血管紧张素转换酶2基因与原发性高血压的相关性制造技术

本发明专利技术公开了一种检测原发性高血压易感性的方法，它包括检测个体的血管紧张素转换酶２基因ＡＣＥ２、转录本和／或蛋白与正常相比是否存在变异，存在变异就表明该个体患原发性高血压的可能性大于正常人群。本发明专利技术还公开了相应的检测试剂盒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学和医学领域。更具体地涉及人血管紧张素转换酶2基因(Angiotensin converting enzyme 2 gene，ACE2)的单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphism，SNP)及其与原发性高血压的相关性。本专利技术还涉及检测这些SNP的方法和试剂盒。
技术介绍
原发性高血压(essential hypertension，EH)是最常见的心血管疾病，其发病率逐年上升，并可引起严重的心、脑、肾并发症，是脑卒中和冠心病的主要危险因素。EH是一种由遗传因素和环境因素相互作用而发病的多基因病，寻找EH相关基因进而阐明高血压发病的遗传机制已经成为目前研究的热点(HarrapSB.Hypertensiongenes versus environment.Lancet，1994，344169-171)。肾素-血管紧张素(RAS)系统是体内调节血压和水盐代谢的重要系统。血管紧张素II(AngII)是RAS系统中一个重要的血管收缩剂，血管紧张素转换酶(ACE)主要将血管紧张素I(AngI)转换成AngII，而ACE2却将AngI转化成血管舒张剂Ang(1-7)，并且这种作用是不被ACE抑制剂所阻滞的(Tipnis SR，Hooper NM，Hyde R，et al.A human homolog of angiotensin-converting enzymecloningand functional expression as a captopril-insensitive carboxypeptidase.J Biol Chem 2000；27533238-33243)。近年来有许多研究提示ACE2与血压和心血管结构功能的关系密切。小鼠ace2基因的定位相当于人的X染色体，该部位存在与血压相关的数量性状位点(Hilbert P，Lindpaintner K，BeckmannJS，et al.Chromosomal mapping of two genetic loci associated withblood-pressure regulation in hereditary hypertensive rats.Nature1991；353521-529)，ace2基因敲除小鼠的基础血压较正常小鼠高10-20mmHg(Allre AJ，Donoghue M，Acton S，et al.Regulation of blood pressureby the angiotensin converting enzyme homologue ACE2.Paper presentedat35th Annual Meeting of the American Society of Nephrology；November1-4，2002；Philadelphia，PA)，提示ace2可能是X染色体上与血压相关的候选基因。同时研究发现ace2基因敲除小鼠的心脏功能发生了严重的损害，果蝇ACER基因(ACER相当与人的ACE2基因)敲除后，也出现了心脏管的形成缺陷，导致心脏祖细胞数量减少和中胚层的发育异常(Crackower MA，Sarao R，Oudit GY，et al.Angiotensin-converting enzyme 2 is an essentialregulator of heart function.Nature 2002；417822-823)。因此，已有学者提出了ACE2基因调节血压的假说机制，并认为ACE2可能成为心血管治疗中的一个重要的靶点，但目前没有证实ACE2基因与原发性高血压相关性的报道，更没有证实ACE2基因的SNP与原发性高血压相关性的报道。综上所述，为了最终实现治疗高血压，本领域迫切需要寻找原发性高血压易感基因，并开发检测原发性高血压的方法、试剂盒，以及相关的治疗药物。
技术实现思路
本专利技术的目的就是提供一种辅助性诊断(尤其是早期诊断)高血压等高血压的方法及检测试剂盒。本专利技术的另一目的是提供一种新的治疗高血压的方法。本专利技术的再一目的是提供一种治疗高血压的药物组合物。在本专利技术的第一方面，提供了一种对个体的高血压易感性进行辅助性诊断的方法，它包括步骤检测该个体的ACE2基因、转录本和/或蛋白，并与正常的ACE2基因、转录本和/或蛋白相比较，存在差异就表明该个体患高血压的可能性高于正常人群。在另一优选例中，检测的是ACE2的基因或转录本，并与正常ACE2核苷酸序列比较差异。在另一优选例中，所述的差异是选自下组的单核苷酸多态性1790位A→G；16286位G→A；28308位A→G；36150位A→G；其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO1。在本专利技术的第二方面，提供了一种检测样品是否存在ACE2基因的单核苷酸多态性的方法，包括步骤(a)用ACE2基因特异性引物扩增样品的ACE2基因，得到扩增产物；和(b)检测扩增产物中是否存在选自下组的单核苷酸多态性11790位A→G；16286位G→A；28308位A→G；36150位A→G； 其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO1。在另一优选例中，所述的单核苷酸多态性是28308位AG。在本专利技术的第三方面，提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的ACE2蛋白以及药学上可接受的载体。还提供了严重ACE2基因和蛋白的用途，它们被用于(a)制备辅助性检测的试剂；或(b)制备治疗高血压的药物。在本专利技术的第四方面，提供了一种用于辅助性检测高血压的试剂盒，它包括特异性扩增ACE2基因或转录本的引物和说明书。在另一优选例中，所述的试剂盒还含有选自下组的试剂(a)与突变部位结合的探针；(b)识别突变位点的限制性内切酶。在另一优选例中，所述的突变选自11790位A→G；16286位G→A；28308位A→G；36150位A→G；其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO1。更佳地，所述的单核苷酸多态性是28308位AG。附图说明图1显示了ACE2的一种SNP图像(以SNP03为例)的测序结果。具体实施例方式本专利技术人经过多年研究，首次发现和证明了ACE2基因与高血压密切相关，而且发现了它的新功能ACE2的改变将导致高血压，其中关联研究结果显示，在ACE2第28308位的SNP03(A/G)在病例和对照组中的分布存在显著性差异(P＜0.05)，该SNP多态可改变氨基酸编码进而可能影响基因表达产物的功能，因此与高血压发病存在密切的相关性。基于此发现，本专利技术提供了利用检测ACE2基因、转录本或蛋白是否存在突变，从而为诊断高血压提供辅助性或早期参考指标的方法和试剂盒。ACE2基因的总长度为42975bp。其详细序列可参见登录号为NM_021804的核苷酸序列(可参见网址http//genome.ucsc.edu/或http//www.ncbi.nlm.nih.gov/)或参见SEQ ID NO1。基于本专利技术的新发现，ACE2蛋白或多肽有多方面的新用途。这些用途包括(但不限于)直接做为药物治疗ACE2蛋白功能低下或丧失所致的疾病(如高血压)，和用于筛选促进ACE2蛋白功能的物质，如抗体、多肽或其它配体。用表本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对个体的高血压易感性进行辅助性诊断的方法，其特征在于，它包括步骤：　　　　检测该个体的ＡＣＥ２基因、转录本和／或蛋白，并与正常的ＡＣＥ２基因、转录本和／或蛋白相比较，　　　　存在差异就表明该个体患高血压的可能性高于正常人群。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张怡，朱鼎良，王谷亮，高平进，黄薇，
申请(专利权)人：上海市高血压研究所，国家人类基因组南方研究中心，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]