一种GKN2基因的原位杂交检测试剂盒及其检测方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种ＧＫＮ２基因的原位杂交检测试剂盒，包括杂交探针、标记物，所述的杂交探针序列如ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．１所示。本发明专利技术还提供了一种ＧＫＮ２基因原位杂交检测方法。另外，本发明专利技术还提供了试剂盒在制备检测胃癌疾病药物中的应用。本发明专利技术优点在于：本发明专利技术提供的试剂盒具有灵敏度高、特异性强的特点。本发明专利技术的检测方法操作方便、简单，能在区级以上医院普遍使用和推广。

【技术实现步骤摘要】
一种GKN2基因的原位杂交检测试剂盒及其检测方法和应用
本专利技术涉及一种试剂盒，具体地说关于一种GKN2基因的原位杂交检测试 剂盒及其检测方法和应用。
技术介绍
根据国内外权威机构提供的资料，我国每年癌症的新增人数160万，死亡 人数近160万，患者600万，全球每年新增癌症患者800万，死亡人数接近800 万，患者约有8400万人，到2020年以上人数将翻一番，这是一组可怕的数字。 根据最新报道，胃癌在全世界范围内是发病率最高的癌症之一，男性的发病率 是女性的1.5 2.5倍。胃癌的发病率随着年龄的增加而显著升高，以男性胃 癌发病率为例，45 54岁发病率为70/10万，55 64岁阶段为145. 7/10万， 65 74岁为264. 3/10万。发病的高峰年龄在50岁 80岁。大约90%的胃癌属 于腺癌，可分为两个主要类型(l)肠型胃癌，分化较好，在男性、老年患者 中更常见。肠型胃癌在高风险地区中占主导地位，比如东亚、东欧、中南美洲 等地区。(2)弥漫型胃癌，分化不好，在男性与女性中发病率更接近，在年轻 患者中更常见。弥漫型胃腺癌的地区分布更均匀，与A型血及遗传关系密切。 近几十年来肠型胃癌的发病率明显下降，带动了胃癌的整体发病率的降低，而 弥漫型胃癌发病率却上升了。' 2002年全球每10万名男性发生胃癌的的人数为 22人，女性为10. 4人；死亡率在男性中为每10万人16. 3人，女性为7. 9人。 2002年全世界估计有90万胃癌新患者(其中男性为60万，女性为33万)，同 时有70万人死于胃癌(男性为45万人，女性为25万人)。男性中，胃癌的发 病率仅次于胃癌和前列腺癌，而死亡率仅次于肺癌居第二位。在女性中，胃癌的发病率居第五位，排在乳腺癌、宫颈癌、肺癌和肠癌之后。按地理分布，有 三分之二的胃癌分布在日本、中国、韩国、中南美洲、东欧和中东的部分地区， 在北美、澳大利亚和新西兰、北欧和印度的发病率较低。发达国家的胃癌的发病率和死亡率在近几十年有显著下降了，美国在20世纪50年代年死亡率约为 22/10万，90年代下降至3.7/10万以下。日本近年来亦有明显下降趋势，这 得益于采用X线钡餐检查或胃镜定点筛査，大大提高了早期胃癌的检出率。我 国胃癌的发病状况，胃癌占癌症死亡人数的近四分之一 我国是胃癌的高发 区，胃癌年患病率和死亡率均是世界平均水平的2倍多。在卫生部组织的 1990 1992年全国第二次死因调査中，中国胃癌的粗死亡率为25. 2/10万(男 性为32. 8/10万，女性为17. 0/10万)，占到所有因癌症死亡人数的23. 2%，接 近四分之一。男性发病率下降，女性发病率上升。根据全国肿瘤防治办公室杨玲博士 2006年发表在《世界胃肠病学杂志》中的文章的估计，2005年中国胃癌发病 率在男性中达37. 1/10万，女性中为17. 4/10万。每年新发胃癌患者达40万 人，死亡人数达30万人，胃癌将是中国的第三大常见肿瘤(在男性中排在肺癌 和肝癌之后，女性排在乳腺癌和肺癌之后)。从2000年到2005年间，胃癌的 发病率和死亡率轻微的下降了，但这种下降的趋势是由男性引起的，相反，女 性的胃癌发病率和死亡率都有上升的趋势。人们普遍认为，胃癌发病率的下降主要与膳食方式的改变及冰箱的普及有 关。上海市区1972年男性胃癌的发病率为62/10万，女性为23.9/10万，而 1995年男女发病率分别降至36/10万和18/10万，尤以男性明显。但要警惕的 是，胃癌正在逼近年轻人，近年来我国青年人胃癌占全部胃癌总数的比率己由 上个世纪70年代的1. 7%上升到3. 3%。胃癌发病率在城市中下降，在农村中大幅上升，从1973 1975年到1990 1992年的二十年间，胃癌的发病率升高了 10%。城市人口胃癌发病率下降了 23.8%,但在农村人口中增加了 25.8%，因为 中国三分之二的人口住在农村，所以胃癌仍是所有人口中最常见的癌症之一， 而在城市中发病率居所有肿瘤的第三位。胃癌筛查可大大降低死亡率，总的说来，胃癌发病率高的地区，其患者的 生存率反而更好，这主要是由于高发病的地区的胃癌在胃部的生长部位有关。 肿瘤发生在幽门窦的预后比发生在贲门部位要好。对高风险地区的人群进行早 期筛査有助于降低死亡率，例如日本对一些地区进行了大规模的胃癌筛査，男 性的胃癌死亡率自二十世纪70年代以来几乎减少了 50%。早期胃癌5年生存率 可达95%如果胃癌仅限于胃壁的粘膜层，5年的生存率可达95%。然而，目前很少 有胃癌患者在早期被发现，导致5年生存率在20% 50%。因而早期发现，早诊 早治是提高胃癌治愈率、降低死亡率的关键。2005年美国卫生研究院、癌症研究院、疾控中心等多家单位做了一个年度 报告，"认为人类在抗癌大战中是失败"，也就是说癌症死亡率没有降低，其列 举出造成抗癌大战失败的几个因素是1.肿瘤细胞异质性；2.肿瘤细胞耐药性； 3.抗癌药物设计思路不完善等。同时，该报告中亦提出应重新审视现有诊治癌 症的措施。本专利技术人在研究中发现，导致癌症死亡率不降的另一个重要原因是，不能 做到真正的早期诊断。依照传统的医学影像及和其它生化(如蛋白标记物)指 标来诊断癌症，认为占位性癌块在2公分下是属于早期癌症的诊断(更小些有 时无症状体征)，这一概念值得认真讨论。影像医学的2公分以下癌块属早期 这一界定科学性是不够严谨的，从细胞学角度，1公分的肿块约有一亿个肿瘤细胞，2公分的肿块其三维空间的细胞叠加数远不止2亿个肿瘤细胞，从癌变 前期到单克隆癌细胞产生及形成2公分的癌块，其病理演变过程相当长，可能 是一年或两年、甚至三年以上，很难证实的是在这个过程中，肿块是癌症唯一的发生地和单独的病灶。临床上已证实 一旦形成肿块的同时，其他癌细胞通 过不同途径迁移到其他部位克隆生长； 一旦切除原发灶后，其他器官复发灶或 多发癌块灶先后形成或转移。因此，在临床上以2公分以下的肿块大小来界定 早期与否，不够严谨(有些病例，在发现原发病灶时，同时发现转移病灶，不 在我们表述的内容中)，这时已经是晚期了，这是导致癌症死亡率不降的真正 原因。随着分子生物技术日益完善，功能基因组学，癌症基因组学等研究的深入 展开，至今，我们己有可能在基因水平上做更精确的早期诊断，在癌变前期或 癌细胞形成(单克隆时)就能做到早期预测诊断。美国罗德岛医院的研究者发现两种分子标志物可用于预测胃癌患者的预 后情况。胃癌是世界上最常见，也是最致命的癌症之一。胃癌外科手术后的不 良表现通常与两种蛋白低表达量有关。这两种蛋白就是gastrokinel和 gastrokine2 (GKN1和GKN2)，通常被正常的胃细胞表达这两种蛋白。这一研 究结果与以前的研究结果一致，当胃细胞表现成癌症特征时，GKN1和GKN2蛋 白的表达量就十分低。这一研究是首次将低表达量的GKN与胃癌手术后的预后 相结合。这发现可帮助内科医生更好地诊断胃癌患者的病况，提供个性化的治 疗方案，判断哪些患者需要进行化疗，哪些患者需要接受额外的外科手术治疗。 医学博士 Steven moss说胃癌是一种很难治疗的癌症，除非能在胃癌早期就诊 断出来接受及时的治疗，但是胃癌早期通常缺乏有效的诊本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种ＧＫＮ２基因的原位杂交检测试剂盒在制备检测胃癌疾病药物中的应用，所述的试剂盒包括杂交探针、标记物，所述的杂交探针序列如ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．１所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张云福，裘建英，
申请(专利权)人：芮屈生物技术上海有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]