基于连接子聚合酶链式反应和磁性纳米粒子的单核苷酸多态性检测方法技术

本发明专利技术公开了一种基于连接子聚合酶链式反应（Ｌｉｎｋｅｒ－ＰＣＲ）和磁性纳米粒子的单核苷酸多态性检测（ＳＮＰ）方法，其特征在于利用连接子聚合酶链式反应（Ｌｉｎｋｅｒ－ＰＣＲ）对样本进行全基因组扩增，将生物素标记的扩增靶序列固定到亲合素标记的磁性纳米颗粒上，通过与等位基因特异探针杂交的方法，实现对样品的分型。该方法利用Ｌｉｎｋｅｒ－ＰＣＲ实现了多位点的同时检测、分型。利用了磁性纳米颗粒作为杂交载体，可避免对靶序列纯化、浓缩而导致成本高、费时、费力的缺陷。因此，本发明专利技术具有多位点、低成本、快速、简便的优点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种基于连接子聚合酶链式反应（Ｌｉｎｋｅｒ－ＰＣＲ）和磁性纳米粒子单核苷酸多态性检测方法，其特征在于：选取特定的限制性内切酶将基因组ＤＮＡ打断，避开待检测ＳＮＰ位点。而所设计的连接子是由两条互补的寡聚核苷酸链构成，且互补两序列后形成与酶切切口互补的粘性末端。而且其中作为Ｌｉｎｋｅｒ－ＰＣＲ引物的一条寡核苷酸５’端标记有生物素。连接子通过Ｔ４连接酶将Ｌｉｎｋｅｒ同打断的基因组ＤＮＡ片断相连接。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：何农跃，李松，刘洪娜，陆祖宏，王志飞，汤建新，
申请(专利权)人：何农跃，李松，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]