灰树花发酵液多糖提取方法技术

本发明专利技术涉及食用菌提取物技术领域，本发明专利技术的发明专利技术特点在于采用灰树花发酵液提取多糖。其方法是采用斜面菌种进行一级种子培养、二级种子培养及三级种子培养，再进行发酵培养，最后将发酵液的温度加热到６０－１００℃，搅拌速度为１２０－２２０ｒ／ｍｉｎ，维持１－３小时，经泵压将发酵液放入料槽中经板框压滤得到灰树花多糖。由于不采用灰树花子实体或菌丝，因而解决了灰树花实体及菌丝人工栽培困难大、产量低、生态条件苛刻，成本昂贵的不足；可选用多糖高的优良菌株；大幅度缩短了多糖提取的前处理时间；大幅度降低了劳动强度等。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及食用菌提取物
，是一种采用灰树花发酵液进行多糖提取的方法。灰树花是一种珍稀食药两用真菌。灰树花多糖具有抗肿瘤、抗高血压、降低血糖、抗肥胖、抗肝炎等药效。经国际医学专家试验表明，灰树花多糖抗肿瘤抑制率可达86.5％，比国际认证的抗癌新药“香菇多糖”抑制率高出32％。目前，灰树花提取多糖，一般采用灰树花子实体或菌丝。由于灰树花的人工栽培技术高、产量低、生产周期长、劳动强度大，并受自然条件的限制多，生态条件苛刻，产量难以大幅度提高。采用其子实体及菌丝提取多糖，成本昂贵，很难实现灰树花多糖的普遍应用。本专利技术的目的是，提供一种采用灰树花发酵液提取多糖的方法，可以大幅度降低灰树花提取多糖的生产成本，缩短灰树花多糖提取的时间，使灰树花多糖普遍应用成为现实。本专利技术的专利技术特点在于采用灰树花发酵液提取多糖。其方法是采用斜面菌种进行一级种子培养、二级种子培养及三级种子培养，再进行发酵培养，最后将发酵液的温度加热到60-100℃，搅拌速度为120-220r/min，维持1-3小时，经泵压将发酵液放入料槽中经板框压滤得到灰树花多糖。该提取液经配伍后即成口服液。斜面菌种组份是，淀粉150-250g，麦麸30-60g，蔗糖10-20g，葡萄糖3-10g，琼脂15-25g，水1000毫升。所述一级种子培养，二级种子培养及三级种子培养的组份是玉米淀粉0.5-2％；蛋白胨0.1-0.3％，蔗糖0.5-2％，葡萄糖0.5-2％，KH2PO40.1-0.3％，MgSO40.05-0.15％。发酵培养的组份是玉米淀粉0.5-2％；蛋白胨0.1-0.3％，KH2PO40.1-0.3％，MgSO40.05-0.15％，豆油适量。一级种子培养、二级种子培养及三级种子培养的发酵条件是，搅拌速度120-150r/min，通气量1∶0.5-v/v.min，培养温度25-30℃，培养时间，5-7天，接种量1-5％，罐压为0.3-0.5kg/cm2。发酵培养的发酵条件是搅拌速度150-220r/min，通气量1∶0.5-1∶1v/v.min，培养温度20-30℃，培养时间7-12天，接种量10-15％，罐压0.3-0.5kg/cm2。采用本专利技术的方法提取灰树花多糖具有以下优点由于不采用灰树花子实体或菌丝，因而解决了灰树花实体及菌丝人工栽培困难大、产量低、生态条件苛刻，成本昂贵的不足；可选用多糖高的优良菌株；由于人工栽培灰树花子实体生长期需要6-8个月，并对环境要求十分苛刻，本专利技术的方法只需25-35天，所以大幅度缩短了多糖提取的前处理时间；大幅度降低了劳动强度等。采用本专利技术所述方法提取灰树花粗多糖可达到30-40％。采用本专利技术的方法制取多糖所需胶囊时，即；当按照本专利技术所述方法终止发酵后，将发酵液的温度升到60-100℃，并向反应罐中加入0.1-0.2N的草酸铵、搅拌速度为120-220v/min，保持1-3小时，然后经泵压将发酵液放到料槽中经板框压滤，滤液减压浓缩，使之体积控制在原液的1/5-1/10。浓缩液加4倍体积的95％乙醇，醇析24-36小时，后板框过滤或用碟片离心机离心，将沉淀物真空干燥后，即为灰树花多糖粗品，可用来制备胶囊。采用本专利技术提取纯多糖的方法终止发酵后，将发酵液温度升到60-100℃，并向反应罐中加入0.1-0.2N的草酸铵、搅拌速度为120-220v/min，保持1-2小时，然后板框过滤，将滤液减压浓缩。使其体积控制在原液的1/5-1/10，除去蛋白后、加入4-5倍体积的95％乙醇，醇析24-36小时，板框压滤、加收乙醇。用蒸馏水溶解沉淀，溶解度为10-20％硅胶或葡萄糖过柱，淋洗速度为1-2ml/min，减压浓缩到原体积的5-10％，再加4-5倍的乙醇醇析，将醇析后的沉淀真空冷冻干燥，后即得到灰树花的纯多糖。采用本专利技术方法提取灰树花多糖实施例将筛选后的菌种加入1000毫升水，并加入马铃薯液体200g，麦麸液体60g(也可以只采用马铃薯或麦麸)，蔗糖14g，葡萄糖3g(也可在此两种糖中任选一种)，琼脂22g，将PH值保持自然，然后进行一级种子培养、二级种子培养及三级种子培养，这三级种子培养的组份是，玉米淀粉0.8％，蛋白胨(也可采用硫酸0.1-0.3％铵)，KH2P40.15％，MgSO40.1％，在培养罐中加入一定量的水，一般根据罐的容量决定，通常是罐容量的60％。上述三种种子培养的发酵条件是，搅拌速度120r/min，通气量1∶1v/v.min，培养温度25℃，培养时间7天，接种量4％，罐压0.5kg/cm2。再进行发酵培养，其组份是，玉米淀粉1％，蛋白胨0.2％，硫酸铵0.1％(当提取多糖纯品时不加入该成份)，KH2PO40.1％，MgSO40.1％，再加入适量豆油(也可加入菜子油替代)，便于消沫，PH值保持自然。此时的发酵条件是，搅拌速度200r/min，通气量1∶0.5v/v.min，培养温度25℃，培养时间10天，接种量10％，罐压0.3kg/cm2，当发酵终止后，将发酵液加热到70℃，搅拌速度为750r/min，维持2.5小时，然后经泵压将发酵液放到料槽中经板框压滤，得到灰树花多糖提取液。本方法中可以在发酵液加热时，加入0.1-0.2N的NaOH，也可加入0.1-0.2N的草酸铵，便于将培养物中的多糖浸提出来。权利要求1.，其特征在于采用斜面菌种进行一级种子培养、二级种子培养及三级种子培养，再进行发酵培养，最后将发酵液的温度加热到60-100℃，搅拌速度为120-220r/min，维持1-3小时，经泵压将发酵液放入料槽中经板框压滤得到灰树花多糖。2.根据权利要求1所述的，其特征在于所述的斜面菌种组份是，淀粉150-250g，麦麸30-60g，蔗糖10-20g，葡萄糖3-10g，琼脂15-25g，水1000毫升。3.根据权利要求1所述的，其特征在于所述一级种子培养，二级种子培养及三级种子培养的组份是玉米淀粉0.5-2％；蛋白胨0.1-0.3％，蔗糖0.5-2％，葡萄糖0.5-2％，KH2PO40.1-0.3％，MgSO40.05-0.15％。4.、根据权利要求1所述的，其特征在于发酵培养的组份是玉米淀粉0.5-2％；蛋白胨0.1-0.3％，KH2PO40.1-0.3％，MgSO40.05-0.15％，豆油适量。5.根据权利要求1所述的，其特征在于一级种子培养、二级种子培养及三级种子培养的发酵条件是，搅拌速度120-150r/min，通气量1∶0.5-v/v.min，培养温度25-30℃，培养时间，5-7天，接种量1-5％，罐压为0.3-0.5kg/cm2。6.根据权利要求1或4所述的，其特征在于发酵培养的发酵条件是搅拌速度150-220r/min，通气量1∶0.5-1∶1v/v.min，培养温度20-30℃，培养时间7-12天，接种量10-15％，罐压0.3-0.5kg/cm2。全文摘要本专利技术涉及食用菌提取物
,本专利技术的专利技术特点在于采用灰树花发酵液提取多糖。其方法是采用斜面菌种进行一级种子培养、二级种子培养及三级种子培养,再进行发酵培养,最后将发酵液的温度加热到60—100℃,搅拌速度为120—220r/min,维持1—3小时,经泵压将发酵液放入料槽中经板框压滤得到灰树花多糖。由本文档来自技高网...

【技术保护点】
灰树花发酵液多糖提取方法，其特征在于：采用斜面菌种进行一级种子培养、二级种子培养及三级种子培养，再进行发酵培养，最后将发酵液的温度加热到６０－１００℃，搅拌速度为１２０－２２０ｒ／ｍｉｎ，维持１－３小时，经泵压将发酵液放入料槽中经板框压滤得到灰树花多糖。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：宋爱荣，
申请(专利权)人：莱阳农学院，
类型：发明
国别省市：37[中国|山东]