轮状病毒的RT-PCR检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及一种检测和鉴定轮状病毒的半套式ＲＴ－ＰＣＲ检测试剂盒，包括ＭＬＶ反转录酶、Ｒｎａｓｉｎ、ＤＮＡ聚合酶、引物、ｄＮＴＰ、ＭｇＣｌ↓［２］、１０×缓冲液，其中上游引物Ｐ１为：５’－ＧＴＡ　　ＴＧＧ　　ＴＡＴ　　ＴＧＡ　　ＡＴＡ　　ＴＡＣ　　ＣＡＣ－３′，下游引物Ｐ２为：５’－ＧＡＴ　　ＣＣＴＧＴＴ　　ＧＧＣ　　ＣＡＴ　　ＣＣ－３，ＲＴ－ＰＣＲ检测方法包括：提取待测样品模板；在ＰＣＲ薄壁管中加入ＭＬＶ反转录酶、Ｒｎａｓｉｎ、ＤＮＡ聚合酶、引物、ｄＮＴＰ、ＭｇＣｌ↓［２］、１０×缓冲液、待测样品模板和ＤＥＰＣ水，混匀后置ＰＣＲ仪上扩增；在电泳设备中电泳扩增产物，记录结果；分析并进行结果判断。本发明专利技术克服了现有传统检测技术中的不足之处，检测轮状病毒的灵敏度高、速度快、简便、准确、检测周期短，其灵敏度可达到１０ｎｇ的模板ＲＮＡ。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
轮状病毒的ＲＴ－ＰＣＲ检测试剂盒，包括ＭＬＶ反转录酶、Ｒｎａｓｉｎ、ＤＮＡ聚合酶、引物、ｄＮＴＰ、１０×缓冲液，其特征在于，其中的上游引物为：５′－ＧＴＡＴＧＧＴＡＴＴＧＡＡＴＡＴＡＣＣＡＣ－３′，下游引物为：５′－ ＧＡＴＣＣＴＧＴＴＧＧＣＣＡＴＣＣ－３′。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴清平，寇晓霞，张菊梅，阙绍辉，
申请(专利权)人：广东省微生物研究所，广东环凯微生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]