一种多肽--二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5以及具有这个二磷酸腺苷核糖二磷酸酶的药学化合物制造技术

本发明专利技术公开了一种多肽－二磷酸腺苷核糖二磷酸酶－３８．５，和具有这个二磷酸腺苷核糖二磷酸酶的药学化合物。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如原发性高血压、消化性溃疡、肾病综合征、支气管哮喘、震颤麻痹等。本发明专利技术还公开了编码这种新的二磷酸腺苷核糖二磷酸酶－３８．５的多核苷酸的用途。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物领域，描述了一种纯的具有生物活性的二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5，和具有这个二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5的药学化合物。在所有的细胞中，二磷酸腺苷核糖(ADP-核糖)是NAD+和(ADP-核糖)蛋白单体的代谢产物，此外，在高等生物中它是多聚二磷酸腺苷核糖以及CADP-核糖的水解产物。如果在体内积聚，它会成为潜在的生物毒素。通过二磷酸腺苷核糖的非酶促糖化能力来调节蛋白质组胺酰基、赖胺酰基以及半胱氨酰基基团，并且还能通过这种能力来连接ATP激活的K+通道。Nudix水解酶家族的一些成员对于二磷酸腺苷核糖具有高度的专一性，并且在它们底物特定的范围内包含有二磷酸腺苷核糖。这些水解酶是二磷酸化酶也可能是焦磷酸化酶，它们能够产生AMP以及5’-磷酸核糖作为产物。这些特异的酶包括NUDT5以及Nudt5等等，它们具有更大的底物专一性并且能以不同的效率对诸如ADP-糖、NADH以及Ap3A等底物进行降解。这些Nudix水解酶可能在保持细胞内的二磷酸腺苷核糖在亚毒素的水平具有重要作用，而Nudix水解酶家族的主要的功能是清理作用。我们这里所研究的人类NUDT9基因编码了一个特殊的镁离子依赖的二磷酸腺苷核糖二磷酸酶，它是以两种结合变体的形式存在的NUDT9α以及NUDT9β。NUDT9α可能具有线粒体N-末端目标信号的作用。由于如上所述二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础。本专利技术的另一个目的是提供生产二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5的方法。本专利技术的另一个目的是提供纯化二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5的方法。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5异常相关的疾病的方法。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗原发性高血压、消化性溃疡、肾病综合征、支气管哮喘、震颤麻痹或其它由于二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术涉及悬浮液的浓缩物，按照本专利技术在给药前不久将该浓缩物转变成浮悬制剂。这些浓缩物可以具有各种组成。本专利技术也包括浓缩液和/或悬浮剂与稀释所需要的溶剂或溶液之间的进一步的组合，由此得到了本专利技术的悬浮剂。本专利技术也涉及另外的表现形式或各种表现形式的结合，所有这些最终都导致了本专利技术的注射液。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“拮抗剂”或“抑制物”是指当与二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5结合时，一种可封闭或调节二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5的生物学活性或免疫学活性的分子。拮抗剂和抑制物可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5的分子。“激动剂”是指当与二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5的分子。本专利技术纯化步骤的顺序是阳离子交换，亲和层析，超滤，凝胶渗透(加上回收组分的超滤)和阴离子交换。在此纯化方法后，用的都是传统技术。为了储藏或处理的目的，产物就应该被冻干。其它对于影响产物浓缩、稳定或其它过程的合适的步骤已经成熟。可以将本专利技术的酶及其模拟物、激动剂、拮抗剂和抑制剂与合适的药物载体组合后用。这些载体可以是水、葡萄糖、乙醇、盐类、缓冲液、甘油以及它们的组合。组合物包含安全有效量的多肽或拮抗剂以及不影响药物效果的载体和赋形剂。这些组合物可以作为药物用于疾病治疗。本专利技术还提供含有一种或多种容器的药盒或试剂盒，容器中装有一种或多种本专利技术的药用组合物成分。与这些容器一起，可以有由制造、使用或销售药品或生物制品的政府管理机构所给出的指示性提示，该提示反映出生产、使用或销售的政府管理机构许可其在人体上施用。此外，本专利技术的多肽可以与其它的治疗化合物结合使用。药物组合物可以以方便的方式给药，如通过局部、静脉内、腹膜内、肌内、皮下、鼻内或皮内的给药途径。二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5以有效地治疗和/或预防具体的适应症的量来给药。施用于患者的二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5的量和剂量范围将取决于许多因素，如给药方式、待治疗者的健康条件和诊断医生的判断。二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5可以以水和/或油注射剂加应用，或作为与某种酸或碱形成的盐来使用。以前药的形式，例如酯，加以应用也是可能的。作为注射用时，除了水外，肌肉注射的水悬浮液也可以含有液体赋形剂，例如，乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、三甘醇。各种物质的缓冲溶液如磷酸盐、柠檬酸盐、三羟甲基氨基甲烷、抗坏血酸盐、乙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、葡糖酸和乳酸盐的缓冲液均可用于调节PH值使之尽量在生理范围之内(大约PH7.4)或作为缓冲之用。本专利技术水溶液制剂的PH为4.5-8.5，最好是6.5-7.5。水悬浮液的同渗重摩(osmolality)是200-900 m osmol/kg，最好是260-390mosmol/kg，而且可通过加入氯化钠、葡萄糖、果糖、甘油、山梨醇、甘露糖醇、蔗糖、木糖醇或这些物质的混合物，来调节到一个适当的等渗条件。此外，还可以应用一些其他的配方试剂，例如增调剂(如甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮、明胶等)，吸附剂，光的遮蔽剂，吸附抑制剂，结晶阻滞剂，络合剂(如，NaEDTA、磷酸盐、硝酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐以及其他盐)抗氧化剂(抗坏血酸、亚硫酸盐化含物、L-半胱氨酸、亚硫基二丙酸、硫羟乳酸、单疏代甘油、酸丙酯(propyl gall-ate)等)，防腐剂(PHB酯、酚及其衍生物、有机汞化合物、氯丁醇、苯甲醇、乙醇、1，3-丁二醇、benzalkonium chlorideChlorhexidline salts、苯甲酸及其盐、山梨酸及其他)。如果合适的话，局部麻醉剂，比如像普鲁卡因盐酸盐、利多卡因盐酸盐诸如此类，可以加进水悬浮液中。在制备水悬浮液时，必须保颗粒的大小在0.5-150μm。特别为4-40μm。可以通过控制混合活性物质的不同大小颗粒来实现活性物质自肌内悬浮库的控制释放。对于水悬浮液的情形，90％颗粒的大小最好在10-20μm。水悬浮液的粘励5-500mPa·s，最好是10-130mPa·s。二磷酸腺苷核糖二磷酸酶-38.5的水悬浮液可以采用不同的方法制备。一种方法是将某种促旋酶抑制剂活性化合物以微粒形式加进水赋形介质中，当然包括已经提及的辅助剂；采用这种工艺时，应该严格保证不能使结晶的生长超出上述界限。在某些情况下，活性化合物必须先制作成它的一种稳定的水合物的形式，然后再进一步加工成一种悬浮液。如果最后灭菌不宜用加热法的话，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－二磷酸腺苷核糖二磷酸酶－３８．５，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]