一种低温保存刺激隐核虫滋养体和包囊的方法技术

本发明专利技术公开了一种低温保存刺激隐核虫滋养体和包囊的方法，包括：（１）采集刺激隐核虫的滋养体和包囊，在８－１５℃下保存于人工气候箱中，相对湿度９０％，按１２ｈｒ黑暗／１２ｈｒ光照。每隔５ｄ换一次灭菌海水，换水量２０％；（２）每月对低温保存的滋养体和包囊进行检测１次，测定其在温度回复至２７．０℃时的孵化率和孵出幼虫的感染力。用本发明专利技术的方法来保存刺激隐核虫的滋养体和包囊，可以使保存了４个月的滋养体和保存了３个月的包囊还能孵出具有感染力的幼虫，这些幼虫在条件合适的情况下能繁殖出大量的后代，而且后代的毒力没有下降。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种低温保存刺激隐核虫滋养体和包囊的方法，其特征在于包括如下步骤：　　　　（１）刺激隐核虫的滋养体和包囊的保存方法　　　　采集刺激隐核虫的滋养体和包囊，在８－１５℃下保存于人工气候箱中，相对湿度９０％，光照１２ｈｒ黑暗／１２ｈｒ光照。为了确保保存条件一致，把所有装有寄生虫的２４孔组织培养板和培养皿一起放入一个１０Ｌ的烧杯中，加入５Ｌ灭菌海水，保持微量充气，每隔５天换一次灭菌海水，换水量２Ｌ；培育寄生虫的海水先过滤，再于１２０℃中灭菌３０分钟，使用前加入１００ＩＵ／ｍｌ的青霉素和１００ｕｌ／ｍｌ的链霉素。　　　　（２）低温保存刺激隐核虫的滋养体和包囊方法的有效性检验　　　　每隔１个月检测一次滋养体和包囊在２７．０℃的孵化率和孵出幼虫的感染力。结果发现，在８－１５℃保存了４个月的滋养体和保存了３个月的包囊还能孵出具有感染能力的幼虫，这些幼虫在条件合适的情况下能繁殖出大量的后代，而且后代的毒力没有下降。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李安兴，但学明，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]