抗ITGa3抗体、可活化抗ITGa3抗体及其使用方法技术

本发明专利技术总体涉及结合ITGa3的抗体、特异性结合ITGa3的可活化抗体和制备这些抗ITGa3抗体和抗ITGa3可活化抗体的方法以及在各种治疗、诊断和预防适应症中使用这些抗ITGa3抗体和抗ITGa3可活化抗体的方法。

Anti ITGa3 antibody, activable anti ITGa3 antibody and its use method

The present invention relates to antibodies, specific binding of ITGa3 can be prepared by these methods of anti ITGa3 antibody and anti ITGa3 antibody and antibody activation and activation of ITGa3 in various kinds of treatment, diagnosis and prevention of indications in the use of these anti ITGa3 antibody and anti ITGa3 antibody method can activate the.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗ITGa3抗体、可活化抗ITGa3抗体及其使用方法相关申请本申请要求于2015年5月4日提交的美国临时申请号62/156,839；和2015年11月23日提交的美国临时申请号62/258,870的权益，所述申请各自内容以其整体通过引用并入本文。专利
本专利技术总体涉及结合ITGa3的抗体、特异性结合ITGa3的可活化抗体和制备这些抗ITGa3抗体和抗ITGa3可活化抗体的方法以及在各种治疗、诊断和预防适应症中使用这些抗ITGa3抗体和抗ITGa3可活化抗体的方法。专利技术背景基于抗体的疗法已经证明是几种疾病的有效治疗，但在一些情况下，由于广泛的靶标表达导致的毒性已限制了它们的治疗有效性。此外，基于抗体的治疗剂已经表现出其他限制，诸如施用后从循环中快速清除。在小分子治疗剂的领域，已经开发了提供活性化学实体的前药的策略。此类前药以相对无活性(或显著较低活性)的形式施用。一旦施用，前药在体内代谢成活性化合物。此类前药策略可以提供药物对其预定靶标的增加的选择性和副作用的减少。因此，在基于抗体的治疗剂的领域中继续需要模拟小分子前药的所需特征的抗体。专利技术概述本专利技术提供了特异性结合整联蛋白α3(ITGa3)(也称为traCD49C；GAP-B3；GAPB3；ILNEB；MSK18；VCA-2；VL3A；VLA3a)的抗体、单克隆抗体(mAb)、抗原结合片段和可活化单克隆抗体。本文中的术语“ITGa3”的使用旨在覆盖其任何变型，诸如，通过非限制性实例的方式，ITGa-3、ITGa3、ITGA-3、ITGa3、ITG-a3、ITGA3、ITGA3、ITG-A3、ITGα3、ITG-α3、ITGα3，并且所有变型在本文中可互换使用。在一些实施方案中，所述抗体、单克隆抗体、抗原结合片段和可活化单克隆抗体被含有CD71的细胞内化。在一些实施方案中，所述抗体包括特异性结合ITGa3的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，结合ITGa3的抗体或其抗原结合片段是单克隆抗体、结构域抗体、单链、Fab片段、F(ab’)2片段、scFv、scAb、dAb、单一结构域重链抗体或单一结构域轻链抗体。在一些实施方案中，此类结合ITGa3的抗体或其抗原结合片段是小鼠、其他啮齿动物、嵌合、人源化或全人单克隆抗体。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含选自SEQIDNO:1和3-10的重链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含选自SEQIDNO:3-10的重链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含选自SEQIDNO:7-10的重链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区氨基酸序列SEQIDNO:10。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含选自SEQIDNO:2、11和12的轻链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含选自SEQIDNO:11和12的轻链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区氨基酸序列SEQIDNO:11。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含选自SEQIDNO:1和3-10的重链可变区氨基酸序列和选自SEQIDNO:2、11和12的轻链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含选自SEQIDNO:3-10的重链可变区氨基酸序列和选自SEQIDNO:11和12的轻链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含选自SEQIDNO:7-10的重链可变区氨基酸序列和轻链可变区氨基酸序列SEQIDNO:11。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区氨基酸序列SEQIDNO:10和轻链可变区氨基酸序列SEQIDNO:11。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含与选自SEQIDNO:1和3-10的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的重链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含与选自SEQIDNO:3-10的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的重链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含与选自SEQIDNO:7-10的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的重链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含与SEQIDNO:10的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的重链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含与选自SEQIDNO:2、11和12的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的轻链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含与选自SEQIDNO:11和12的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的轻链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含与氨基酸序列SEQIDNO:11具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的轻链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段含有与选自SEQIDNO:1和3-10的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的重链可变区氨基酸序列，和与选自SEQIDNO:2、11和12的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的轻链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段含有与选自SEQIDNO:3-10的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的重链可变区氨基酸序列，和与选自SEQIDNO:11和12的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的轻链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段含有与选自SEQIDNO:7-10的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的重链可变区氨基酸序列，和与氨基酸序列SEQIDNO:11具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的轻链可变区氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段含有与氨基酸序列SEQIDNO:10具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的重链可变区氨基酸序列，和与氨基酸序列SEQIDNO:11具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的轻本文档来自技高网...

【技术保护点】
分离的抗体或其抗原结合片段(AB)，其特异性结合哺乳动物ITGa3，其中所述AB特异性结合人ITGa3和食蟹猴ITGa3。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.05.04 US 62/156839;2015.11.23 US 62/2588701.分离的抗体或其抗原结合片段(AB)，其特异性结合哺乳动物ITGa3，其中所述AB特异性结合人ITGa3和食蟹猴ITGa3。2.分离的抗体或其抗原结合片段，其特异性结合哺乳动物ITGa3，其中所述AB特异性结合人ITGa3和食蟹猴ITGa3，其中所述抗体含有包含氨基酸序列EYIIH(SEQIDNO:13)的VHCDR1；包含氨基酸序列WFYPESGSVKYNETFKG(SEQIDNO:14)或WFYPESGSVKYSETFKG(SEQIDNO:15)或WFYPESGSVKYNEAFKG(SEQIDNO:16)或WFYPESGSVKYNEGFKG(SEQIDNO:17)的VHCDR2；包含氨基酸序列HEERDYYGYYAMDY(SEQIDNO:18)的VHCDR3；包含氨基酸序列SASSSISSNYLH(SEQIDNO:19)的VLCDR1；包含氨基酸序列RTSNLA(SEQIDNO:20)的VLCDR2；和包含氨基酸序列QQGSSIPRFT(SEQIDNO:21)的VLCDR3，且其中所述分离的抗体或其抗原结合片段是人源化的。3.权利要求1或权利要求2的分离的抗体，其中所述抗体含有包含氨基酸序列EYIIH(SEQIDNO:13)的VHCDR1；包含氨基酸序列WFYPESGSVKYNEGFKG(SEQIDNO:17)的VHCDR2；包含氨基酸序列HEERDYYGYYAMDY(SEQIDNO:18)的VHCDR3；包含氨基酸序列SASSSISSNYLH(SEQIDNO:19)的VLCDR1；包含氨基酸序列RTSNLA(SEQIDNO:20)的VLCDR2；和包含氨基酸序列QQGSSIPRFT(SEQIDNO:21)的VLCDR3。4.权利要求1-3中任一项的分离的抗体，其中所述抗体或其抗原结合片段含有包含选自SEQIDNO:3-10的氨基酸序列的重链可变区，和包含选自SEQIDNO:11和12的氨基酸序列的轻链可变区。5.分离的抗体或其抗原结合片段(AB)，其中所述AB与权利要求1-4中任一项的分离的抗体结合人ITGa3和/或食蟹猴ITGa3上相同的表位。6.分离的抗体或其抗原结合片段(AB)，其中所述AB与权利要求1-4中任一项的分离的抗体交叉竞争结合人ITGa3和/或食蟹猴ITGa3。7.权利要求4-6中任一项的分离的抗体，其中所述AB含有包含选自SEQIDNO:10的氨基酸序列的重链可变区，和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的轻链可变区。8.可活化抗体，其在活化状态下结合ITGa3，所述可活化抗体包含：特异性结合哺乳动物ITGa3的抗体或其抗原结合片段(AB)，其中所述AB特异性结合人ITGa3和食蟹猴ITGa3；掩蔽部分(MM)，当所述可活化抗体在未切割状态下时，所述掩蔽部分(MM)抑制AB与ITGa3的结合；和与所述AB偶联的可切割部分(CM)，其中所述CM是作为蛋白酶的底物发挥功能的多肽。9.权利要求8的可活化抗体，其中所述AB包含权利要求1-7中任一项的抗体或其抗原结合片段。10.权利要求8或权利要求9的可活化抗体，其中所述MM与AB结合的解离常数大于AB与ITGa3的解离常数。11.权利要求8-10中任一项的可活化抗体，其中当所述可活化抗体在切割状态下时，所述MM不干扰或竞争AB结合ITGa3。12.权利要求8-11中任一项的可活化抗体，其中所述MM是不多于40个氨基酸长的多肽。13.权利要求8-12中任一项的可活化抗体，其中MM多肽序列不同于人ITGa3的多肽序列。14.权利要求8-13中任一项的可活化抗体，其中所述MM多肽序列与AB的任何天然结合配偶体具有不多于50%同一性。15.权利要求8-14中任一项的可活化抗体，其中所述MM包含选自SEQIDNO:22-54的氨基酸序列。16.权利要求8-15中任一项的可活化抗体，其中所述CM是在患病组织中有活性的蛋白酶的底物。17.权利要求8-16中任一项的可活化抗体，其中所述CM包含选自SEQIDNO:182-249和276-316的氨基酸序列。18.权利要求8-17中任一项的可活化抗体，其中所述CM包含选自SEQIDNO:232-249和294-316的氨基酸序列。19.权利要求1-7中任一项的抗体或权利要求8-18中任一项的可活化抗体，其中其抗原结合片段选自Fab片段、F(ab’)2片段、scFv、scAb、dAb、单结构域重链抗体和单结构域轻链抗体。20.权利要求1-7中任一项的抗体或权利要求8-19中任一项的可活化抗体，其中所述AB特异性结合人ITGa3。21.权利要求8-20中任一项的可活化抗体，其中AB含有包含氨基酸序列EYIIH(SEQIDNO:13)的VHCDR1；包含氨基酸序列WFYPESGSVKYNETFKG(SEQIDNO:14)或WFYPESGSVKYSETFKG(SEQIDNO:15)或WFYPESGSVKYNEAFKG(SEQIDNO:16)或WFYPESGSVKYNEGFKG(SEQIDNO:17)的VHCDR2；包含氨基酸序列HEERDYYGYYAMDY(SEQIDNO:18)的VHCDR3；包含氨基酸序列SASSSISSNYLH(SEQIDNO:19)的VLCDR1；包含氨酸序列RTSNLA(SEQIDNO:20)的VLCDR2；和包含氨基酸序列QQGSSIPRFT(SEQIDNO:21)的VLCDR3。22.权利要求8-21中任一项的可活化抗体，其中所述AB含有包含选自SEQIDNO:3-10的氨基酸序列的重链可变区，和包含选自SEQIDNO:11和12的氨基酸序列的轻链可变区。23.权利要求8-22中任一项的可活化抗体，其中所述AB与所述CM连接。24.权利要求23的可活化抗体，其中所述AB与所述CM直接连接。25.权利要求23的可活化抗体，其中所述AB经由连接肽与所述CM连接。26.权利要求8-25中任一项的可活化抗体，其中所述MM与所述CM连接，使得未切割状态下的可活化抗体包含如下的N-末端至C-末端的结构排列：MM-CM-AB或AB-CM-MM。27.权利要求26的可活化抗体，其中所述可活化抗体包含在MM和CM之间的连接肽。28.权利要求26或权利要求27的可活化抗体，其中所述可活化抗体包含在CM和AB之间的连接肽。29.权利要求26-28中任一项的可活化抗体，其中所述可活化抗体包含第一连接肽(LP1)和第二连接肽(LP2)，且其中未切割状态下的可活化抗体具有如下的N-末端至C-末端的结构排列：MM-LP1-CM-LP2-AB或AB-LP2-CM-LP1-MM。30.权利要求29的可活化抗体，其中两个连接肽不需要彼此相同。31.权利要求29或权利要求30的可活化抗体，其中LP1和LP2各自是约1-20个氨基酸长的肽。32.权利要求8-31中任一项的可活化抗体，其中所述可活化抗体包含SEQIDNO:3-10和320的重链序列和包含选自以下的氨基酸序列的轻链：SEQIDNO:11、12、255、257、259、261、324、326、328、330和332-475。33.权利要求8-32中任一项的可活化抗体，其中所述可活化抗体包含氨基酸序列的组合，其中所述氨基酸序列的组合选自表D中的单行，其中对于给定组合，(a)AB的重链包含对应于表D中所列的单行中的给定组合的VHCDR序列的氨基酸序列，(b)AB的轻链包含对应于表D中所列的单行中的给定组合的VLCDR序列的氨基酸序列，(c)MM包含对应于表D中所列的单行中的给定组合的掩蔽序列(MM)的氨基酸序列，和(d)CM包含对应于表D中所列的单行中的给定组合的底物序列(CM)的氨基酸序列。34.权利要求8-33中任一项的可活化抗体，其中所述可活化抗体包含氨基酸序列的组合，其中对于氨基酸序列的给定组合，(a)AB的重链包含选自表E的相应列中所列的VH序列或VHCDR序列的VH序列或VHCDR序列的氨基酸序列，(b)AB的轻链包含选自表E的相应列中所列的VL序列或VLCDR序列的VL序列或VLCDR序列的氨基酸序列，(c)MM包含选自表E的相应列中所列的掩蔽序列(MM)的MM序列的氨基酸序列，和(d)CM包含选自表E的相应列中所列的底物序列(CM)的CM序列的氨基酸序列。35.可活化抗体，其包含特异性结合哺乳动物ITGa3的抗体或其抗原结合片段(AB)、MM和CM，其中所述可活化抗体包含：包含SEQIDNO:3-10或320的氨基酸序列的重链；和包含选自以下的氨基酸序列的轻链序列：SEQIDNO:11、12、255、257、259、261、324、326、328、330和332-475。36.可活化抗体，其在活化状态下结合ITGa3，所述可活化抗体包含：特异性结合哺乳动物ITGa3的抗体或其抗原结合片段(AB)；包含选自SEQIDNO:22-54的氨基酸序列的MM；和包含选自SEQIDNO:182-249和276-316的氨基酸序列的CM。37.权利要求36的可活化抗体，其中所述CM包含选自SEQIDNO:232-249和294-316的氨基酸序列。38.权利要求36或权利要求37的可活化抗体，其中所述AB含有包含氨基酸序列EYIIH(SEQIDNO:13)的VHCDR1；包含氨基酸序列WFYPESGSVKYNETFKG(SEQIDNO:14)或WFYPESGSVKYSETFKG(SEQIDNO:15)或WFYPESGSVKYNEAFKG(SEQIDNO:16)或WFYPESGSVKYNEGFKG(SEQIDNO:17)的VHCDR2；包含氨基酸序列HEERDYYGYYAMDY(SEQIDNO:18)的VHCDR3；包含氨基酸序列SASSSISSNYLH(SEQIDNO:19)的VLCDR1；包含氨基酸序列RTSNLA(SEQIDNO:20)的VLCDR2；和包含氨基酸序列QQGSSIPRFT(SEQIDNO:21)的VLCDR3。39.权利要求36或权利要求37的可活化抗体，其中所述AB包含选自SEQIDNO:1和3-10的重链可变区氨基酸序列，和包含选自SEQIDNO:11、12和396-475的氨基酸序列的轻链可变区。40.可活化抗体，其在活化状态下结合ITGa3，所述可活化抗体包含：特异性结合哺乳动物ITGa3的抗体或其抗原结合片段(AB)，其中所述AB与权利要求1-7中任一项的分离的抗体结合人ITGa3和/或食蟹猴ITGa3上相同的表位；掩蔽部分(MM)，当所述可活化抗体在未切割状态下时，所述掩蔽部分(MM)抑制AB与ITGa3的结合；和与所述AB偶联的可切割部分(CM)，其中所述CM是作为蛋白酶的底物发挥功能的多肽。41.可活化抗体，其在活化状态下结合ITGa3，所述可活化抗体包含：特异性结合哺乳动物ITGa3的抗体或其抗原结合片段(AB)，其中所述AB与权利要求1-7中任一项的分离的抗体特异性交叉竞争结合人ITGa3和/或食蟹猴ITGa3，掩蔽部分(MM)，当所述可活化抗体在未切割状态下时，所述掩蔽部分(MM)抑制AB与ITGa3的结合；和与所述AB偶联的可切割部分(CM)，其中所述CM是作为蛋白酶的底物发挥功能的多肽。42.缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其包含与试剂缀合的权利要求1至7中任一项的抗体或与试剂缀合的权利要求6至34中任一项的可活化抗体。43.权利要求42的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述试剂是毒素或其片段。44.权利要求42或权利要求43的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述试剂是微管抑制剂。45.权利要求42或权利要求43的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述试剂是核酸损伤剂。46.权利要求36的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述试剂选自多拉司他汀或其衍生物、澳瑞他汀或其衍生物、美登素或其衍生物、倍癌霉素或其衍生物、卡里奇霉素或其衍生物和吡咯并苯并二氮杂䓬或其衍生物。47.权利要求42-44和46中任一项的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述试剂是澳瑞他汀E或其衍生物。48.权利要求42-44和46中任一项的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述试剂是单甲基澳瑞他汀E(MMAE)。49.权利要求42-44和46中任一项的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述试剂是单甲基澳瑞他汀D(MMAD)。50.权利要求42-44和46中任一项的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述试剂是单甲基澳瑞他汀F(MMAF)。51.权利要求42-44和46中任一项的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述试剂是选自DM1和DM4的美登素。52.权利要求42-44和46中任一项的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述试剂是美登素DM4。53.权利要求42、43、45和46中任一项的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述试剂是倍癌霉素。54.权利要求42-53中任一项的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述试剂经由接头与所述AB缀合。55.权利要求42-54中任一项的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述试剂经其缀合至所述AB的所述接头包含SPDB部分、vc部分或PEG2-vc部分。56.权利要求42-55中任一项的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中缀合至所述AB的接头和毒素包含SPDB-DM4部分、vc-MMAD部分、vc-MMAE部分、vc-倍癌霉素部分或PEG2-vc-MMAD部分。57.权利要求54的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述接头是可切割接头。58.权利要求54的缀合的抗体或缀合的可活化抗体，其中所述接头是不可切...

【专利技术属性】
技术研发人员：JG萨格特，JA特雷特，LR德斯诺耶斯，S辛格，AY威维，
申请(专利权)人：西托姆克斯治疗公司，
类型：发明
国别省市：美国,US