【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种利用［６０］↑Ｃｏγ射线辐照获得丁醇生产高产株的方法，其特征在于，工艺步骤包括： （１）细胞悬液的制备 将斜面培养基上培养好的丁醇产生菌用无菌水洗下，显微镜计数调节细胞浓度为５－７×１０↑［６］个／ｍＬ； （２）原生质体的制备 将斜面培养基上培养好的丁醇产生菌接种于完全培养基，３０－３７℃静置培养１８－２４ｈ，添加０．１－０．３％甘氨酸和２０－３０ｕ／ｍｌ青霉素处理２－３ｈ后３０００－５０００ｒ／ｍｉｎ离心５－１０ｍｉｎ，缓冲液洗涤菌体；收集处理后的菌体悬浮于原生质体稳定液中，加入２－４ｍｇ／ｍＬ溶菌酶，３０－３７℃保温６－８ｈ后终止酶解，３０００－５０００ｒ／ｍｉｎ，离心５－１０ｍｉｎ，收集原生质体； （３）［６０］↑Ｃｏγ射线辐照诱变 将制备的细胞悬液或原生质体悬浮于高渗缓冲液中，用［６０］↑Ｃｏγ射线辐照，辐照剂量１００－１０００Ｇｙ，剂量率３－５Ｇｙ／ｍｉｎ，诱变后稀释１０↑［－３］～１０↑［－６］涂布于完全培养基上，于３０－３５℃黑暗条件下避光培养２－３ｄ； （４）高产株的筛选 选取致死率在９０％以上的辐照剂量辐照的菌株３０－３７℃有氧培养４８－７２ｈ后测定丁醇产量，筛选...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘宏娟，张建安，刘娅，程可可，周玉杰，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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