本发明专利技术公开了一株淡紫拟青霉菌（Ｐ．ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）ＹＥＳ－２ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．２０１２及其菌剂与应用。该菌剂是以高分子材料海藻酸钠为基本骨架，以淡紫拟青霉菌（Ｐ．ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）ＹＥＳ－２ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．２０１２的菌丝体、孢子混合物为活性成分，以硅藻土为载体，根据海藻酸钠与多价阳离子形成凝胶的特性，采用海藻酸钠－氯化钙反应的方法，制备而成的具有缓施作用的杀线虫生物菌剂。实验证明，该菌剂具有较好的杀线虫功效，防治率可达５０－６０％，且较为稳定，无有毒的化学残留物（无毒、无残留），不污染农产品和环境（不与环境中的其它物质反应），性价比高和施用方便的特点。本发明专利技术将在植物根结线虫病害的防治中发挥重要作用，应用前景广阔。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株淡紫拟青霉菌与应用，特别是涉及一株淡紫拟青霉菌及其菌剂与 该菌剂在防治植物根结线虫病害中的应用。
技术介绍
在引起植物侵染性病害的四大病原中，植物寄生线虫的危害超过细菌和病毒，仅次于真菌病害。植物寄生线虫每年造成世界农业生产的损失约1000亿美元，其中根结 线虫(Afe/oWogye^;0是危害最大的一类植物寄生线虫，每年仅对世界上重要的经 济作物造成的经济损失就高达数百亿美元。在根结线虫属(^fe/o/Jogye)内，以南方 根结线虫(M /wcogm'to)、花生根结线虫(M flw。W。)、爪哇根结线虫(M yavflm'ca) 和北方根结线虫(M /^/)四个种的根结线虫病害发生最为普遍，对农作物的危害也 最大。根结线虫的繁殖力极强，通常每个雌虫可产卵1000枚以上。根结线虫通常没有 明显的寄主专化性，能够侵染的植物超过3000种，分属114科，包括单子叶植物，双 子叶植物，草本植物和木本植物，对大多数的粮食作物、油料作物、纤维作物、烟草、 茶叶、果树、蔬菜、药材和花卉等均可造成严重损失。受其危害后，作物品质下降， 大幅度减产，甚至绝产，同时线虫病的发生又加剧了枯萎病、黄萎病和立枯病等土传 病害的危害，造成植物抵抗能力下降，极易受其它病原物侵染。在控制该类病害的方法中，由于根结线虫通常存活于土壤中和植物根内，所以一 般化学农药难以控制其危害，因此该类病害成为大量剧毒农药频繁使用的对象，对农 产品生产的安全性构成严重威胁。同时，由于化学杀线剂只能在短期内控制线虫数量， 同时还存在成本高、持效短和抗药性等问题。此外， 一些传统的防治方法，如轮作、 种植抗病品种等虽可起到一定的防治作用，但在实际生产中能够轮作的作物并不多， 对根结线虫具有抗性的作物品种十分有限。因此，传统控制方法并不能解决该类病害。 综上所述，由于目前缺乏实用、高效、可持续的治理技术，根结线虫病发生区域不断 扩大，危害作物种类持续增加，致使农业生产面临严峻挑战，杀线虫生物农药具有非 常广阔的应用价值和市场前景。安全、有效的防治根结线虫类病害是目前农业生产上亟待解决的紧迫问题，而现 有的化学防治等措施并不能满足这一要求，因此利用线虫生防资源对其进行调控是今 后发展的必然趋势。当前，随着人们环境保护意识的提高和对无公害产品需求的不断增加，生防真菌在植物线虫病害生物防治中显示出越来越重要的作用。但是必须指 出，尽管自然界中有众多的菌物与线虫密切相关，但仅有很少一部分菌株用于研发生 防制剂，并且这些菌剂在生产上真正起到防治作用的很少。此外，目前线虫生防制剂 仍然存在一定的缺点，大大限制了其应用，主要体现在1. 现有防治植物线虫病害的生防制剂多为孢子制剂，对上游活性成分生产要求 较高，往往需要两步发酵(液体发酵结合固体发酵)才能获得活性成分一真菌孢子， 制备工艺十分繁琐。2. 剂型化水平低，目前线虫防治用生防制剂多为粉剂、悬浮剂等，工艺粗放， 土壤适用性差，不利于土壤环境施用，且往往难以克服土壤中抑菌萌发的不利环境因 素，不易形成群体，且这些制剂多以种衣剂或拌种剂的形式出现，携带菌量十分有限。 因而缺乏市场竞争力，使其应用受到了限制。3. 稳定性差，菌剂活力丧失十分迅速，导致生防制剂货架期短，难以商业化生 产。为了保证制剂具有较长时间的货架期，往往要求严格的保存条件，直接限制了真 菌类生物农药的大规模应用。综上所述，尽管土壤中植物线虫病害生物防治型农药具有非常广阔的市场空间， 长期以来通过对植物寄生线虫的生物防治研究获得了一些具有一定生防潜力的菌株， 但是其产业化应用却进展缓慢，在实际生产中能够满足线虫生防需要的制剂非常缺 乏。因此现有生防资源一旦在剂型技术上有所突破，必将会极大的促进植物寄生线虫 病害的生物防治工作跃上一个新的台阶。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一株对植物根结线虫病害具有防治作用的淡紫拟青霉菌。本专利技术所提供的是淡紫拟青霉菌(尸巾70附^.///>^)￥￡5-2，该菌株已于2007 年4月20日保藏于中国北京朝阳区大屯路中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生 物中心，保藏编号为CGMCC NO. 2012。淡紫拟青霉菌(尸./z7acZmtf) YES-2CGMCCNo.2012菌株具有以下特征菌落毡状， 表面初为白色，产孢时变为葡萄酒红色，并且产孢量越多，颜色越深，背面呈白色或 酒红色。该菌株在麦芽汁培养基(MEA)上生长较快，在PDA培养基上也可生长。培 养l周后开始产孢，其分生孢子梗直立，孢梗上轮生排列2-4个瓶梗，顶端串生分生 孢子。分生孢子呈椭球或纺锤形，外壁光滑，大小为(2.0-3.0) X (1.5-2.2)网。 该菌株生长的温度范围为8-38°C，最佳为25-3(TC。该菌株在pH 2-11之间均可以生 长，适宜pH值为5-9。本专利技术的第二个目的是提供一种上述淡紫拟青霉菌(P力7ac/m^) YES-2 CGMCCNo. 2012的培养方法。本专利技术所提供的淡紫拟青霉菌(尸.Wac/RS) YES-2 CGMCC No. 2012的培养方法， 是将淡紫拟青霉菌(尸./^c/m^)YES-2 CGMCC No. 2012接种到淡紫拟青霉菌(尸.///> ) YES-2 CGMCC No. 2012专用液体培养基中，在23-25'C下培养，淡紫拟青霉菌 (尸./z7flc/s) YES-2 CGMCC No. 2012得到扩大培养；所述淡紫拟青霉菌(尸./// >^) YES-2CGMCCNo. 2012专用液体培养基的配方为麦芽糖(C源)20-40g(优选为30g)， 酵母(N源)5-7g (优选为6. 12g)， K異0.5-2g (优选为lg)， MgS04 0. 1-lg (优 选为0. 5g)，KCl 0. 1-lg(优选为0. 5g)，FeS040. 001-0. 05g(优选为0. 01g)，ZnS04 7H20 5-20mg (优选为lOmg)，用水定容至1L， pH6 —7。为提高菌体的生长速率，可对该菌进行振荡培养，振速优选为120-180rpm。所述培养时间一般为120-180h。为获得更高的生长速率，所述淡紫拟青霉菌(尸./Z/c/m^) YES-2 CGMCC No. 2012 的培养方法还包括在接种前对菌种进行试管活化培养的步骤，方法可为将淡紫拟青 霉菌(尸./Z/admtf) YES-2CGMCCNo.2012接种在马铃薯琼脂培养基上，在25-27。C下培 养，得到经活化的淡紫拟青霉菌(尸./Z/ac/us) YES-2 CGMCC No. 2012;所述马铃薯琼 脂培养基配方为马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂16g，用水定容至1L， pH6-7左右。所述淡紫拟青霉菌(尸.YES-2 CGMCC No. 2012的试管活化培养时间可为 72—96h。本专利技术的第三个目的是提供一种淡紫拟青霉菌(尸./^c/m^) YES-2 CGMCC No. 2012 菌剂。本专利技术所提供的淡紫拟青霉菌(P.///ac/ws) YES-2 CGMCC No. 2012菌剂，其活性 成分为淡紫拟青霉菌(尸./Z/ac/mtf) YES-2 CGMCC No. 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株淡紫拟青霉菌（Ｐ．ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）ＹＥＳ－２，其生物保藏号为ＣＧＭＣＣＮＯ．２０１２。
【技术特征摘要】
1、一株淡紫拟青霉菌(P.lilacinus)YES-2，其生物保藏号为CGMCC NO.2012。2、 一种培养权利要求1所述的淡紫拟青霉菌(尸力/ac/mw) YES-2CGMCCNo.2012 的方法，是将淡紫拟青霉菌(P.///ac/w) YES-2 CGMCC No. 2012接种到淡紫拟青霉菌(尸./z7ac/m^) YES-2 CGMCC No. 2012专用液体培养基中，在25-30。C下培养，淡紫拟 青霉菌(P./z7ac/w5) YES-2 CGMCC No. 2012得到扩大培养；所述淡紫拟青霉菌(尸./Z/flc/m^) YES-2 CGMCC No. 2012专用液体培养基的配方为麦芽糖20-40g，酵 母5-7g， K2HP040. 5-2g， MgS040. l-lg， KCl 0. 1-lg， FeS040. 001-0. 05g， ZnS04 7H20 5-20mg，用水定容至1L， p朋-7。3、 根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于所述培养过程中进行振荡， 振速为120-180rpm;培养时间为120-180h;接种前，先对淡紫拟青霉菌(P.//toc/m ) YES-2 CGMCC No. 2012菌种进行试管活化培养，方法为将淡紫拟青霉菌(,///ac/m ) YES-2 CGMCC No. 2012接种在马铃薯琼脂培养基上，在25-3(TC下培养，得到经活化 的淡紫拟青霉菌(尸.Wac/mtf) YES-2 CGMCC No. 2012;所述马铃薯琼脂培养基的配方 为马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂16g，用水定容至1L， p朋-7。4、 一种淡紫拟青霉菌(尸./^c/m^) YES-2 CGMCC No. 2012菌剂，其活性成分为 权利要求1所述的淡紫拟青霉菌(尸力7flc!'mw) YES-2 CGMCC No. 2012。5、 根据权利要求4所述的菌剂，其特征在于所述菌剂为微球剂型，其原料配 方包含以下组分海藻酸钠 l-4g， 硅藻土 8-15g，淡紫拟青霉菌(尸.Wac/w) YES-2 CGMCC No. 2012 1-10g，水 加水至100g。6、 根据权利要求5所述的菌剂，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：段维军，刘杏忠，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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