链激酶发酵液的链球菌分离方法技术

技术编号:1766619 阅读:193 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一种链激酶发酵液的链球菌分离方法,是通过以下步骤实现的:链激酶发酵液冷却到25℃-40℃;pH调到pH2-10;加生物絮凝剂PGA(聚γ-谷氨酸)或者PGA盐;生物絮凝剂的用量在0.001%-0.1%;充分搅拌20-40分钟,静止沉淀3-5小时;虹吸上清液;本发明专利技术的有益效果是:由于采用生物学凝剂沉淀分离链球菌,可大大节约固定资产投资,以及采用离心机,板框过滤等设备所需的大量能量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种链激酶,尤其涉及一种链激酶发酵液的细胞分离方法。技术背景链激酶是六十年代国际上研发成功的第一代溶血栓药物。40多年来的 临床研究和应用,积累了丰富的临床经验,并充分肯定了链激酶在治疗心 肌梗塞、动静脉血栓等疾病中的确切疗效。至今链激酶仍然是治疗心肌梗 塞的首选药物之一。国际上公认的链激酶是由天然的C-族溶血性链球菌发酵生产,经离子 交换层析,分子筛层析等精制纯化手段,达到可供静脉注射用的质量标准。 然后添加稳定剂,冷冻干燥成冻干制剂。链球菌发酵后的链激酶发酵液一般都采用冷冻连续高速离心机进行离 心分离,除去链球菌,离心清液采用硫酸铵盐析等方法将SK沉淀下来。采用冷冻连续高速离心机分离链球菌,需要一笔较大的投资;并消耗 大量能量和对设备维修保养的幵支。整个操作比较复杂,使用的泵和离心 机在运行过程中还有可能使链激酶失活。
技术实现思路
本专利技术需要解决的技术问题是提供了一种链激酶发酵液的链球菌分离 方法,旨在解决上述的问题。为了解决上述技术问题,本专利技术是通过以下步骤实现的 链激酶发酵液冷却到25 °(〕- 40°C; ra调到PH 2 - 10;加生物絮凝剂P(;A(聚谷氨酸)或者PGA盐;生物絮凝剂的用量在 0. 0(M% - 0. 1%;充分搅拌20-40分钟,静止沉淀3-5小时; 虹吸上清液。与现有技术相比,本专利技术的有益效果是由于采用生物絮凝剂沉淀分 离链球菌,可大大节约固定资产投资,以及采用离心机,板框过滤等设备 所需的大量能量。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术作进一步详细描述本专利技术是通过以下步骤实现的链激酶发酵液冷却到25 aC- 40°C; PH调到PH 2 - 10;加生物絮凝剂PGA(聚Y-谷氨酸)或者PGA盐;生物絮凝剂的用量在 0. 001% - 0. 1%;充分搅拌20-40分钟,静止沉淀3-5小时; 虹吸上清液;所述的PGA盐可以是或者K或者顺4或者Zn或者Ca或者Al。 实施例1链激酶发酵液1. 5T(4000IU/ml)冷却到27°C, PH调到7.2加0.01% PGA-Na,充分搅拌30分钟,静止沉淀4小时,虹吸上清液1. 35T (3800IU/ ml)。 实施例2链激酶发酵液1. 5T (4100IU/ ml),冷却到20°C, PH调节到7. 2加0. 005% PGA-Zn充分搅拌30分钟,静止沉淀4小时,虹吸上清液l. 35T (3850IU/ral)。 链激酶发酵液1. 5T(40「,OIt」/ML),冷却至U 27°C, PH调节到8. 0加0. 01% PGA充分搅拌30分钟,静止沉淀4小时,虹吸上清液1. 35T (3850IU/ ml)。采用本专利技术的方法分离链球菌可大大节约固定资产投资,以及采用离 心机,板框过滤等设备所需的大量能量。生物絮凝剂为生物大分子物资, 可生物降解,对环境无危害。采用本专利技术分离效率高、产品得率高,不会 因为采用泵和离心机造成活性物质的失活。权利要求1.一种,是通过以下步骤实现的链激酶发酵液冷却到25℃-40℃;PH调到PH2-10;加生物絮凝剂PGA(聚γ-谷氨酸)或者PGA盐;生物絮凝剂的用量在0.001%-0.1%;充分搅拌20-40分钟,静止沉淀3-5小时;虹吸上清液。2. 根据权利要求1所述的,所述的PGA 盐可以是Na或者K或者NH,或者Zn或者Ca或者Al。3. 根据权利要求1或2所述的,链激 酶发酵液l. 5T(4000IU/ml)冷却到27°C, PH i周到7. 2加0. 01% PGA-Na,充 分搅拌30分钟,静止沉淀4小时,虹吸上清液1. 35T (3800IU/ ml)。4. 根据权利要求1或2所述的,链激 酶发酵液1. 5T(4匪U/ ml),冷却到20。C, PH调节到7. 2加0. 005% PGA-Zn 充分搅拌30分钟,静止沉淀4小时,虹吸上清液1. 35T (3850IU/ ml)。5. 根据权利要求1或2所述的,链激 酶发酵液1. 5T(4050IU/ML),冷却到27°C, PH调节到8. 0加0. 01% PGA充分 搅拌30分钟,静止沉淀4小时,虹吸上清液1. 35T (3850IU/ ml)。全文摘要本专利技术涉及一种,是通过以下步骤实现的链激酶发酵液冷却到25℃-40℃;pH调到pH2-10;加生物絮凝剂PGA(聚γ-谷氨酸)或者PGA盐;生物絮凝剂的用量在0.001%-0.1%;充分搅拌20-40分钟,静止沉淀3-5小时;虹吸上清液;本专利技术的有益效果是由于采用生物学凝剂沉淀分离链球菌,可大大节约固定资产投资,以及采用离心机,板框过滤等设备所需的大量能量。文档编号C12N9/70GK101161812SQ20061011714公开日2008年4月16日 申请日期2006年10月13日 优先权日2006年10月13日专利技术者岭 刑, 晋 史, 朱崇杉 申请人:上海中港亚诺化学技术有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种链激酶发酵液的链球菌分离方法,是通过以下步骤实现的:链激酶发酵液冷却到25℃-40℃;PH调到PH2-10;加生物絮凝剂PGA(聚γ-谷氨酸)或者PGA盐;生物絮凝剂的用量在0.001%-0.1%;充分搅拌20-40分钟,静止沉淀3-5小时;虹吸上清液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:史晋朱崇杉刑岭
申请(专利权)人:上海中港亚诺化学技术有限公司
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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