, the culture time was 10 days, the fermentation speed was 300 rpm; step five, the fermentation liquid was collected, the cells were collected, the chloroform bath was heated, the supernatant was centrifuged, the chloroform was extracted and the polymalic acid was prepared.

【技术实现步骤摘要】
一种环糊精接枝改性聚苹果酸的制备方法
本专利技术涉及一种聚苹果酸。
技术介绍
心脏支架(Stent)又称冠状动脉支架，是心脏介入手术中常用的医疗器械，具有疏通动脉血管的作用。主要材料为不锈钢、镍钛合金或钴铬合金。现有的金属支架容易导致血管再狭窄。在一种新型的支架中，将抗血栓和抗增生药物包裹于心脏支架上，植入支架后，药物缓慢释放，可以增加局部的药物浓度，减少副作用，降低再狭窄率。现有的药物载体一般有生物降解和不可降解高分子材料，在生物降低高分子材料中，药物的释放率低，有效时间短。现在常用的可降解材料载体有聚乳酸、聚乙醇酸等，还有最近研究较多的聚谷氨酸，同它们相比，聚苹果酸具有独特的优点。聚乳酸、聚乙醇酸等都是水不溶性，交联的药物分子在体内释放的很缓慢，影响药效。聚谷氨酸等吸水性太强，容易崩解，对于其药效也有影响。聚苹果酸的侧基含有很多的羧基，易溶于水，而且羧基可以与药物集团中有毒性的侧基结合，降低其毒性。当聚合物分子进入体内后，羧基可以作为水解催化的基点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于：针对上述存在的问题，提供一种环糊精接枝改性聚苹果酸，制备的步骤如下：步骤一、取聚苹果酸菌株接种到平板上，在25℃-29℃中培养2-4小时，挑取单菌落进行活化；步骤二、种子培养，将上述活化中的菌种接种到种子培养基，培养温度为26℃，转速为300转/分钟，培养时间为48小时；步骤三、扩大培养，将种子液按照10%的接种量在扩大培养基中进行培养，温度为26℃，转速为300转/分钟，培养时间为72小时；步骤四、将扩大培养液按照5%的接种量接种到发酵罐中培养，培养温度为30℃，培养时间为10天，发酵转速为300转/分钟；步骤五、取发酵液，离心收集细胞，用氯仿水浴加热，离心取上清液，抽干氯仿，制得聚苹果酸；步骤六、将6-醛基化的β-环糊精、制备的苹果酸溶于羧酸盐溶液中，搅拌，加入硼氢化钠在室温搅拌一小时，反应后用水淬灭，溶解在乙酸乙酯中，过滤，滤液用水，饱和盐水洗涤，后来又用饱和碳酸氢钠、5%氢氧化钠洗涤，用乙酸乙酯萃取，旋干得产品；步骤七、将上述产品溶解在水中，用半透膜过滤截留分子量为10000的产品透析，获得透析液，干燥制得环糊精接枝改性后的聚苹果酸。作为改进，所述种子培养基按照重量份包括：蒸馏水100份，葡萄糖1-5份、硫酸钾：0.1-1份、硫酸钠0.01-0.1份。作为改进，所述的扩大培养基按照重量份包括：蒸馏水100份，葡萄糖2-4份、硫酸钾：0.1-1份、硫酸钠0.01-0.1份。作为改进，所述的发酵培养液按照重量份包括：蒸馏水100份、葡萄糖0.1-2份、酵母膏0.1-3份。作为改进，所述的环糊精和聚苹果酸重复单位的摩尔比为1:10。作为改进，所述的发酵培养液的PH值为7。本专利技术公开的聚苹果酸一方面具有良好的生物相容性和可降解性，同时引入环糊精的接枝基团，能够充分利用环糊精的包埋能力，形成一定的网状结构，具有优异的包埋效果，能够延长药物释放时间、提高释放效率。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。具体实施例1：一种环糊精接枝改性聚苹果酸，制备的步骤如下：步骤一、取聚苹果酸菌株接种到平板上，在25℃中培养2小时，挑取单菌落进行活化；步骤二、种子培养，将上述活化中的菌种接种到种子培养基，培养温度为26℃，转速为300转/分钟，培养时间为48小时；步骤三、扩大培养，将种子液按照10%的接种量在扩大培养基中进行培养，温度为26℃，转速为300转/分钟，培养时间为72小时；步骤四、将扩大培养液按照5%的接种量接种到发酵罐中培养，培养温度为30℃，培养时间为10天，发酵转速为300转/分钟；步骤五、取发酵液，离心收集细胞，用氯仿水浴加热，离心取上清液，抽干氯仿，制得聚苹果酸；步骤六、将6-醛基化的β-环糊精、制备的苹果酸溶于羧酸盐溶液中，搅拌，加入硼氢化钠在室温搅拌一小时，反应后用水淬灭，溶解在乙酸乙酯中，过滤，滤液用水，饱和盐水洗涤，后来又用饱和碳酸氢钠、5%氢氧化钠洗涤，用乙酸乙酯萃取，旋干得产品；步骤七、将上述产品溶解在水中，用半透膜过滤截留分子量为10000的产品透析，获得透析液，干燥制得环糊精接枝改性后的聚苹果酸。所述种子培养基按照重量份包括：蒸馏水100份，葡萄糖1份、硫酸钾：0.1份、硫酸钠0.01份。所述的扩大培养基按照重量份包括：蒸馏水100份，葡萄糖2份、硫酸钾：0.1份、硫酸钠-0.1份。所述的发酵培养液按照重量份包括：蒸馏水100份、葡萄糖0.1份、酵母膏0.1份。所述的环糊精和聚苹果酸重复单位的摩尔比为1:10，所述的发酵培养液的PH值为7。将本实施例的聚苹果酸涂抹在心脏支架上，在涂层中在加入雷帕霉素（RAPM）后，将支架植入人体的第一周10%的雷帕霉素被释放，第四周后，释放量为20%，两个月后，释放量为30，三个月后，释放量为40%，半年后释放量为80%，一年的释放量为99%。以上所述仅为本专利技术的较佳实施例而已，并不用以限制本专利技术，凡在本专利技术的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种环糊精接枝改性聚苹果酸的制备方法，步骤如下：步骤一、取聚苹果酸菌株接种到平板上，在25℃‑29℃中培养2‑4小时，挑取单菌落进行活化；步骤二、种子培养，将上述活化中的菌种接种到种子培养基，培养温度为26℃，转速为300转/分钟，培养时间为48小时；步骤三、扩大培养，将种子液按照10%的接种量在扩大培养基中进行培养，温度为26℃，转速为300转/分钟，培养时间为72小时；步骤四、将扩大培养液按照5%的接种量接种到发酵罐中培养，培养温度为30℃，培养时间为10天，发酵转速为300转/分钟；步骤五、取发酵液，离心收集细胞，用氯仿水浴加热，离心取上清液，抽干氯仿，制得聚苹果酸；步骤六、将6‑醛基化的β‑环糊精、制备的苹果酸溶于羧酸盐溶液中，搅拌，加入硼氢化钠在室温搅拌一小时，反应后用水淬灭，溶解在乙酸乙酯中，过滤，滤液用水，饱和盐水洗涤，后来又用饱和碳酸氢钠、5%氢氧化钠洗涤，用乙酸乙酯萃取，旋干得产品；步骤七、将上述产品溶解在水中，用半透膜过滤截留分子量为10000的产品透析，获得透析液，干燥制得环糊精接枝改性后的聚苹果酸。

【技术特征摘要】
1.一种环糊精接枝改性聚苹果酸的制备方法，步骤如下：步骤一、取聚苹果酸菌株接种到平板上，在25℃-29℃中培养2-4小时，挑取单菌落进行活化；步骤二、种子培养，将上述活化中的菌种接种到种子培养基，培养温度为26℃，转速为300转/分钟，培养时间为48小时；步骤三、扩大培养，将种子液按照10%的接种量在扩大培养基中进行培养，温度为26℃，转速为300转/分钟，培养时间为72小时；步骤四、将扩大培养液按照5%的接种量接种到发酵罐中培养，培养温度为30℃，培养时间为10天，发酵转速为300转/分钟；步骤五、取发酵液，离心收集细胞，用氯仿水浴加热，离心取上清液，抽干氯仿，制得聚苹果酸；步骤六、将6-醛基化的β-环糊精、制备的苹果酸溶于羧酸盐溶液中，搅拌，加入硼氢化钠在室温搅拌一小时，反应后用水淬灭，溶解在乙酸乙酯中，过滤，滤液用水，饱和盐水洗涤，后来又用饱和碳酸氢钠、5%氢氧化钠洗涤，用乙酸乙酯萃取，旋干得产品；步骤七、将上述产品溶解在...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑浩，
申请(专利权)人：成都测迪森生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51