【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种用于基因点突变检测和单核苷酸多态性分析的。
技术介绍
目前,检测基因点突变的常用方法有限制性片段长度多态性、变性梯度凝胶电泳、化学错配裂解、酶错配裂解、单链构象多态性、等位特异性探针杂交、连接酶链式反应和竞争性寡核苷酸引物等。这些基于电泳分析的传统检测方法大多存在操作复杂、费时、需要使用放射性元素或溴化乙锭等有害物质的缺点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种用于基因点突变检测和单核苷酸多态性分析的。该法操作简便、安全、快速,结果直观,无需特殊仪器,检测费用低。本专利技术的包括如下步骤(1)根据突变位点设计等位特异性引物,该引物的3’端碱基与突变型基因的突变碱基互补,而与野生型基因不互补。(2)进行等位特异性扩增,突变型基因顺利扩增出双链DNA(称扩增产物1);而野生型基因不被扩增,反应产物中含有大量未被消耗的单链DNA—引物(称扩增产物2)。(3)向纳米金溶胶中依次加入扩增产物和电解质溶液。当加入扩增产物1时,因为纳米颗粒表面没有吸附DNA,加入电解质溶液将导致纳米金聚集,溶液颜色由红色变蓝色;而当加入扩增产物2时,单链DNA被吸附到纳米金颗粒表面,使其保持稳定,加入电解质溶液后溶液仍保持红色。本专利技术是将等位特异性扩增和纳米金探针结合进行基因点突变检测,其检测基本原理如下在纳米金颗粒形成聚集的过程中,由于表面共振吸收光谱峰值的改变,其溶液颜色随聚集程度逐渐由红色变成蓝色。在纳米金溶胶中加入电解质溶液,能够引起纳米颗粒的聚集,溶胶颜色变蓝;而表面吸附了DNA的纳米金颗粒能在电解质溶液中保持稳定状态,溶液颜色不变。当纳米金分别与 ...
【技术保护点】
一种等位特异性扩增与纳米金探针结合的基因点突变检测方法,其特征在于包括如下步骤: (1)根据突变位点设计等位特异性引物,该引物的3’端碱基与突变型基因的突变碱基互补,而与野生型基因不互补; (2)进行等位特异性扩增,突变型基因顺利扩增出双链DNA(称扩增产物1);野生型基因不被扩增造成反应产物中含有未被消耗的单链DNA-引物(称扩增产物2); (3)向纳米金溶胶中依次加入扩增产物和电解质溶液,加入扩增产物1将导致溶液颜色由红色变蓝色;加入扩增产物2导致溶液仍保持红色。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:邢达,周政,朱德斌,
申请(专利权)人:华南师范大学,
类型:发明
国别省市:81[中国|广州]
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