新抗生素制黄肝菌素的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种新抗生素制黄肝菌素及其制备方法，还提供了有效成分为制黄肝菌素的农业园艺用杀菌剂．它既有强选择性，又有高度安全性，对施用人员毫无影响，并且无任何药害．本抗生素通过培养链霉菌ＳＰ．ＳＲ－４４（ＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓＳＰ．ＳＲ－４４）而制得．（*该技术在2006年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术是关于新抗生素制黄肝菌素(Xanthostatin代号SR-44)和其制备方法，以及一种有效成份为制黄肝菌素的农业园艺用杀菌剂。以往，农业园艺用杀菌剂一直是使用如铜、汞、砷之类重金属化合物制剂和有机氯、有机磷药剂。但是这些药剂对动物和人体都有害，对土壤有污染作用，并且残留在自然界中的有害物质又长期地作用于动、植物。这样造成的环境污染已成了当今重大的社会问题，从而导致了目前这种被禁止或限制使用的局面。此外，随着选择性药剂的减少及抗药菌的出现，各种植物病害-尤其是水稻的主要病害有明显加重的趋势。为此，人们迫切希望能开发出一些既有强选择性效果，又有高度安全性的新型农药。本专利技术的目的在于提供一种对各种植物病害均有效的新抗生素及其制备方法。而且本专利技术的目的还在于提供一种以上述抗生素为有效成份的农业园艺用杀菌剂。本专利技术所述的抗生素制黄肝菌素为未见文献报道的新抗生素，其具有后述的理化性质。同时，在后述的喷撒试验中，对水稻的主要病害如水稻纹枯病、稻瘟病及其它如黄瓜灰霉病、黄瓜炭疽病、茄黑斑病、葡萄晚腐病等各种植物病害都显示了出色的防治效果，并且既无任何药害，又对施用人员毫无影响，是一种优良的农业园艺用杀菌剂。以下对本专利技术进行详细的说明。抗生素制黄肝菌素的制备使用的微生物用来生产本专利技术所述的抗生素制黄肝菌素的微生物是一种属于链霉菌属的菌种，其具有生产抗生素制黄肝菌素的能力。链霉菌SP·SR-44(Streptomyces SP·SR-44)(中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心的保藏号CGMCC-0092)(以下简称为“SR-44菌株”)就是其中一例。该菌株在与本申请相应的日本专利申请中被命名为“链霉菌SP·RS-44。”该微生物具有上述特性，适于生产本专利技术所述的抗生素制黄肝菌素，因而能有效地使用于本专利技术所述的制备方法中。同时，上述SR-44菌株的自然及其人工变异菌株也均属于链霉菌属的菌种。凡具有生产后述抗生素制黄肝菌素能力的微生物均可应用本专利技术所述的方法。上述“SR-44菌株”是从中国江苏省的土壤中分离而得，其具有下述性质1.形态特征在用含有葡萄糖、酵母浸膏的菌体分析用培养基上培养本菌株“SR-44菌株”，然后进行菌体分离干燥，再用6N盐酸在110℃、加热水解20小时。用纸层析法检测细胞壁的氨基酸组分时，可以发现L、L-二氨基庚二酸。此外，在琼脂平板上生长的气生菌丝呈现出螺旋状，可以看出这种螺旋状菌丝是由数十个孢子所组成。但是却看不到孢子囊和运动性的孢子。从上可以说明，本菌株属于链霉菌属。孢子的形态呈圆柱状表面平滑。2.在各种培养基上的生长状态(于27℃培养三周，颜色按照“颜色名称描述词典”(Descriptive color names dictionary)记述。(1)蔗糖硝酸盐琼脂培养基生长 不生长(2)葡萄糖一天冬酰胺琼脂培养基生长 普通气生菌丝 微量 b灰乳色(oyster white)基内 b灰乳色(oyster white)色素 无(3)甘油一天冬酰胺琼脂培养基生长 普通气生菌丝 微量 b灰乳色(oyster white)基内 b灰乳色(oyster white)色素 无(4)淀粉-无机盐琼脂培养基生长 良好气生菌丝 多量 2ge柏氏色(Bergey)基内 2ie淡芥色(light mustard)色素 无(5)酪氨酸琼脂培养基生长 良好气生菌丝 多量 3dc自然色(natural)基内 2le芥色(mustard)色素 2ea亮黄色(light maize)(6)营养琼脂培养基生长 良好气生菌丝 无基内 1 1/2 Ca乳色(cream)色素 无(7)酵母-麦芽琼脂培养基生长 良好气生菌丝 多量 5fe灰色(ash)基内 2lg芥黄褐色(mustard tan)色素 无(8)麦片琼脂培养基生长 不良气生菌丝 无基内 不明色素 无(9)胨-酵母-铁琼脂培养基生长 良好气生菌丝 无基内 1 1/2 ea淡黄色(light yellow)色素 无3.碳源的利用性(普戈琼脂培养基)L-阿拉伯糖 -D-木糖 +D-葡萄糖 +D-果糖 -蔗糖 -肌醇 -L-鼠李糖 -棉子糖 -D-甘露醇 -+……生长 -……不生长4.其它生理性质(1)合适温度 25～30℃(2)明胶的液化 液化(葡萄糖-胨-明胶培养基)(3)淀粉水解 水解(淀粉-无机盐琼脂培养基)(4)脱脂乳的凝固 凝固(5)脱脂乳的液化 液化(6)黑色素的生成(酪氨酸琼脂培养基) 不生成(胨-酵母铁琼脂培养基) 不生成具有上述各性质的链霉菌属菌种按柏氏细菌学鉴定手册第八版(Bergey′s Manual of Determinative Bacteriology 8 th ed)分类法，本菌种应属于WISIC-ISM群，从色调、孢子形态来看，最近缘可可链霉菌。由此可以推断本菌种属可可链霉菌或其极近缘菌。“SR-44菌株”的培养及制黄肝菌素的制取和提纯用链霉菌属的上述抗生素生产菌，通过常规的抗生素生产方法，可以培养“SR-44菌株”并制得本专利技术所述的抗生素制黄肝菌素。培养方式既可为液体培养也可为固体培养。但为了有利于工业性生产时的培养，宜将上述生产菌的孢子悬浮液或培养液接种到培养基上并进行通气搅拌培养。对培养基中的营养源并无特殊的规定，可含有常用于微生物培养的碳源，氮源及其它营养源。其中碳源可为淀粉、糊精、甘油、葡萄糖、蔗糖、乳糖、肌醇、甘露醇等。氮源可为胨、大豆粉、肉膏、米糠、麦皮、尿素、玉米浆、铵盐、硝酸盐，以及其它有机或无机含氮化合物。对于其它营养源来讲，可适当添加一些无机盐类，例如食盐、磷酸盐类及钾、钙、锌、锰、铁之类的金属盐，必要时也可添加些动、植、矿物油等作为消泡剂。对培养时的温度、时间等培养条件并无严格的限制，以适于使用菌的发育为准，并以选择制黄肝菌素产量最高的条件为好。例如，培养基的pH范围可为4～9，以接近中性为好。培养温度、搅拌条件等均应根据所使用菌株的种类及外部条件等进行适当的调节，以获得最好的效果。由上述所得的培养物出发，通过一些适当的方法就能制得制黄肝菌素。这是些常用于提取代谢产物的常规方法。例如，可利用制黄肝菌素与不纯物在溶解度、离子结合力、吸附亲和力及分子量等方面的差别进行提取。具体地讲，制黄肝菌素大部分存在于培养滤液中。将培养液调整到偏酸性，譬如调整到PH4.0，再用醋酸乙酯之类的有机溶剂进行提取。所得的浓缩油状物通过吸附层析、硅胶层析、液相层析、离子交换层析、凝胶层析等组合精制后，即可得到含有制黄肝菌素及其它活性成分的组份。例如，将油状物进行硅胶层析后在氯仿-甲醇中展开得到活性组份。然后通过高速液相层析〔例如，充填剂选用Nucleosil5C18，展开剂为甲醇-水(8∶2)中加本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新抗生素制黄肝菌素的制备方法，其特征在于培养属于链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属的抗生素制黄肝菌素的生产菌，再从这些培养物中分离提取新抗生素制黄肝菌素。

【技术特征摘要】
1.一种新抗生素制黄肝菌素的制备方法，其特征在于培养属于链霉菌(Streptomyces)属的抗生素制黄肝菌素的生产菌，再从这些培养物中分离提取新抗生素制黄肝菌素。2.按权利要求1所述的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：成杏春，矶野清，梁凤群，山口勇，方仁萍，黄耿堂，周钰，木原刚，沈寅初，日下部宽男，朱道荃，见里朝正，
申请(专利权)人：上海市农药研究所，日本理化学研究所，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]