克列维醇的制备方法及在制抗乙酰胆碱酯酶药物的应用技术

克列维醇的制备方法及在制抗乙酰胆碱酯酶药物的应用，涉及一种克列维醇。提供一种来源于红树林内生真菌次级代谢产物克列维醇的制备方法和应用。制备方法为：矮棒曲霉ＢＹＹ－１种子培养；液体深层发酵；发酵液过滤除菌体；滤液减压浓缩后用有机溶剂多次萃取，收集有机相并减压浓缩获得粗提物；粗提物经硅胶柱色谱及重结晶精制后制得克列维醇。克列维醇对乙酰胆碱酯酶具有显著的抑制作用，是一种可逆性的乙酰胆碱酯酶抑制剂，可用于制备治疗早老性痴呆及其它与乙酰胆碱缺乏相关的疾病的药物。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
克列维醇的制备方法，所述的克列维醇来源于红树林内生真菌次级代谢产物，红树林内生真菌为矮棒曲霉ＢＹＹ－１（ＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｃｌａｖａｔｏｎａｎｉｃｕｓＢＹＹ－１），已于２００６年７月３日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为ＣＣ ＴＣＣＮＯ：Ｍ２０６０６３，所述的克列维醇为２，４－Ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ－３，５－ｄｉｍｅｔｈｙｌａｃｅｔｏｐｈｅｎｏｎｅ，其化学结构式如下：＊＊＊其特征在于包括以下步骤：１）矮棒曲霉ＢＹＹ－１（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ ｕｓｃｌａｖａｔｏｎａｎｉｃｕｓＢＹＹ－１）的种子培养Ａ．配制斜面培养基：马铃薯去皮切块，放入海水中，煮后过滤，滤液用海水定容，得马铃薯汁，然后添加葡萄糖或蔗糖及琼脂，分装试管，灭菌后制成斜面培养基，将矮棒曲霉ＢＹＹ－１转接 至斜面培养基上培养；Ｂ．配制种子液：在马铃薯汁中添加葡萄糖或蔗糖，分装后灭菌，得种子培养基，将培养的斜面菌种接入到分装后的种子培养基中，摇瓶培养，得种子液；Ｃ．种子罐种子培养：先配制种子培养基，将种子培养基装入种子罐，将培养 的种子液接入种子罐中，培养后得培养后的种子液；２）克列维醇的发酵配制发酵培养基，将发酵培养基装入发酵罐，将培养后的种子液接入发酵罐中，发酵后得发酵液；３）克列维醇的提取将发酵液过滤除菌体，滤液减压浓缩后用有机 溶剂萃取，收集有机相并减压浓缩成浸膏；４）克列维醇的精制浸膏用甲醇溶解得克列维醇甲醇溶液，在克列维醇甲醇溶液中加入硅胶拌样，上硅胶柱进行分离，以石油醚／乙酸乙酯为洗脱剂梯度洗脱，收集当石油醚／乙酸乙酯的体积比例为５０～３∶１ 时的洗脱液，合并洗脱液并减压浓缩至干，得微黄色晶体，加溶剂溶解后重结晶至少２次，得目标产物，即克列维醇，石油醚／乙酸乙酯＝１００／０到０／１００。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郑忠辉，黄珊珊，杜希萍，黄耀坚，宋思扬，沈月毛，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：92[中国|厦门]