重组毕赤酵母及其表达NGAL蛋白的方法技术

本发明专利技术涉及ＮＧＡＬ蛋白，公开了重组毕赤酵母及其表达ＮＧＡＬ蛋白的方法。本发明专利技术通过ＰＣＲ扩增、连接、转化与筛选，最终获得高效表达ＮＧＡＬ蛋白的重组毕赤酵母菌株。该菌株能将目标蛋白分泌到培养基中，可达＞１００ｍｇ／Ｌ，而且无杂蛋白。这使得接续下来的纯化工艺变得十分简单：发酵液经硫酸铵沉淀、脱盐、阳离子交换层析即可。所得蛋白优于原核表达蛋白，糖基化完整，可用于人ＮＧＡＬ功能研究以及临床ＮＧＡＬ检测的标准蛋白。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种重组毕赤酵母，其特征在于由如下方法制备而成：（１）ＰＣＲ扩增ＮＧＡＬ的ｃＤＮＡ；（２）ＰＣＲ产物与载体ｐＰＩＣ９连接，构建重组质粒ｐＰＩＣ９－ＮＧＡＬ；（３）重组质粒ｐＰＩＣ９－ＮＧＡＬ转化毕赤酵母，得到重组毕赤 酵母。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李恩民，张丕显，吴炳礼，杜则澎，许丽艳，
申请(专利权)人：汕头大学医学院，
类型：发明
国别省市：44[中国|广东]