一种三叶青多糖的提取方法技术

本方法公开了一种新型提取三叶青多糖的方法，该方法包括：取三叶青藤叶部位，烘干，将其通过珠磨法粉碎，然后用热水浸提，并加入一定量的纤维素酶，一段时间后灭活酶，抽滤，浓缩，加入无水乙醇，过夜醇沉得到三叶青多糖粗品。本发明专利技术方法存在操作简单，原料易得，适合大规模生产等优点。而且本发明专利技术通过纳米冲击磨制备到的三叶青粉末，粒径达到纳米范围，多糖溶出更加迅速，其次在纤维素酶辅助提取的条件下，总体上使三叶青多糖的提取率显著增加，并提高了提取速率，降低了时间成本，提高了企业效益。

A method for extraction of trifoliate polysaccharides

The invention discloses a new method of extracting clover polysaccharide. The method includes: ivy leaf clover, drying, the bead mill grinding, and then use hot water extraction, cellulase and adding a certain amount of, after a period of inactivation of enzyme, filtering, concentrating, adding anhydrous ethanol overnight, alcohol by clover crude polysaccharides. The method of the invention has the advantages of simple operation, easy to get raw materials and suitable for large-scale production. And the invention by nano powder preparation to impact mill clover, particle size to nanometer range, the polysaccharide solubility more rapidly, followed by cellulase assisted extraction conditions, the extraction of total clover polysaccharides rate increased significantly, and increase the extraction rate, reduce the time and cost, improve the efficiency of enterprises.

【技术实现步骤摘要】
一种三叶青多糖的提取方法
本专利技术涉及保健食品加工
，具体地涉及一种三叶青多糖的提取方法，更具体地，是一种利用珠磨法粉碎结合纤维素酶辅助提取多糖的方法。
技术介绍
三叶青（TetrastigmahemsleyanumDielsetGilg）学名三叶芽爬藤，又名金线吊葫芦，属于葡萄科草本植物，主要分布在我国西南地带以及福建，安徽等地区。三叶青的全草均可入药，具有提高免疫力、抗病毒、消炎等作用，尤其对小儿高热惊厥、肺炎、病毒性脑炎等症状具有显著疗效，是常用的中草药之一。三叶青多糖是三叶青的主要活性成分之一，呈浅棕色，粉末细腻无杂质，具有一定吸潮性和粘性。三叶青多糖由鼠李糖，阿拉伯糖，甘露糖，葡萄糖，半乳糖等组成，可作为抗炎药物或者免疫调节剂，同时具备抗病毒、抗肿瘤等作用，广泛应用于医药及功能食品领域，具有很好的市场前景。目前，常用的三叶青多糖的提取方式主要为水提醇沉法，但是水提醇沉法在提取过程中存在的提取率低、纯度低、时间成本高等缺陷，并不能很好地适应现代天然产物活性物质的制备技术的发展趋势。珠磨法粉碎技术是指用纳米冲击磨对物料进行粉碎，粉碎后的物料粒径可达纳米级别，与其他粉碎方法相比，珠磨法粉碎后粒径更小，在溶剂提取内容物的过程里，比表面积相对更大，更有利于内容物的溶出，提高提取效率。生物酶法预处理是根据三叶青细胞壁的结构组成，利用纤维素酶，高度选择性的水解细胞壁主要成分纤维素，进而使细胞壁的组成成分水解或降解，促进多糖成分充分暴露出来溶于提取溶剂中，从而达到提高多糖提取率的效果。
技术实现思路
本专利技术主要解决的技术问题是针对现有技术中三叶青多糖的提取过程里存在提取率低、提取速度慢等缺陷，建立出一种新的三叶青多糖的提取方法，具体是指，酶解联合珠磨法辅助提取三叶青多糖。本专利技术的目的通过一下技术方案予以实现：一种三叶青多糖的提取方法，包括如下步骤：S1.将三叶青的藤叶部位经过纳米冲击磨粉碎得到三叶青粉末；S2.将三叶青粉末4~7份，去离子水20~40份，酶0.1~0.5份在40~70℃、PH3~7条件下酶解处理3~5小时；所述份数均为重量份数。S3.灭酶，水提，抽滤，浓缩滤液，加入乙醇溶液使多糖沉淀，取沉淀干燥得三叶青多糖。优选地，步骤S2为将三叶青粉末5份，无菌水30份，纤维素酶0.3份，在55℃、pH4.5的条件下酶解处理3.5h；所述份数均为重量份数。优选地，所述的酶为纤维素酶，果胶酶。最优选地，所述的酶为纤维素酶。步骤S1所述粉碎时间为12h。步骤S3所述灭酶为80~100℃灭酶5~20min；优选地，所述灭酶为100℃灭酶10min。步骤S3所述水提取为40~90℃提取3~8h；优选方案为60℃提取7h。步骤S3所述浓缩为真空浓缩，真空浓缩条件为在真空度为75~95kPa、浓缩温度为50~80℃条件下浓缩50~120min；优选方案为：在真空度为95kpa、浓缩温度为70℃条件下浓缩90min。步骤S3所述乙醇沉淀为向浓缩液中加入浓缩液体积2~5倍的体积浓度为85~100%乙醇溶液，醇沉10~25h；优选方案为向浓缩液中加入4倍浓缩液体积的无水乙醇，醇沉20h。步骤S3所述干燥方法为冷冻干燥，干燥温度为-40~-70℃，真空度为1~10pa，干燥时间为10~20h；优选方案为在干燥温度为-65℃，真空度为1pa,干燥时间为12h。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：珠磨法粉碎联合酶法辅助提取三叶青多糖存在原料易得，操作简单，适合于大规模产业化生产。而且本专利技术所述方法一方面减少了提取次数，其次在大大缩短了原有水提法浸提时间，降低了时间成本，提高了企业的经济效益。附图说明图1为不同提取方法对三叶青多糖提取率的影响。具体实施方法下面结合说明书附图具体实施例进一步详细说明本专利技术。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、设备为本
常用试剂和设备。本专利技术所述的黄芪多糖的提取原料为福建南平三叶青的藤叶。实施例1一种三叶青多糖的提取方法，包括如下步骤：预处理：去除福建三叶青藤叶上的尘土等杂质；S1.将三叶青藤叶烘干，经过普通粉碎机粉碎，过筛；所述粉碎时间为12h；所述粉碎后过80目筛；S2.将三叶青粉末5份，无菌水30份，在60℃条件下处理6h；所述份数均为重量份数；S3.抽滤；在真空度为95kpa、浓缩温度为70℃条件下浓缩90min得浓缩液；向浓缩液中加入浓缩液体积4倍的无水乙醇，醇沉20h；最后在干燥温度为-65℃，真空度为1pa,干燥时间为12h得三叶青多糖。实施例2一种三叶青多糖的提取方法，包括如下步骤：预处理：去除福建三叶青藤叶上的尘土等杂质；S1.将三叶青藤叶烘干，经过纳米冲击磨粉碎成纳米级粉末，所述粉碎时间为12h；S2.将三叶青粉末5份，无菌水30份，在60℃条件下处理6h；所述份数均为重量份数；S3.抽滤；在真空度为95kpa、浓缩温度为70℃条件下浓缩90min得浓缩液；向浓缩液中加入浓缩液体积4倍的无水乙醇，醇沉20h；最后在干燥温度为-65℃，真空度为1pa,干燥时间为12h得三叶青多糖。实施例3一种三叶青多糖的提取方法，包括如下步骤：预处理：去除福建三叶青藤叶上的尘土等杂质；S1.将三叶青藤叶烘干，经过纳米冲击磨粉碎成纳米级粉末，所述粉碎时间为12h；S2.将三叶青粉末5份，无菌水30份，纤维素酶0.3份，在55℃、pH4.5的条件下酶解处理3.5h；所述份数均为重量份数；S3.100℃灭酶10min；然后60℃提取7h；抽滤；在真空度为95kpa、浓缩温度为70℃条件下浓缩90min得浓缩液；向浓缩液中加入浓缩液体积4倍的无水乙醇，醇沉20h；最后在干燥温度为-65℃，真空度为1pa,干燥时间为12h得三叶青多糖。实施例4一种三叶青多糖的提取方法，包括如下步骤：预处理：去除福建三叶青藤叶上的尘土等杂质；S1.将三叶青藤叶烘干，经过纳米冲击磨粉碎成纳米级粉末，所述粉碎时间为12h；S2.将三叶青粉末5份，无菌水30份，果胶酶0.3份，在55℃、pH4.5的条件下酶解处理3.5h；所述份数均为重量份数；S3.100℃灭酶10min；然后60℃提取7h；抽滤；在真空度为95kpa、浓缩温度为70℃条件下浓缩90min得浓缩液；向浓缩液中加入浓缩液体积4倍的无水乙醇，醇沉20h；最后在干燥温度为-65℃，真空度为1pa,干燥时间为12h得三叶青多糖。实施例5分别比较实施例1~4所述三叶青多糖的提取方法的三叶青多糖提取率的高低，结果显示：实施例1和2分别比较了三叶青经过普通粉碎和纳米冲击磨粉碎后，其他条件均相同的条件下，使用纳米冲击磨对三叶青进行粉碎后，提取效果最好，提取率为6.02%，而普通粉碎得到的三叶青粉末，多糖提取率为3.83%。实施3和4分别比较了三叶青经过纳米冲击磨粉碎后，通过果胶酶和纤维素酶分别辅助提取三叶青多糖，在其他反应条件相同情况下，纤维素酶辅助提取多糖的提取率为14.3%，果胶酶辅助提取多糖的提取率为13.5%。四种不同提取方法对三叶青多糖提取率的影响结果见图1，由图1可以看出，不同提取方法对三叶青多糖的提取率影响较为显著，经过纳米冲击磨粉碎处理的实验组与普通粉碎实验组相比，三叶青多糖提取率提高了57.18%；经过纳米冲击磨粉碎后的三叶青，用不同酶辅助提取本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种三叶青多糖的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.三叶青藤叶烘干，经过纳米冲击磨进行粉碎，得到纳米级的三叶青粉末；S2.将三叶青粉末4~7份，去离子水20~40份，酶0.1~0.5份在40~70℃、PH 3~7条件下酶解处理3~5小时；所述份数均为重量份数；S3.灭酶，水提，抽滤，浓缩滤液，加入乙醇溶液使多糖沉淀，取沉淀干燥得三叶青多糖；步骤S1所述粉碎时间为12h；步骤S2所述酶为纤维素酶或果胶酶。

【技术特征摘要】
1.一种三叶青多糖的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.三叶青藤叶烘干，经过纳米冲击磨进行粉碎，得到纳米级的三叶青粉末；S2.将三叶青粉末4~7份，去离子水20~40份，酶0.1~0.5份在40~70℃、PH3~7条件下酶解处理3~5小时；所述份数均为重量份数；S3.灭酶，水提，抽滤，浓缩滤液，加入乙醇溶液使多糖沉淀，取沉淀干燥得三叶青多糖；步骤S1所述粉碎时间为12h；步骤S2所述酶为纤维素酶或果胶酶。2.根据权利要求1所述三叶青多糖的提取方法，其特征在于，步骤S2为将三叶青粉末5份，无菌水30份，酶0.3份，在55℃、pH4.5的条件下酶解处理3.5h；所述份数均为重量份数。3.根据权利要求1所述三叶青多糖的提取方法，其特征在于，步骤S2所述酶为纤维素酶。4.根据权利要求1所述三...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱彬，茹翌，郭隆华，林振宇，陈国南，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：福建,35