硫霉素类似物制造技术

具式Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ，Ⅶ或Ⅸ或其药理学上可接受的盐类。 ＊＊＊。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及抗菌素10381v，W，X，Y，Z1，Z2，Pre-b和t，它们是从微生物Streptomyces arginensis发酵啤酒的粗提取物中分离出来的。三种含硫多肽抗菌素，硫霉素I，II和III的分离，纯制，物理化学及生物学特性见下列文献所述J.Antibiotics，22(1)12—22(1969)，Tetrahedron Lett.，29(12)1401—4(1988)。该文中公开了改良的多肽抗菌素硫霉素I的结构。同时也提出了结构相关的抗菌素berninamycin A的结构修正。Tetrahedron Lett.，(31)2791—4(1978)中公开了硫霉素I的甲醇解产物。Tetrahedron Lett.，(9)735—6(1977)中公开了硫霉素I的酸性水解产品。化学文摘(Chemical Abstracts)73(1)2666c(日本专利45006880)公开了经Streptomyces Virdochromogenes Var Sulfomycini培养物来制备硫霉素I的方法。美国专利4,007,090中公开并要求了新颖的，通过微生物烬灰绿色链霉菌发酵制备硫霉素I的方法。Chemical Abstracts 73(17)86558e(Japanese Patent 45017588)中公开了经培养Streptomyces Viridochromogenes Var Sufomycini来制备硫霉素II和III的方法，它们的紫外吸收和抗菌谱与硫霉素I的相似。J.Antibiotics，45(11)1809—1811(1992)及欧洲专利申请0274873(1988年7月20日出版)公开了A10255，一种硫肽抗菌复合物，它含有一个环肽核及氨基酸侧链。J.Antibiotics，42(10)1465—9(1089)中公开了噻噁霉素、一种肽类抗菌素的分离及特性。1988年1月14日出版的International Publication Nlumber WO88/00200中描述了10381b抗菌复合物的制备和性质。根据此文献，10381b抗菌复合物是经用营养培养基中微生物Streptormycesarginensis而发酵制得的，该文献还进一步阐述了在10381b复合物中含有一组至少包括有5种主要对抗革兰氏阳性菌的抗菌素，并且它们与所报告过的硫霉素族抗菌素有着相类似的物理特性。10381b复合物中的主要成份称作10381b2和10381b3。在这两种成份中，已将10381b2分离出来，其获得的量及纯度足够用以确定其生物活性和化学特性。10381b2的结构被设想与来自绿色产色链霉菌的肽类抗菌素硫霉素I是相同的，这点已得到证实。10381b抗菌复合物具有对抗革兰氏阳性菌的抗菌活性，因而它们可用于保障供食用动物的生长，如家禽，猪和牛。然而该文献未讲授或公开分离和鉴定10381b抗菌复合物中其它组份的方法，特别是本专利技术中的抗菌素10381v，W，X，Y，Z1，Z2pre—b及t。在International Publication Number WO86/05785(1986年10月9日)以及A.D.Argoudelis等，The Journal of Antibiotics，XL(6)750—760(1987年6月)文献上描述了Arginomycin(抗菌素10381 a1)的生产方法和性质。专利申请者未看到过在此领域里的参考文献能或提出本专利技术的抗菌素1038IV，W，X，Y，Z1，Z2，pre—b和t。本专利技术具体提供了式I，II，III，IV，V，VI，VII或IX化合物或它们的药理学上可接受的盐；饲料组合物，它包括动物饲料和式I，II，III，IV，V，VI，VII或IX，或它们间的任何组合；动物用复合剂，它包括式I，II，III，IV，V-，VI，VII，或IX，或它们间的任何组合，以及合适的惰性载体；以及促进动物生长的方法，它包括给动物服用有效剂量的式I，II，III，IV，V，VI，VII或IX化合物或它们间的任何组合。测定，分离和鉴别这些抗菌素是困难和意想不到的，需要超出抗菌素行业常规的技术。另外这些抗菌素具有意想不到的优点，例如抗菌素10381Y与10381b2相比具有更强的抗菌活性。从微生物Streptomyces arginensis啤酒发酵的粗提取物中，已分离出基本上纯的抗菌素10381v，W，X，Y，Z1，Z2，pre—b及t。这些化合物的独特的结构也已给出。在10381b抗菌复合物中，抗菌素10381Y的生物活性比起其它组分来要强些，详见下文所述。天然存在的微生物，Streptomyces arginensis可以用来制备本专利技术中的抗菌素。因而，该微生物有可能以其自然存在的状态来制备这些抗菌素。本专利技术所涉及的这些抗菌素不包括在自然界中可能有的，或肯定存在的任何组分，本专利技术提供了生产和分离这些抗菌素的方法，且所得的这些抗菌素有实用价值如用于药理学及其它抗菌目的，以及兽用。在下面文字中当提到“10381b组份”时，其含义与前文中提到的10382b2组份是一致的。抗菌素10381v，W，X，Y，Z1，Z2，pre—b及t是从S.arginensis培养物获得的。该微生物的分类学和生长方面的描述见InternationalPublication Number WO 88/00200(1988年1月14日出版)。10381b抗菌复合物的发酵和发现方面的描述也可参见该文献。10381b抗菌复合物的较可取的制备方法见下文制备法1和2中所述，其中制备法2更为可取。一组突变体，其每一个与母体菌株Streptomyces arginensis相比都具有增高的效价，可用于10381b复合物组份的制备。采用标准的变异和选择技术可制备这些新的菌株。变异方法包括化学变异法，用N-甲基-N’-亚硝基胍，用亚硝酸，以及用紫外光照射。选择技术包括简单的再分离菌株的方法，即弧立的菌落的选择，特殊菌落的形态学选择，以及对组份类似物的耐受性选择，虽然10381b复合物是生物合成途径中的产物。这些菌株是有用的，因为它们能产生更多的10381b复合物。这意味着用较少量的培养物就能得到分离组份所需的物质。该突变和选择对10381b复合物中组份的比例没有明显的改变。从10381b抗菌复合物(它含有已知的10381b组份以及作为本专利技术的一部分所鉴定出的组份)粗品中分离出这些抗菌素是通过在反相—HPLC柱上经层析分离来实现的。可取的起始物为二次发酵的10381b抗菌复合物粗品，因为其中富含本专利技术的组份。另外一种得到富含本专利技术组份的方法是对已有的啤酒提取物进行第二次提取。可取的层析柱为Zorbax C8，5μm，流动相为水—四氢呋喃(THF)-乙腈(ACN)(60∶27∶3)，其它的柱，如，Waters DeltaPakC18也可用，但分离效果不佳。可调整流动相，从而得到不同的保留时间(也影响分离)。较可取的制备10381b组份的方法见下文实例6中所述。通常，本专利技术的抗菌素(包括大量纯的抗菌素10381y)可用Wa-ters DeltaPak C18柱(50×300mm)以水-THF-ACN本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：C·P·科尼尔，S·H·格罗得，H·F·梅尔，
申请(专利权)人：法玛西雅厄普约翰美国公司，
类型：发明
国别省市：