一种鉴定与哺乳动物预期行为相关的基因的方法，其包括以下步骤： （ａ）提供具有预期行为的哺乳动物测试群体； （ｂ）提供缺少预期行为的哺乳动物对照群体； （ｃ）从测试群体神经组织中分离并汇总表达的ＲＮＡ； （ｄ）从对照群体神经组织中分离并汇总表达的ＲＮＡ； （ｅ）确定步骤（ｃ）和（ｄ）中产生的每个ＲＮＡ库中大量基因的表达水平；和， （ｆ）从大量基因中选出基因，其表达在哺乳动物测试群体和对照群体之间不同，其中选择的基因是与所述预期行为相关的候选基因。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】1.对相关申请的交叉引用本申请要求享有于2002年11月22日提交的美国申请序列号60/413,152的权益，其全文并入作为参考。2.政府支持本专利技术在政府支持下完成，获得国家衰老研究所的基金第PO1AG09973号。政府拥有本专利技术的某些权利。3.专利技术背景由于对认知功能障碍的认识日渐增加，开发出灵敏的方法以检测功能障碍并治疗功能障碍的需求也日渐增加。存在许多病情，如痴呆(如，雷维小体痴呆、血管痴呆、阿耳茨海默氏症以及与HIV相关的痴呆)、亨廷顿氏舞蹈病、帕金森氏症、精神分裂症、抑郁症、肌萎缩性脊髓侧索硬化症、轻度认知功能障碍(MCI)以及与年龄有关的认知衰退(ARCD)，灵敏地检测出认知功能障碍能使有这些病情的患者受益。认知功能障碍(如，雷维小体痴呆、血管痴呆、阿耳茨海默氏症与HIV相关的痴呆、亨廷顿氏舞蹈病、帕金森氏症、肌萎缩性脊髓侧索硬化症、MCI和ARCD)涉及的大量病况的主要危险因素是衰老。患有这些病况的个体具有在整个病程中严重程度增加的认知症状。在未患有这些病症的情况下，衰老本身对于认知的影响对于定义疾病和正常衰老的界线是至关重要的。同时，衰老对于认知的影响可以与神经退行性疾病、确定性易获病性的病程、疾病的进展速率或其他特性相互影响。开发认知功能障碍的检测方法和疗法的重要手段包括使用实验室动物。以动物模型描述的认知功能障碍可能扩展到人的认知功能障碍上。在与年龄相关的认知功能障碍的上下文范围中，以远系繁殖的年老的Long-Evans鼠(Charles River Laboratories；Gallagher M，等，Behav.Neurosci.107618-626；1993)的广泛行为特征可鉴定自然发生的认知功能障碍的形式。该认知老化模型使用了在其一生中保持无病原状态的动物。在所有衰老的鼠上进行的生理机能和尸体解剖的测试被用于排除患有会干扰衰老疾病或病症研究的病况的动物。该模型的重要特点是其反映出了老年人认知衰退的变化现象。另外，该模型中的老年鼠的认知衰退的个体差异可用行为评估的方式来观察，该评估对中颞叶中相联结构的功能灵敏，该系统对人的表述性记忆至关重要。该模型的另一个重要特点是其指导理解了造成与年龄相关的认知功能障碍的基因多样性。该对与年龄相关的认知功能障碍的遗传影响不可能是单基因的，即由单个基因中的缺失或突变造成的。单基因病很少见而且一般影响年轻人。因为它们的严重性，单基因病经常造成不能达到平均期望寿命。在人中，大量常见且严重的病情影响成年人群，随着实足年龄的增加而增加了频率和严重程度，而且这不能够归因于单个基因(比如可参见，Hegele RA.Trends Endocrinol Metab.2003 8371-377；Shih DQ，等Curr Diab Rep.2002 2125-134；Barlassina C，等J Am Soc Nephrol.2002 Suppl 3S155-S164)。不断增加的证据表明成熟期发病或与衰老相关的病情的遗传组成反应出了比由单基因病造成的绝对缺陷或极大功能增进更微妙的多基因表达的改变。确定这些与年龄相关的病情的分子基础的挑战就是要鉴定基因的多样性并确认特定基因组中表达的相对小的改变是否真与远系繁殖的诸如人群的群体中的病情相关或导致这些病情。所以，利用哺乳动物远系繁殖老化模型可帮助分析海马中的多基因表达水平间的关系和在远系繁殖的年轻或老年个体中的学习能力。用Morris水迷宫(MWM)进行的行为评估中，在迷宫周围的空间提示结构的指导下，鼠学习并记下了逃跑平台的位置。在探测试验中，利用测定动物搜索逃跑平台位置的空间偏好来测试进行认知的基础。在研究群体中的老年鼠能毫无困难地游到可见的平台上，但当隐藏平台时需要利用空间信息了，就可检测年龄决定的功能障碍了。正如许多公开报道的那样，远系繁殖的Long-Evans品种中的老年鼠的个体表现变化极大，那些鼠中的一部分表现得和年轻成体一样，但大约40-50％的落后于年轻个体表现的范围(Gallagher等Behav.Neurosci.107618-626，1993)。年老鼠中的这种可变性反映出可靠的个体差异。所以，在年老群体中，一些动物认知功能有障碍了并被称为年老功能障碍的(AI)。其他动物认知功能没有障碍，或年老功能无障碍的(AU)。最初表征的几周后利用MWM在新空间环境中进行的再次评估中，AI动物一如既往的有障碍，而AU动物能再次熟练表现(Colombo等Proc.Natl.Acad.Sci.9414195-14199，1997)。在对AI和AU鼠认知能力的MWM评估中的差异甚至在间隔3个月以上时仍是可靠的(Gallagher和Burwell，Neurobiol.Aging 10691-708，1989)。另外，MWM中的AI和AU特征能区分在其他行为任务中同样年龄个体的表现，所述行为任务需要同样的认知功能，如Barnes圆形迷宫(Gallagher和Burwell Neurobiol.Aging 10691-708，1989)和放射状臂形迷宫(RAM)。这种啮齿动物年老群体中自然产生的功能障碍显示认知老化是不可避免的或严格与实足年龄相联系，而且重要的是，它提供了机会用以比较造成衰退或持久记忆的大脑变化的轨迹。利用该模型的其他背景研究显示认知功能障碍的发生并不依赖于包括神经元缺失或相关回路的广泛退化的神经退行(Rapp和GallagherProc.Natl.Acad.Sci.939926-9930，1996)。所以，该模型可能是比要测定神经元缺失影响的准备工作更灵敏的认知老化测试方法。除了可靠性之外，该模型所用的认知评估已经证明能对相关大脑系统的老化影响灵敏。在AU和AI鼠的神经回路中显示有显著的生物学差异产生了，该回路对MWM中评估的认知功能至关重要。例如，相对于AU并年轻的鼠，AI鼠中的海马神经元对某些化学递质具有减弱的应答，如乙酰胆碱和谷氨酸(Nicolle等J.Neurosci.199604-9610，1999)。在谷氨酸受体亚型的解剖分布研究中，利用该模型可揭示出减少了红藻氨酸盐(kainate)结合在海马的CA3区域，该区域仅限于年老无障碍的鼠中并与年轻和年老障碍的鼠有区别(Nicolle等Neuroscience 74741-756，1996)。存在有越来越多对认知功能障碍生物和遗传基础理解的需求。4.专利技术简述在一个方面，本专利技术描述了一种鉴别与诸如哺乳动物的个体所预期行为相关的基因的方法，其包括提供一个具有预期行为的测试个体的群体，提供一个缺少预期行为的对照个体的群体，各自分离并合并来自测试和对照群体的神经组织如海马的表达的RNA，在每个对照和测试RNA合并库中测定大量基因的表达水平并从大量基因中选出一个基因，所述基因的表达水平在哺乳动物的测试群体和对照群体间有差异。选择的基因是与预期行为相关的候选基因。可通过任何合适的方式来检测大量基因的表达水平，如微阵列分析、原位杂交组化、定量PCR、SAGE分析、Northern印迹分析或点印迹分析，或通过合适的方法来测量蛋白质水平，包括Western印迹、蛋白质槽印迹或蛋白质阵列。大量基因可包括涉及谷氨酸转运的基因，如EAAT1、EAAT2本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
【专利技术属性】
技术研发人员：M·加拉赫尔，P·K·伦德，J·D·罗思斯坦，
申请(专利权)人：约翰斯·霍普金斯大学，
类型：发明
国别省市：
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