本发明专利技术提供一种锌离子特异性结合肽及其组合物在预防或治疗阿尔茨海默症中的应用，所述锌离子特异性结合肽的氨基酸序列为：His‑Met‑Gln‑Thr‑Asn‑His‑His，如SEQ ID NO：1所示。经过ELISA测试结果和免疫荧光测试、阿尔茨海默症小鼠活体实验等结果，表示本发明专利技术的锌离子特异性结合肽，对锌离子的亲和性高，特异性良好，毒副作用小，并能够通过结合过多的游离锌离子而减少老年斑的形成，因此对预防或治疗阿尔茨海默症有一定的疗效。
Application of zinc ion specific binding peptide and its composition in the prevention and treatment of Alzheimer's disease
The invention provides a zinc ion specific binding peptides and compositions for use in the prevention or treatment of Alzheimer's disease, the zinc ion binding specificity of the amino acid sequence of the peptide is: His Met Gln Thr Asn His His, such as SEQ ID NO:1 shown. After the test results of ELISA and immunofluorescence test, the Alzheimer's mice test results indicated the zinc ion specific binding peptide, affinity for zinc ion is high, good specificity, little side effects, and can reduce the formation of senile plaques with too much free zinc ions, so it is some effects on the prevention or treatment of Alzheimer's disease.
【技术实现步骤摘要】
锌离子特异性结合肽及其组合物在预防或治疗阿尔茨海默症中的应用
本专利技术属于生物医药
，涉及一种锌离子特异性结合肽，具体涉及一种锌离子特异性结合肽及其组合物在预防或治疗阿尔茨海默症中的应用。
技术介绍
阿尔茨海默症（Alzheimer’sdisease，AD）的发病率逐年攀升，已经成为严重威胁老年人生命健康和生活质量的主要疾病之一。此外还逐步呈现年轻化趋势，给患者及家属的生活质量带来很大影响，同时也给社会带来很大压力。AD的治疗已成为亟待解决的重要问题。在过去的20多年中，淀粉样蛋白假说一直是AD研究的焦点。AD治疗除了使用神经保护剂外，大多数药物研发集中于非正常折叠蛋白的清除。然而，1998~2011年间，大约100种基于此策略的AD药物研发是失败的。这促使人们不得不重新审视AD病理机制和新药物发现的策略。其中，许多新机制的发现也给予了生物无机化学研究者发现AD病理中金属离子的角色和金属药物应用的新契机。锌是体内重要的金属元素，参与了广泛的生理和病理生理过程。锌不仅是超过300种酶和转录因子的重要组成部分，而且是一种重要的信号分子。在AD的进展中，锌也起到非常重要的作用。目前的研究表明，Aβ沉积形成老年斑是诱发AD的主要原因之一，是AD形成和发展的重要因素，而Aβ沉积与金属离子尤其是锌离子有着密切的关系。在生理条件下，锌离子能够快速聚集Aβ，Aβ蛋白以6~28位残基与Zn2+结合，诱导Aβ聚集并形成不溶物。Zn2+与Aβ的键合可掩蔽水解位点，抑制Aβ的降解。金属鳌合剂可在一定程度上缓解AD症状，但同时也存在普遍会干扰有益的体内金属离子正常代谢的问题。在AD治疗中，金属药物可能在以下方面发挥作用：(1)通过配体和微量元素补充调节金属内稳态；(2)AD早期诊断探针；(3)BBB和神经保护金属药物。但这些金属药物在发挥药效的同时，普遍存在亲和性和选择性低下、毒副作用大、无法透过血脑屏障等问题。目前用于预防或治疗阿尔茨海默症的典型化合物有姜黄素、没食子儿茶素没食子酸酯和硫辛酸等。这些药物通过直接与铜、铁、锌等金属离子鳌合，来调节过载的游离态金属离子，使其保持在固定的正常水平，从而缓解AD病情。但如上文所述，普遍存在毒副作用大、无法透过血脑屏障等问题。因此，开发出毒性较低，能透过血脑屏障，并具有合适的亲和性和选择性的新型药物对AD的理论研究和临床治疗均具有重要意义。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供一种锌离子特异性结合肽及其组合物在预防或治疗阿尔茨海默症中的应用，该锌离子特异性结合肽特异性高并具有良好的生物相容性，能够通过结合过多的游离锌离子而有效减少老年斑的形成，对治疗阿尔茨海默症有一定疗效。本专利技术的技术方案为：第一个方面，本专利技术提供一种锌离子特异性结合肽，其氨基酸序列为：His-Met-Gln-Thr-Asn-His-His（SEQIDNO：1，命名为P-Zn）。第二个方面，本专利技术提供一种药物组合物，所述药物组合物包括上述锌离子特异性结合肽和可药用载体。上述锌离子特异性结合肽可与锌离子特异性结合且结合强度高，具有良好的生物相容性，能较快地通过血脑屏障，并有效减少老年斑的形成，因此，可以用于阿尔茨海默症的预防或治疗。故在本专利技术的第三个方面，提供了上述锌离子特异性结合肽在用于预防或治疗阿尔茨海默症中的用途。第四个方面，提供了上述药物组合物在用于预防或治疗阿尔茨海默症中的用途。第五个方面，本专利技术提供一种预防或治疗阿尔茨海默症的方法，所述方法包括向有需要的个体给予有效量的锌离子特异性结合肽或者给予有效量的包括所述锌离子特异性结合肽和可药用载体的药物组合物。与现有技术相比，本专利技术的特点和有益效果是：本专利技术的锌离子特异性结合肽，对锌离子的亲和性高，特异性良好，毒副作用小，并能够通过结合过多的游离锌离子而减少老年斑的形成，因此对预防或治疗阿尔茨海默症有一定的疗效。附图说明图1为本专利技术实施例的锌离子特异性结合肽（P-Zn）的筛选流程，共进行一轮预筛选和四轮亲和性筛选。图2为本专利技术实施例的锌离子特异性结合肽的细胞毒性检测结果，其中图2-a为不同浓度P-Zn在不同时间对N2aSw细胞活性的影响情况；图2-b为N2aSw细胞活性随共同加入的不同浓度P-Zn、Zn2+的变化曲线。图3为通过电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)检测本专利技术实施例的锌离子特异性结合肽在N2aSw细胞中的浓度结果，其中图3-a为通过ICP-MS检测细胞内金属离子的过程示意图；图3-b为本专利技术实施例中三个实验组（对照组、锌离子组和锌离子特异性结合肽组）的细胞内锌离子含量示意图。图4为本专利技术实施例中三个实验组（对照组、锌离子组和锌离子特异性结合肽组）Aβ的ELISA测试结果和免疫荧光测试结果，其中图4-a为Aβ的ELISA测试结果；4-b为Aβ的免疫荧光测试结果。图5为本专利技术实施例中小动物活体成像图，图5-a为鼻饲给药方式下，标记FITC的P-Zn不同时间在小鼠体内的分布情况；图5-b为24h后小鼠主要器官内药物的分布情况。具体实施方式下面结合具体的实施例对本专利技术做进一步详细说明，所述是对本专利技术的解释而不是限定。第一个方面，本专利技术具体实施例中提供了具有下述氨基酸序列的锌离子特异性结合肽：His-Met-Gln-Thr-Asn-His-His。上述锌离子特异性结合肽可与锌离子特异性结合且结合强度高，具有良好的生物相容性，能较快地通过血脑屏障，并有效减少老年斑的形成，因此，可以用于阿尔茨海默症的预防或治疗。故第二个方面，本专利技术具体实施例提供了上述锌离子特异性结合肽在用于预防或治疗阿尔茨海默症中的用途。所述的“预防”是指减少个体患上病症的风险或者延迟患者患病或者症状出现的时间。所述的“治疗”是指减轻或者缓解疾病的症状和/或减少了导致疾病症状的一种或多种潜在的细胞、生理或生物化学病因或机理。第三个方面，本专利技术具体实施例提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括上述锌离子特异性结合肽和可药用载体。所述的“可药用载体”是指在生物学上或其他方面不会具有不良作用的物质，并且将该物质与本专利技术的锌离子特异性结合肽一同给予受体时，不会引起任何不良的生物学反应或以有害的方式与所述药物组合物的任何其他成分相互作用。合适的载体包括但不限于：抗氧化剂、防腐剂、着色剂、调味剂、稀释剂、乳化剂、悬浮剂、溶剂、填充剂、增粘剂、缓冲剂、赋形剂等。比如，载体可选用壳聚糖温敏凝胶，采用壳聚糖与甘油磷酸钠体系作为P-Zn的载药系统，利用载药系统的室温时呈溶液状态，而体温时则形成凝胶的特点，以达到鼻腔给药后，凝胶粘附于鼻腔内的目的，从而达到提高药物疗效、更好的降低药物毒副作用的效果。本专利技术具体实施例的药物组合物还可以包括用于调节所述锌离子特异性结合肽释放速率的载体，比如缓释载体。而这类缓释载体是本领域技术人员所熟知的。本专利技术具体实施例的药物组合物的成品形式可以为溶液、混悬液、凝胶、乳剂、固体剂。这些制剂可以以即用形式、用前即配的冻干粉形式或用前稀释的液体形式储存。优选地，本专利技术具体实施例的药物组合物的成品形式为溶液，储存方式为用前即配的冻干粉形式。第四个方面，本专利技术具体实施例提供了上述药物组合物在用于预防或治疗阿尔茨海默症中的用途。第五个方面，本专利技术具体实施例提供一种预防或治疗本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种锌离子特异性结合肽，其特征在于，其氨基酸序列为：His‑Met‑Gln‑Thr‑Asn‑His‑His，如SEQ ID NO：1所示。
【技术特征摘要】
1.一种锌离子特异性结合肽，其特征在于，其氨基酸序列为：His-Met-Gln-Thr-Asn-His-His，如SEQIDNO：1所示。2.一种锌离子特异性结合肽在用于预防或治疗阿尔茨海默症中的用途，其特征在于，所述锌离子特异性结合肽的氨基酸序列为：His-Met-Gln-Thr-Asn-His-His，如SEQIDNO：1所示。3.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括锌离子特异性结合肽和可药用载体，所述锌离子特异性结合肽的氨基酸序列为：His-Met-Gln-Thr-Asn-His-His，如SEQIDNO：1所示。...
【专利技术属性】
技术研发人员：张晓雨，高慧玲，钟曼丽，王占友，
申请(专利权)人：东北大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21
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