本发明专利技术涉及从普通混杂的红茶菌液中纯化获得酿酒酵母菌菌株的方法。所要解决的问题是：提供一种分离纯化红茶菌中重要菌种－酿酒酵母菌的工艺方法。特点是：包括下述步骤，取家庭或市售的红茶菌菌液进行纯化分离；按照《微生物分类学》一书中的方法对分离获得的多个纯的酵母菌菌株进行菌种鉴定；用斜面菌种接种静止培养红茶菌的方法以筛选酿酒酵母菌菌株；本发明专利技术采用微生物学技术从传统的红茶菌饮料中分离纯化出红茶菌的主要酿酒酵母菌菌株，以利于用纯菌株培养出具有醇、酸、甜、香独特风格的红茶菌。这种工艺具有无杂菌污染、菌种易保藏、产品质量稳定、易于工业化生产和产品商业化的特点。
【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
从红茶菌中分离纯化酿酒酵母菌的方法，其特征在于：（１）、从红茶菌中分离纯化酿酒酵母菌Ａ、取家庭或市售的红茶菌菌液，在无菌条件下，用取样器从菌膜下吸取０．１ｍＬ的菌液，采用０．８５％生理盐水进行１０倍、１００倍、１０００倍的梯 度稀释，得三份稀释液；Ｂ、在超净工作台上，取融化后降温至约５０℃的葡萄糖酵母膏（ＧＹＣ）固体培养基倒平板，在平板中注入约２０ｍＬ的培养基，在培养基中加入０．１～１００ｍｇ／Ｌ浓度的抑制细菌的抗生素，待培养基凝固后，取上述三份稀释液０ ．０５ｍＬ～０．２ｍＬ分别加入三个平板上，用三角刮铲将菌液均匀涂布于平板表面；Ｃ、将上述制备好的平板置于２５℃～３５℃的培养箱中培养３～７天；Ｄ、用接种环挑取经纯化的过各种典型的酵母菌菌株的菌落至另一新配置的葡萄糖酵母膏（Ｇ ＹＣ）固体培养基平板划线，将平板置于２５℃～３５℃的培养箱中培养３～７天；Ｅ、持续Ｄ步骤的操作至少２次，直至菌落完全纯化；得到２０株以上纯的酵母菌菌株；（２）、按照《微生物分类学》的方法对分离获得的多个纯的酵母菌菌株进行菌种 鉴定，经鉴定获得管囊酵母菌、酿酒酵母菌、德氏酵母菌、毕赤氏酵母菌共４种酵母菌；（３）、用斜面菌种接种静止培养红茶菌的方法以筛选酿酒酵母菌菌株将鉴定为管囊酵母菌、酿酒酵母菌、德氏酵母菌、毕赤氏酵母菌的４株酿酒酵母菌菌株与木醋酸 菌、巴氏醋酸菌、液化醋酸菌、弱氧化醋酸菌共４株醋酸菌菌株分别进行两两组合接种试验，即一种酿酒酵母菌加一种醋酸菌的组合接种试验，具体操作步骤如下：Ａ、红茶菌糖茶液的配制，取原料茶叶３～１０ｇ，糖３０～１００ｇ，水１０００ｍＬ，用沸水冲 泡茶叶和糖，保持微沸１～１０ｍｉｎ，静置使茶叶沉淀，取上清液，分装至试管、１５０ｍＬ或２５０ｍＬ三角瓶，１０８℃～１２１℃灭菌处理１０～２５ｍｉｎ；Ｂ、按两两组合用接种环从上述纯化的４株酵母菌菌株和４醋酸菌菌株的纯培养中挑取一环混合 分别接进红茶菌糖茶液中，２０℃～３５℃静止培养６～１５天；即管囊酵母菌分别与木醋酸菌、巴氏醋酸菌、液化醋酸菌、弱氧化醋酸菌菌株混合接种；即酿酒酵母菌分别与木醋酸菌、巴氏醋酸菌、液化醋酸菌、弱氧化醋酸菌混合接种；即德氏 酵母菌分别与木醋酸菌、巴氏醋酸菌、液化醋酸菌、弱氧化醋酸菌混合接种；即毕赤氏酵母分别与木醋酸菌、巴氏醋酸菌、液化醋酸菌、弱氧化...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：唐欣昀，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：34[中国|安徽]
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