一种间充质干细胞修复注射液及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种间充质干细胞修复注射液及其制备方法，该注射液由间充质干细胞微球和注射混合液组成，所述间充质干细胞微球由间充质干细胞和微球载体组成，所述微球载体主要由丙烯碳酸酯、蛋氨酸和普鲁兰‑聚丙烯酸交联物组成，每mL所述注射混合液中含有0.5×10

An mesenchyme stem cell repair injection and its preparation method

The present invention provides a kind of mesenchymal stem cells for repair of injection and its preparation method, the injection by mesenchymal stem cells and microspheres injection of mixed liquid, the microspheres mesenchymal stem cells from mesenchymal stem cells and microspheres. The microspheres composed of propylene carbonate, methionine and pullulan crosslinked polyacrylic acid composition, each mL injection of the mixture containing 0.5 x 10

【技术实现步骤摘要】
一种间充质干细胞修复注射液及其制备方法
本专利技术属于注射液
，特别涉及一种间充质干细胞修复注射液及其制备方法。
技术介绍
间充质干细胞是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层。间充质干细胞最初在骨髓中发现，其具有多向分化潜能，造血支持和促进干细胞植入、免疫调控等多种功能，因此备受关注。间充质干细胞在体内或体外的诱导下，可以分化为脂肪、骨、神经等多种组织细胞，连续传代培养仍具有多向分化潜能。间充质干细胞注射液在临床上可以用于预防和治疗免疫系统疾病，糖尿病等。但是与其他注射液不同的是，间充质干细胞注射液中的活性成分为干细胞，传统用于配置注射液的氯化钠、DMSO等辅料对间充质干细胞进行保存时，会使干细胞的活性大幅度下降，无法长期保证细胞活性。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种间充质干细胞修复注射液，该注射液具有很好的稳定性及并且可用于长期保存间充质干细胞。本专利技术具体技术方案如下：本专利技术提供一种间充质干细胞修复注射液，该注射液由间充质干细胞微球和注射混合液组成，所述间充质干细胞微球由间充质干细胞和微球载体组成，所述微球载体主要由如下重量份的成分制备而成：丙烯碳酸酯0.7-1.5蛋氨酸0.3-0.5普鲁兰-聚丙烯酸交联物1.5-4其中，每mL所述注射混合液中含有0.5×106-2×106个间充质干细胞，含有2.5-6g微球载体。将间充质干细胞与微球载体制成微球后，可以保证间充质干细胞的稳定性的同时，并且该微球载体不会对间充质干细胞产生吸附和干扰作用，并且制成微球后，可以显著提高间充质干细胞的保存时间。进一步的改进，所述注射混合液主要由如下重量份的成分制备而成：去离子水8-12.5椰油酰胺丙基甜菜碱0.5-1壳聚糖微囊1.8-3。进一步的改进，所述壳聚糖微囊是由如下重量份的成分制备而成：壳聚糖1-1.9聚乳酸乙二醇酯0.2-0.5聚丙烯酰胺0.3-0.5。本专利技术通过选择由去离子水、椰油酰胺丙基甜菜碱和壳聚糖微囊可以保证注射液的稳定性，避免注射液在保存过程中出现沉淀、变浑浊等问题。进一步的改进，注射混合液还包括重量份数为1.5-2.7份的磷酯酰肌氨酸复合物。进一步的改进，所述磷酯酰肌氨酸复合物是由如下重量份的成分制备而成：磷酯酰肌氨酸0.8-1.5肉豆蔻酰肌氨酸0.2-0.5磺基丁二酸钠二辛酯0.5-0.7。本专利技术通过在注射混合液中加入磷酯酰肌氨酸复合物，其不会对间充质干细胞产生干扰和吸附作用，不会影响间充质干细胞的活性，其可以在间充质干细胞周围形成一夹药膜，进而使得间充质干细胞能够发挥缓释的作用，同时在注射混合液中加入磷脂酰肌氨酸复合物可以降低注射液的溶血现象和对血管的刺激性。本专利技术另一方面提供一种间充质干细胞修复注射液的制备方法，该方法包括如下步骤：S1：制备间充质干细胞微球；S2：制备壳聚糖微囊；S3：制备磷酯酰肌氨酸复合物；S4：将壳聚糖微囊溶于去离子水中，加入椰油酰胺丙基甜菜碱和磷酯酰肌氨酸复合物，搅拌10min，转速2000转/min，制得注射混合液，将间充质干细胞微球溶于注射混合液中，灭菌，即得注射液。进一步的改进，所述间充质干细胞微球的制备方法为：将蛋氨酸溶于1.5重量份的水中，制得蛋氨酸水溶液；将间充质干细胞悬浮于水溶液中，制得悬浮液；将普鲁兰-聚丙烯酸交联物和丙烯碳酸酯溶于1.2倍乙醇中，形成油相，将悬浮液加入到油相中，经剪切机乳化，静置分层，洗涤，干燥，即得间充质干细胞微球，优选地，所述普鲁兰-聚丙烯酸交联物的制备方法为：配置浓度为7.8g/mL的普鲁兰水溶液；将聚丙烯酸加入乙醇中形成油相，将普鲁兰水溶液加入到油相中，经剪切机乳化，然后加入过氧化氢二异丙苯，室温搅拌，发生交联反应1-2h，静置分层，干燥，即得普鲁兰-聚丙烯酸交联物。进一步的改进，第一次乳化速度1500rpm，时间8min，静置2min；第二次乳化速度500rpm，时间2min；第三次乳化2500rpm，时间8min。进一步的改进，所述壳聚糖微囊的制备方法为：将聚乳酸乙二醇酯置于75℃水浴中加热，趁热加入聚丙烯酰胺，转速为5000转/min，搅拌20min，加入聚乳酸乙二醇酯1.5倍重量份的去离子水，转速为3000转/min，搅拌5min，加入壳聚糖，转速为6000转/min，搅拌10min，获得均匀物，向均匀物内加入冷的石油醚，继续搅拌，使均匀物凝固，滤过，自然干燥，制得粒径范围为15-30μm的壳聚糖微囊。进一步的改进，所述磷酯酰肌氨酸复合物的制备方法为：将磷酯酰肌氨酸、磺基丁二酸钠二辛酯和肉豆蔻酰肌氨酸溶于乙醇中，磷酯酰肌氨酸和乙醇的重量份比为1:1.7，于旋转蒸发仪上减压蒸发成膜，将成的膜溶于水中，经水化后，过滤，制得磷酯酰肌氨酸复合物。本专利技术制备的注射液具有很高的稳定性。本专利技术提供的间充质干细胞修复注射液，将间充质干细胞制成微球后、并且选择特殊的注射混合物可以显著提高注射液的稳定性，可以用于长时间保存间充质干细胞，使得间充质干细胞具有很高的存活率。具体实施方式实施例1一种注射液该注射液由间充质干细胞微球和注射混合液组成，其中，间充质干细胞微球由间充质干细胞和微球载体组成，每mL所述注射混合液中含有0.5×106个间充质干细胞，含有2.5g微球载体，所述微球载体由如下重量的成分制备而成：丙烯碳酸酯0.7g蛋氨酸0.3g普鲁兰-聚丙烯酸交联物1.5g所述注射混合液由如下重量份的成分制备而成：去离子水8g椰油酰胺丙基甜菜碱0.5g壳聚糖微囊壳聚糖1g聚乳酸乙二醇酯0.2g聚丙烯酰胺0.3g。实施例2一种注射液该注射液由间充质干细胞微球和注射混合液组成，其中，间充质干细胞微球由间充质干细胞和微球载体组成，每mL所述注射混合液中含有1×106个间充质干细胞，含有3.9g微球载体，所述微球载体由如下重量的成分制备而成：丙烯碳酸酯1g蛋氨酸0.4g普鲁兰-聚丙烯酸交联物2.5g所述注射混合液由如下重量份的成分制备而成：去离子水10g椰油酰胺丙基甜菜碱0.7g壳聚糖微囊壳聚糖15g聚乳酸乙二醇酯0.3g聚丙烯酰胺0.4g该注射液的制备方法为：S1：制备间充质干细胞微球：制备普鲁兰-聚丙烯酸交联物：配置浓度为7.8g/mL的普鲁兰水溶液；将聚丙烯酸加入乙醇中形成油相，将普鲁兰水溶液加入到油相中，经剪切机乳化，第一次乳化速度1500rpm，时间8min，静置2min；第二次乳化速度500rpm，时间2min；第三次乳化2500rpm，时间8min；然后加入过氧化氢二异丙苯，室温搅拌，发生交联反应1-2h，静置分层，干燥，即得普鲁兰-聚丙烯酸交联物；将蛋氨酸溶于1.5重量份的水中，制得蛋氨酸水溶液；将间充质干细胞悬浮于水溶液中，制得悬浮液；将普鲁兰-聚丙烯酸交联物和丙烯碳酸酯溶于1.2倍乙醇中，形成油相，将悬浮液加入到油相中，经剪切机乳化，第一次乳化速度1500rpm，时间8min，静置2min；第二次乳化速度500rpm，时间2min；第三次乳化2500rpm，时间8min；静置分层，洗涤，干燥，即得间充质干细胞微球；S2：制备壳聚糖微囊将聚乳酸乙二醇酯置于75℃水浴中加热，趁热加入聚丙烯酰胺，转速为5000转/min，搅拌20min，加入聚乳酸乙二醇酯1.5倍重量份的去离子水，转速为3000本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种间充质干细胞修复注射液，其特征在于，所述注射液由间充质干细胞微球和注射混合液组成，所述间充质干细胞微球由间充质干细胞和微球载体组成，所述微球载体主要由如下重量份的成分制备而成：丙烯碳酸酯               0.7‑1.5蛋氨酸                   0.3‑0.5普鲁兰‑聚丙烯酸交联物    1.5‑4其中，每mL所述注射混合液中含有0.5×10

【技术特征摘要】
1.一种间充质干细胞修复注射液，其特征在于，所述注射液由间充质干细胞微球和注射混合液组成，所述间充质干细胞微球由间充质干细胞和微球载体组成，所述微球载体主要由如下重量份的成分制备而成：丙烯碳酸酯0.7-1.5蛋氨酸0.3-0.5普鲁兰-聚丙烯酸交联物1.5-4其中，每mL所述注射混合液中含有0.5×106-2×106个间充质干细胞，含有2.5-6g微球载体。2.如权利要求1所述的间充质干细胞修复注射液，其特征在于，所述注射混合液主要由如下重量份的成分制备而成：去离子水8-12.5椰油酰胺丙基甜菜碱0.5-1壳聚糖微囊1.8-3。3.如权利要求2所述的间充质干细胞修复注射液，其特征在于，所述壳聚糖微囊是由如下重量份的成分制备而成：壳聚糖1-1.9聚乳酸乙二醇酯0.2-0.5聚丙烯酰胺0.3-0.5。4.如权利要求3所述的间充质干细胞修复注射液，其特征在于，所述注射混合液还包括重量份数为1.5-2.7份的磷酯酰肌氨酸复合物。5.如权利要求4所述的间充质干细胞修复注射液，其特征在于，所述磷酯酰肌氨酸复合物是由如下重量份的成分制备而成：磷酯酰肌氨酸0.8-1.5肉豆蔻酰肌氨酸0.2-0.5磺基丁二酸钠二辛酯0.5-0.7。6.一种权利要求5所述的间充质干细胞修复注射液的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：S1：制备间充质干细胞微球；S2：制备壳聚糖微囊；S3：制备磷酯酰肌氨酸复合物；S4：将壳聚糖微囊溶于去离子水中，加入椰油酰胺丙基甜菜碱和磷酯酰肌氨酸复合物，搅拌10min，转速2000转/min，制得注射混合液，将间充质干细胞微球溶于注射混合液中，灭菌，即得注射液。7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹毓琳，刘俊江，时兆田，白志惠，
申请(专利权)人：北京臻惠康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11