一种新的多肽——甘油醛-3-磷酸脱氢酶10和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－甘油醛－３－磷酸脱氢酶１０，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如能量及物质代谢紊乱性疾病、神经性疾病、发育紊乱症、各种肿瘤、炎症、免疫性疾病等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的甘油醛－３－磷酸脱氢酶１０的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽--甘油醛-3-磷酸脱氢酶10，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)是一种NAD-结合的四聚体酶，在糖酵解以及葡糖异生途径中普遍存在(Harris J.I.,Waters M.,The Enzymes(3rd edition)13:1-50(1976))。在该蛋白分子的中间有一个半胱氨酸参与共价磷酸甘油硫酯中间物的形成。该半胱氨酸周围的序列在真细菌及真核生物的GAPDH中完全保守，这段保守的特征序列模板为-S-C--T-x(2)-，其中的C(半胱氨酸)为活性位点残基(Zhao G.,Pease A.J.,Bharani N.,Winkler M.E.,J.Bacteriol.177:2804-2812(1995))。GAPDH具有许多酶活性以及结合活性。其主要的酶活性是作为一种尿嘧啶DNA糖基化酶存在于糖酵解/葡糖异生中(K.Meyer-Siegler et al.,Proc.Natn.Acad.Sci.USA 88:8460-8464(1991))。GAPDH的其他功能包括结合tRNA(R.Singh and M.Green,Science 259:365-368(1993))，结合RNA的富含AU域(E.Nagy and W.Rigby,J.Biol.Chem.270:2755-2763(1995))，结合ATP(A.Nakai et al.,Biochem.Biophys.Res.Commun.176:59-64(1991))以及钙细胞周期蛋白(F.Zeng et al.,Int.J.Biochem.25:1019-1027(1993))。GAPDH与淀粉样前体蛋白的C-端域形成复合物(H.Schulze etal.,J.Neurochem.60:1915-1922(1993))。GAPDH还与真核生物葡萄糖转运蛋白结合(M.Lachaal et al.,J.Bio1.Chem.265:15449-15454(1990))，与肌动蛋白(C.Mejean et al.,Biochem.J.264:671-677(1989))以及微管蛋白结合(M.Somers et al.,J.Eur.J.Biochem.193:437-444(1990))。GAPDH与由具有CAG重复域基因编码的蛋白的膨胀多聚谷氨酰胺域结合会影响GAPDH的酶或结构功能从而引发遗传性神经变性疾病，导致脆性神经元的死亡，并与特定的精神疾病有关(A.Roses,J.NIH Res.7:51-57(1995))。本专利技术的多肽与甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)家族成员具有相同的特征序列模板，并具有相似的生物学功能，故而认为该多肽是甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)家族的新成员，该多肽及其抑制剂，激动剂，拮抗剂可用与诊断兼防治与能量代谢有关的疾病以及遗传性神经变性疾病等特定的精神疾病。命名甘油醛-3-磷酸脱氢酶10由于如上所述甘油醛-3-磷酸脱氢酶10蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的甘油醛-3-磷酸脱氢酶10蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新甘油醛-3-磷酸脱氢酶10蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽--甘油醛-3-磷酸脱氢酶10以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码甘油醛-3-磷酸脱氢酶10的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码甘油醛-3-磷酸脱氢酶10的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产甘油醛-3-磷酸脱氢酶10的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽--甘油醛-3-磷酸脱氢酶10的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽--甘油醛-3-磷酸脱氢酶10的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与甘油醛-3-磷酸脱氢酶10异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中235-522位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1745位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制甘油醛-3-磷酸脱氢酶10蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与甘油醛-3-磷酸脱氢酶10蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于甘油醛-3-磷酸脱氢酶10表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－甘油醛－３－磷酸脱氢酶１０，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]