生产具有良好农业经济价值的甘蓝型油菜双低恢复系的方法技术

生产Ｏｇｕｒａ胞质雄性不育（ｃｍｓ）的甘蓝型油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ　　ｎａｐｕｓ）双低恢复系的方法，所述甘蓝型油菜呈现出携带Ｒｆｏ恢复基因的萝卜渐渗物，其中缺失萝卜Ｐｇｉ－２等位基因并重组入甘蓝（Ｂｒａｓｓｉｃａ　　ｏｌｅｒａｃｅａ）的Ｐｇｉ－２基因，所述甘蓝型油菜还具有良好农业经济价值，其特征是雌性可育性、良好的Ｒｆｏ传递率和高营养势。形成甘蓝型油菜杂交种子及其后代的方法。甘蓝型油菜的种子以及组合标志物ＰＧＩｏｌ、ＰＧＩｕｎｔ、ＰＧＩｉｎｔ、ＢｏｌＪｏｎ和ＣＰ４１８用于表征的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及产生Ogura胞质雄性不育(cms)的甘蓝型油菜(Brassica napus)双低恢复系的方法，所述甘蓝型油菜呈现出携带Rfo恢复基因的萝卜渐渗物(introgression)，其中缺失萝卜Pgi-2等位基因并重组入甘蓝(Brassica oleracea)的Pgi-2基因，所述甘蓝型油菜还具有良好农业经济价值，其特征是雌性可育性、良好的Rfo传递率和高营养势。本专利技术还涉及形成甘蓝型油菜杂交种子及其后代的方法以及选择标志物的用途。培育油菜籽(Brassica napus L.)Ogu-INRA胞质雄性不育(Cytoplasmic MaleSterility，cms)系统的恢复系一直是几年的主要目标。繁杂的回交和系谱育种对于提高雌性可育性并获得双低恢复系是必要的。所谓“双低”品种是油中的芥酸低且炼油后剩余固体食物中芥子油苷(glucosinolate)低的那些品种。然而，大规模的萝卜基因渐渗导致繁育这些系时仍遇到一些困难(基因渐渗重排，可能与负性性状连锁)。因此专利技术人为自己设定目标提供新的改进的具有良好农业经济价值的双低恢复系。通过生产油菜籽中Ogu-INRA cms的重组双低恢复系的新方法而实现这个目标。本专利技术第一个目标涉及生产Ogura胞质雄性不育(cms)的甘蓝型油菜双低恢复系的方法，所述甘蓝型油菜呈现出携带Rfo恢复基因的萝卜渐渗物，其中缺失萝卜Pgi-2等位基因并重组入甘蓝的Pgi-2基因，所述甘蓝型油菜还具有良好农业经济价值，其特征是雌性可育性、良好的Rfo传递率和高营养势，所述方法包括以下步骤a)将含缺失萝卜插入物的春性甘蓝型油菜的双低cms系与春性Drakkar的双低系杂交，以形成甘蓝型油菜的杂合恢复植株，b)减数分裂前用γ射线辐照由步骤a)获得的杂合恢复植株，c)将步骤b)所得花的花粉与cms双低春性Wesroona系杂交，d)测试后代的营养势、雌性可育性和cms基因传递率，e)选择后代品系。本专利技术中，术语“品系”表示基本纯合的并可经自花传粉繁殖的植物。根据权利要求1的方法，其中步骤b)的辐照剂量是6mn期间65Gray。根据本专利技术方法实施方案的一种有利形式，步骤a)中春性甘蓝型油菜的双低cms系是R211。R211是INRA春性恢复系。Drakkar是法国春性注册品种。Wesroona是澳大利亚春性注册品种。根据本专利技术方法实施方案的一种有利形式，用选自PGIol、PGIUNT、PGIint、BolJon和CP418的五个标志物的组合进行测试。本专利技术的另一个目标涉及Ogura cms的甘蓝型油菜双低恢复系，所述甘蓝型油菜呈现出Rfo插入，其中缺失萝卜Pgi-2等位基因并重组入甘蓝的Pgi-2基因，所述甘蓝型油菜还具有良好农业经济价值，其特征是雌性可育性、良好的Rfo传递率和高营养势。根据一种有利形式的实施方案，所述双低恢复系呈现出选自PGIol、PGIUNT、PGIint、BolJon和CP418的五个标志物的独特组合。本专利技术另一个目标涉及形成甘蓝型油菜植物及其后代的方法，它们通过以下步骤获得a)提供根据权利要求1生产并繁育成纯合的恢复系，b)将所述恢复系作为传粉者用于杂交生产领域，c)将cms不育植物作为生产杂交种种子的植物用于杂交生产领域，和d)从所述雄性不育植物收获杂交种种子。本专利技术另一个目标涉及由根据本专利技术方法获得的甘蓝型油菜的种子。本专利技术的另一个目标涉及甘蓝型油菜的种子，其于2003年7月4日以参考编号NCIMB41183保藏于NCIMB Limited，23St Machar Drive，Aberdeen，Scotland，AB243RY，UK。本专利技术的另一个目标涉及至少四个标志物PGIol、PGIint、BolJon和CP418的组合、或其中包含至少一个多态性位点的任意部分用于表征Ogura cms的甘蓝型油菜重组恢复系的用途，所述甘蓝型油菜呈现Rfo插入，其中缺失萝卜Pgi-2等位基因并重组入甘蓝的Pgi-2基因，所述甘蓝型油菜还具有良好农业经济价值，其特征是雌性可育性、良好的Rfo传递率和高营养势。在一个优选实施方案中，所述组合是五种标志物PGIol、PGIUNT、PGIint、BolJon和CP418的组合。在本专利技术中，表述“其中包含至少一个多态性位点的任意部分”表示显示出甘蓝型序列和芜菁(B.rapa)型序列之间至少一种差异的序列的任意部分。这些标志物在关于R2000品系的以下附图和序列表中被示出。根据一种有利形式的实施方案，本专利技术涉及—标志物PGIol，用引物PGIol U和PGIol L扩增(PGIol U5′TCATTTGATTGTTGCGCCTG3′；PGIol L5′TGTACATCAGACCCGGTAGAAAA3′)—标志物PGIint，用引物PGIint U和PGIint L扩增(PGIint U5′CAGCACTAATCTTGCGGTATG3′；PGlint L5′CAATAACCCTAAAAGCACCTG3′)—标志物PGIUNT，用引物PGIol U和PGIintL扩增(PGIol U5′TCATTTGATTGTTGCGCCTG3′；PGIint L5′CAATAACCCTAAAAGCACCTG3′)—标志物BolJon，用引物BolJon U和BolJon L扩增(BolJon U5′GATCCGATTCTTCTCCTGTTG3；BolJon L5′GCCTACTCCTCAAATCACTCT3′)—标志物CP418，用引物SG129U和pCP418L扩增(SG129U参见Giancola et al，2003 Theor Appl.Genet.(in press)pCP418L5′AATTTCTCCATCACAAGGACC3′)本专利技术的另一个目标涉及标志物PGIol、PGIUNT、PGIint、BolJon和CP418，它们的序列如下PGIol R2000标志物TCATTTGATT GTTGCGCCTG TCGCCTTGTT GTGTTATGAT GAATGAACAG CAGTCATTTA 60ACATGTGGTT AACTTAACAG GGCTCCGGCT GTTGCAAAAC ACATGGTTGC TGTCAGCACT 120AATCTTGCGG TATGAATTTG TGATTAAATT TGTTTGTTTG TGACTCTTTC TTCATTGTTC 180GTTTTCGTAC AATAAACCGA ATGTATAATC TTTTTACAAA CTGAATTTTC TACCGGGTCT 240GATGTACA 248PGIUNT R2000标志物TCATTTGATT GTTGCGCCTG TCGCCTTGTT GTGTTATGAT GAATGAACAG CAGTCATTTA 60ACATGTGGTT AACTTAACAG GGCTCCGGCT GTTGCAAAAC ACATGGTTGC TGTCAGCACT 120AATCTTGCGG TATGAATTTG TGATTAAATT TGTTTGTTTG TGACTCTTTC TTCATTGTTC 180GTTTTCGTAC AAT本文档来自技高网...

【技术保护点】
产生Ｏｇｕｒａ胞质雄性不育（ｃｍｓ）的甘蓝型油菜双低恢复系的方法，所述甘蓝型油菜呈现出携带Ｒｆｏ恢复基因的萝卜渐渗物，其中缺失萝卜Ｐｇｉ－２等位基因并重组入甘蓝的Ｐｇｉ－２基因，所述甘蓝型油菜还具有良好农业经济价值，其特征是雌性可育性、良好的Ｒｆｏ传递率和高营养势，所述方法包括以下步骤：ａ）将含缺失萝卜插入物的春性甘蓝型油菜的双低ｃｍｓ系与春性Ｄｒａｋｋａｒ的双低系杂交，以形成甘蓝型油菜的杂合恢复植株，ｂ）减数分裂前用γ射线辐照由步骤ａ）获得的杂合恢复植株，ｃ）将步骤ｂ）所得花的花粉与ｃｍｓ双低春性Ｗｅｓｒｏｏｎａ系杂交，ｄ）测试后代的营养势、雌性可育性和ｃｍｓ基因传递率，ｅ）选择后代品系。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：卡特琳普里马尔布里塞，雷吉娜德卢尔姆，让皮埃尔普帕尔，雷蒙德霍尔韦，弗朗索瓦丝布达尔，乔治佩尔蒂埃，米歇尔勒纳尔，
申请(专利权)人：国家农艺研究院，
类型：发明
国别省市：FR[法国]