一种新的多肽--人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人棕榈酰蛋白硫酯酶２－２１．１２，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如婴儿神经蜡样质脂褐质沉淀症、神经性疾病、脂类代谢病等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人棕榈酰蛋白硫酯酶２－２１．１２的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。棕榈酰蛋白硫酯酶(PPT)是一种细胞溶酶体酶，在人的神经变性贮藏失调、婴儿神经蜡样质脂褐质沉淀症中该酶的含量降低(Camp and Hofmann，1993；Campet al.，1994；Verkruyse and Hofmann，1996；Vesa et al.，1995)。其中PPT1在脂溶性蛋白的新陈代谢中起着重要的作用，它能水解硫酯键，将脂肪酸与S-脂肪酸酰化蛋白的Cys残基相连接(Luet al.，1996)。另一种溶酶体硫酯酶PPT2与PPT1有20％的同源性(Soyombo and Hofmann，1997)，PPT2对于棕榈酰化的底物表现出高度活性，比如棕榈酰辅酶A。与PPT1相似，PPT2通过甘露糖-6-磷酸受体旁路在溶酶体中发挥作用，并且在溶酶体硫酯分解代谢中起作用。PPT2在溶酶体中的功能是独特的，实验表明，在PPT1代谢缺陷的细胞中，PPT2的存在并不能代替PPT1，产生与之相同的作用(Soyombo and Hofmann，1997)。与PPT1相比，PPT2是一种致密性基因，位于染色体6p21.3的MHC III位点上。在不同的组织中，PPT2可以产生可变更的转录产物，PPT2基因至少能够被三种不同的促进子转录，因此产生不同的mRNA。位于上游的促进子产生一条相对较大的mRNA，编码过氧化物酶体相关的硫解酶；位于下游的促进子产生一条较小的mRNA，编码一种细胞外脂转运蛋白SCP2，大蛋白通过N末端延伸段与小蛋白相连。在一些中枢神经系统中，PPT2没有表现出特别高的表达量，但是PPT2缺陷现象却只出现在外周组织中。婴儿神经蜡样质脂褐质沉淀症(INCL)是一种最严重形式的小儿神经变性疾病，表现出认知和运动损伤、抽搐和进行性失明，甚至会导致植物性状态(Santavuori，1988)，研究显示主要与溶酶体贮藏失调密切相关。许多的临床失调疾病都与染色体上MHC位点的一些基因产物相关联。本专利技术的多肽与上述的棕榈酰蛋白硫酯酶2(PPT2)有61％的相同性，71％的相似性，并且包含棕榈酰蛋白硫酯酶2特征性的保守序列，因此认为此蛋白是一种新的蛋白硫酯酶，具有与棕榈酰蛋白硫酯酶2相似的生物学功能，并命名为人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12。由于如上所述人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中175-753位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-1370位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与人棕榈酰蛋白硫酯酶2-21.12结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂可本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人棕榈酰蛋白硫酯酶２－２１．１２，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]