包含和表达编码了诱发的乳头状瘤区域或乳头状瘤蛋白质，如Ｅ６或Ｅ７区域的ＨＰＶＤＮＡ插入物的肽，抗体及重组表达系统或细胞。含有这些肽，抗体和／或重组细胞的组合物被用做为致免疫成分并被用在抑制和治疗ＨＰＶ感染和肿瘤发生及进展的方法中。具体描述了表达ＨＰＶ１６Ｅ６或Ｅ７核蛋白质的抗原决定区域的特异性肽和重组细胞，如牛痘病毒和肿瘤细胞。（*该技术在2011年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及重组细胞、肽、抗体、组合物以及能够用来抑制和治疗人类乳头状瘤病毒(HPV)感染和细胞转化的方法。包含并表达一种编码了HPV一个蛋白区域的DNA插入物或一种由哺乳动物细胞中的HPV基因诱发的肽的重组细胞被制备出来，例如像表达HPV E6或E7核蛋白基因产物的一个抗原决定区域的重组牛痘病毒，或包含和表达HPV的E6或E7核蛋白基因产物的一个区域的转染的或重组病毒感染的重新构建的成纤维细胞，上皮细胞，淋巴或肿瘤细胞。与HPV16E6和E7蛋白的抗原决定区域相应的特异肽已被制备出来，而且这些肽已被用于致免疫组合物和疫苗中。并描述了抑制和消退患者体内的HPV感染和肿瘤发展的治疗和预防的方法。对实验动物，特别是啮齿动物的研究表明大多数由致瘤病毒引发的肿瘤表达了由病毒基因组编码的抗原，而且采用这些抗原的免疫法可导致随后的由相同病毒诱发的肿瘤细胞激发的排异反应。尽管这些研究的大部分是利用实验室病毒株进行的，例如SV40，多瘤病毒，及Friend，Moloney，或Rauscher鼠白血病病毒，但实际上瘤诱发病毒的水平和垂直传染已被证实现在确实可以得到对抗病毒诱发的猫白血病和肉瘤的商业疫苗。相比之下，大多数人类癌症的病毒病原学说尚未被证实，可能的例外是肝炎病毒(肝细胞瘤)，Epstein Barr病毒(鼻咽癌)，以及人类乳头状瘤病毒(HPV16)(宫颈癌)。然而，在过去的二十年中，已经证实，某些人类肿瘤细胞表达肿瘤抗原，即能够将肿瘤细胞与其正常细胞区别开的抗原，某些患者对于这些抗原产生细胞-传导的或体液免疫应答(Hellstrom等，1968年，Nature，2201352;Morton等，1968年，Science，1621279-1281;Shiku等，1976，J.Exp.Med.144873-881)。这些免疫反应的某些靶是由人类基因组编码的胎儿瘤抗原或分化抗原(Hellstrom等，1970，Int.J.Cancer 6346-351)。直到目前为止，肿瘤抗原的分子特性仍是未知的，而且肿瘤的这种免疫学反应的特异性程度也不清楚。而试图将这些信息用在发展癌症的诊断测定或癌症的治疗方面的作法也很不成功。由于肿瘤的自发消退几乎罕见，因此，人们可以得出结论，即在玻璃试管中被证实的免疫应答并非在体内有效。例如，来自癌症患者体内的抗体及淋巴细胞可有效地用于杀灭玻璃试管内的肿瘤细胞，而同一癌症患者的免疫应答在体内却不足以阻止肿瘤的发展。由Kohler和Milstein所发展的单克隆抗体技术(1975年，Nature，256495-497)引导了对于人类肿瘤抗原的深入的研究，因为该技术不仅在分子水平上而且在特异性方面为定义这样一些抗原提供了手段(Hellstrom和Brown，1979，in The Antigens，M.Sala，ed.，Academic Press，Vol.V1-66)。在过去几年中，已描述了大量的与肿瘤有关的抗原，其中大多数已采用小鼠单克隆抗体进行了定义(Reisfeld和Sell eds.编缉，1985年，in Monoclonal Antibodies and Cancer Tllerapy，UCLA Symposia on Molecular and Cellular Biology，New Serres，Vol.27，Alan R.Liss，Inc.New York，pp.1-609)。虽然实际上所有已明确描述的抗原都已被证明是胎儿瘤或分化抗原，而且它们对于肿瘤的特异性已被发现是定量的而不是定性的，有几种抗原对于肿瘤细胞和正常细胞具有足够的特异性(通常对应一个10到1000倍的因子)，以致可以用作鉴别肿瘤细胞和治疗的潜在目标。针对肿瘤抗原的人类单克隆抗体也已得到(Cote等，1983年，Proc.Natl.Acad.Sci.802026-2030)。这就支持了前面所引用的证据，即某些癌症患者增强了对其肿瘤的免疫应答。许多这些肿瘤抗原是由人类染色体编码的，而在某些情况下，这些肿瘤抗原是内原性或外原性病毒感染的结果。人类乳头状瘤病毒是众所周知的在其宿主内产生上皮细胞瘤如疣和乳头状瘤的传染剂。普通手疣和足跖疣是人类最常见的皮肤损害;然而，在男性和女性中的鳞状细胞癌和生殖器癌也普通与某些HPV感染株有关。乳头状瘤病毒基因组包含一个具有约5，000千道尔顿(KDa)分子量的双股环状超螺旋DNA分子。该基因组在8和10个蛋白质之间编码，这个数目还不确定，因为尚未将一种功能或蛋白质产物赋予基因组的每一个开放阅读构架(ORF′s)。在复制早期疣形成的ORF′s最初被指定为E，而后来形成的那些ORF′s被指定为L。但是这种指定已不再有效，且已经发现某些E基因产物形成于感染的早期和晚期。HPV感染与子宫颈癌和其它人类非生殖器癌有很大关系(ZurHausen等，1989，Cancer Res.494677-4681;Galloway等，1989，Adv.Virus Res.37125-171)。一种HPV类型，HPV16，通常与严重发育不全和宫颈癌有关(Galloway等，Supra;Ikenberg等，1983，Int.J.Cancer 32563-565)，在这种疾病中，某些病毒E基因及其蛋白质产物已显示出突出的作用。采用一种通讯基因，如氯霉素乙酰转移酶，所进行的试验区表明，E6基因转移激活了HPV DNA的非编码段(Phelps等，1988.Cell 53539-547)。E7核蛋白质已显示出在哺乳动物细胞中转化和保持恶性表现型的作用(Tsunokawa等，1986年，Proc.Natl.Acad.Sci.USA832200-2203;Kanada等，1988年，J.Virol.62610-613;Crook等，1989年，EMBOJ.8513-519)。对于实验动物，通常为小鼠的研究已表明，采用活的或死的癌症细胞的免疫接种可以导致随后由能成活的癌症细胞激发的排异反应。在许多情况下，负责保护作用的靶抗原已被按病毒编码，但在其许多情况下，激发一种保护性免疫应答的抗原的特性仍是未知。建议在人体上应用癌症疫苗的一个主要的、理论上的反对意见是，“接种”例如被杀灭的癌细胞或没有细胞的制剂的人可能是免疫学上无应答的。据信这是经常发生的，因为在某些正常细胞中存在可以作为免疫应答靶肿瘤抗原，虽然仅仅是微量的，而且被免疫系统视为“自身”。针对这种“自身”抗原的免疫接种，如果有效的话，可能导致一种自身免疫应答。大多数的(如果不是所有的)由单克隆抗体在人类肿瘤中检测出来的与肿瘤有关的抗原还存在于某些正常组织内，而且几乎没有证据证明癌症患者在体内对这些抗原具有有效的响应。另一方面，对于人类免疫系统是外来的一种抗原，例如，一种被致瘤病毒，如HPV16编码的抗原，应该很可能诱发一种强的免疫应答。为预防病毒感染和细胞转化而利用重组DNA技术生产疫苗包括在一种适当的载体中分子克隆和表达编码了病毒蛋白的遗传信息，所说病毒蛋白能够在宿主动物中针对该蛋白质激发免疫应答。一种新的对于这种疫苗的制备可能是有用的方法已被描述(Mackett等，1982年，Proc.Natl.Acad本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种组合物，包括基本上对应于在哺乳细胞中由于人类乳头状瘤病毒感染而被表达的肽的氨基酸残基序列的一种致免疫肽。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：EK托马斯，LP陈，J布莱克，KE海尔斯特伦，I海尔斯特伦，SL胡，
申请(专利权)人：布里斯托尔迈尔斯斯奎尔公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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